Expansion and water absorption on different injectable hyaluronic acids

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Autor(a) principal: Paulino, Patrícia Bengala
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/61591
Resumo: A injeção de fillers de ácido hialurónico é uma prática clínica cada vez mais comum nos procedimentos de rejuvenescimento e harmonização facial, devido ao aumento do interesse por métodos não cirúrgicos e o menos invasivos possível. Estes são assim uma mais-valia no que toca a melhorar a autoestima, as relações interpessoais e a qualidade de vida dos pacientes. Ainda assim, não existe um filler universal apropriado para todos os pacientes e situações clínicas que possam surgir, havendo necessidade de uma individualização da escolha e planeamento do tratamento. Devido à sua grande procura e utilização cada vez mais frequente em consultórios, torna-se essencial o estudo e conhecimento das propriedades físico-químicas e reológicas do dos fillers de ácido hialurónico de diferentes marcas presentes no mercado. Deste modo, o presente estudo pretende avaliar algumas destas propriedades numa gama de fillers comercializados pela Fillmed® (Medical Filler D.S.P., França), constituída pela gama ART FILLER Universal, ART FILLER Fine Lines, ART FILLER Volume, ART FILLER Lips e ART FILLER Lips Soft, uma das marcas mais comercializadas em Portugal, tendo essencialmente dois objetivos baseados no carácter hidrofílico do ácido hialurónico, que se traduz na sua capacidade de reter água e de expandir, contribuindo deste modo para a capacidade de volumização dos fillers. Pretende-se assim, por um lado, avaliar e comparar a capacidade de absorção de água dos cinco grupos de estudo e, por outro lado, avaliar a sua capacidade de expansão. Para os objetivos propostos foram realizadas avaliações com metodologias distintas. Inicialmente, num estudo in vitro, foi determinada a capacidade de absorção de água de cada filler, recorrendo a 10 amostras de cada um deles. Foi calculado o peso inicial de todos os tubos Eppendorfs utilizados com recurso a uma balança analítica, aos quais foi adicionado ácido hialurónico injetável de cada grupo em estudo e PBS (solução tampão fosfato-salino). Todas as soluções foram homogeneizadas e incubadas numa estufa por 24 horas a 37ºC. Posteriormente foram centrifugadas a 3500 rpm durante 5 minutos e o sobrenadante foi descartado, tendo sido determinado o peso final de todas as amostras dos grupos em estudo. O peso final de cada amostra foi dividido pelo seu peso inicial, de modo a obter o swelling ratio (Sw), cálculo que traduz o aumento de peso de cada amostra e, por isso, a sua capacidade de absorver água. Para avaliação e comparação in vitro 2D (bidimensional) das alterações de volume de cada filler de ácido hialurónico em estudo, foram utilizadas 6 amostras por grupo. A mesma quantidade de todas as amostras foi disposta em lâminas de microscópio, sendo estas fotografadas paralelamente a uma régua metálica, de forma calibrada pelo mesmo operador. Foi realizada uma avaliação estrutural qualitativa e quantitativa com recurso ao programa Fiji ImageJ por 3 medições em centímetros, correspondentes à largura das linhas obtidas. As amostras foram posteriormente hidratadas com igual volume de PBS por 2 horas e realizada nova avaliação fotográfica padronizada, permitindo a comparação das amostras. Finalmente, foi realizada a avaliação das alterações volumétricas 3D (tridimensional) dos fillers em estudo mimetizando as condições in vivo. Foram incluídas amostras dos grupos em estudo na pele de porco (tecido ex vivo) e avaliadas por scanneamento digital ao longo do tempo. Igual quantidade de amostra de cada grupo foi injetada superficialmente na pele de porco, em linhas de igual tamanho. Como controlo definiu-se igual tamanho numa porção da peça tecidual não injetada. A peça foi digitalizada com um scanner intraoral 3Shape Trios ao longo do tempo (antes de injetar os fillers- t0, imediatamente após a injeção- t1, 30 minutos depois- t2, 2 horas depois- t3 e 24 horas depois- t4). Os ficheiros STL obtidos foram comparados com base em medições comparativas realizadas em 3 pontos de cada linha de avaliação por amostra. A análise estatística foi realizada através da 28ª versão do software IBM® SPSS® Statistics, tendo-se estabelecido um nível de significância de α=5%. Foram realizados os testes Shapiro-Wilk para a avaliação da normalidade, o teste de Levene e o teste ANOVA. As comparações múltiplas foram estabelecidas através do teste Tukey post-hoc. Os resultados foram apresentados sobre a forma de média e desvio-padrão. Todos os fillers revelaram um aumento de peso após a absorção de água. Quando comparado o swelling ratio entre grupos, o Lips revelou-se estatisticamente superior (Sw= 2,6158 ± 0,1605) comparativamente com os restantes grupos (p <0,05). O Universal (Sw= 2,3062 ± 0,1644) foi ainda estatisticamente superior (p= 0,021) ao Fine Lines (Sw= 2,0262 ± 0,1651). Na avaliação bidimensional qualitativa observou-se uma maior fluidez e menor capacidade de manter a sua forma e consistência iniciais no Fine Lines. O Lips Soft e o Universal mostraram ser também mais fluidos, ao contrário do Lips e do Volume, que tinham uma aparência mais viscosa e uma menor perda de consistência. A avaliação quantitativa das dimensões iniciais vai de encontro a esta análise, sendo que o Fine Lines apresenta uma largura inicial (0,426 ± 0,041 cm) estatisticamente superior aos outros fillers (p <0,05), com exceção do Lips Soft (0,366 ± 0,038 cm). O Volume (0,303 ± 0,027 cm) apresentou valores estatisticamente inferiores ao Universal (0,366 ± 0,038 cm; p= 0,018) e ao Lips Soft (p= 0,007). No que diz respeito à avaliação do volume tridimensional na pele do porco, imediatamente após injeção dos fillers, o Fine Lines apresentou a maior capacidade de projeção tecidual, estatisticamente superior aos grupos Universal e Volume (p <0,001). Lips apresentou a segunda maior projeção, havendo também diferenças estatísticas com o Volume (p= 0,006) e o Universal (p <0,001), que apresentaram a terceira e quarta maior projeção, respetivamente. Não existiram diferenças estatísticas em relação à expansão percentual total- foi igualmente maior no Fine Lines (92 ± 43 %), seguido do Universal (79 ± 39 %), Lips (44 ± 41 %) e, por fim, Volume (39 ± 13 %), apesar de não existirem diferenças estatísticas. Não foram obtidos resultados relativos ao Lips Soft por limitação de stock. Este estudo mostrou que todos os fillers estudados têm a capacidade de absorver água e de expandir até pelo menos 24 horas após a sua injeção na pele. O Lips mostrou ser aquele que consegue absorver mais água, estando associado a uma alta coesividade e viscosidade, o que se traduz numa expansão total 3D de 44 ± 41 %. O Fine Lines teve tendência para absorver menos, apesar deste não apresentar diferenças estatísticas com todos os grupos, sendo também o filler mais fluido e menos coeso, com uma expansão total 3D de 92 ± 43 %, não se tendo verificado, no entanto, diferenças estatísticas na comparação da expansão total entre grupos. Estes valores podem dever-se ao baixo tamanho amostral da avaliação 3D ou à influência de outras propriedades dos fillers que não foram avaliadas neste estudo, já que existe uma sinergia entre estas propriedades no que diz respeito à performance clínica dos fillers de ácido hialurónico. Apesar de conseguirmos determinar qual o filler com a maior capacidade de absorção de água e realizar uma avaliação qualitativa bidimensional da consistência e coesividade dos grupos em estudo, são necessários mais estudos com uma amostra maior que estabeleçam uma comparação entre a projeção tridimensional dos mesmos, e que contribuam para o estabelecimento de protocolos objetivos e detalhados para a aplicação de ácido hialurónico injetável, sempre com o objetivo de garantir um tratamento individualizado e o mais eficiente possível em cada situação clínica.
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Deste modo, o presente estudo pretende avaliar algumas destas propriedades numa gama de fillers comercializados pela Fillmed® (Medical Filler D.S.P., França), constituída pela gama ART FILLER Universal, ART FILLER Fine Lines, ART FILLER Volume, ART FILLER Lips e ART FILLER Lips Soft, uma das marcas mais comercializadas em Portugal, tendo essencialmente dois objetivos baseados no carácter hidrofílico do ácido hialurónico, que se traduz na sua capacidade de reter água e de expandir, contribuindo deste modo para a capacidade de volumização dos fillers. Pretende-se assim, por um lado, avaliar e comparar a capacidade de absorção de água dos cinco grupos de estudo e, por outro lado, avaliar a sua capacidade de expansão. Para os objetivos propostos foram realizadas avaliações com metodologias distintas. Inicialmente, num estudo in vitro, foi determinada a capacidade de absorção de água de cada filler, recorrendo a 10 amostras de cada um deles. Foi calculado o peso inicial de todos os tubos Eppendorfs utilizados com recurso a uma balança analítica, aos quais foi adicionado ácido hialurónico injetável de cada grupo em estudo e PBS (solução tampão fosfato-salino). Todas as soluções foram homogeneizadas e incubadas numa estufa por 24 horas a 37ºC. Posteriormente foram centrifugadas a 3500 rpm durante 5 minutos e o sobrenadante foi descartado, tendo sido determinado o peso final de todas as amostras dos grupos em estudo. O peso final de cada amostra foi dividido pelo seu peso inicial, de modo a obter o swelling ratio (Sw), cálculo que traduz o aumento de peso de cada amostra e, por isso, a sua capacidade de absorver água. Para avaliação e comparação in vitro 2D (bidimensional) das alterações de volume de cada filler de ácido hialurónico em estudo, foram utilizadas 6 amostras por grupo. A mesma quantidade de todas as amostras foi disposta em lâminas de microscópio, sendo estas fotografadas paralelamente a uma régua metálica, de forma calibrada pelo mesmo operador. Foi realizada uma avaliação estrutural qualitativa e quantitativa com recurso ao programa Fiji ImageJ por 3 medições em centímetros, correspondentes à largura das linhas obtidas. As amostras foram posteriormente hidratadas com igual volume de PBS por 2 horas e realizada nova avaliação fotográfica padronizada, permitindo a comparação das amostras. Finalmente, foi realizada a avaliação das alterações volumétricas 3D (tridimensional) dos fillers em estudo mimetizando as condições in vivo. Foram incluídas amostras dos grupos em estudo na pele de porco (tecido ex vivo) e avaliadas por scanneamento digital ao longo do tempo. Igual quantidade de amostra de cada grupo foi injetada superficialmente na pele de porco, em linhas de igual tamanho. Como controlo definiu-se igual tamanho numa porção da peça tecidual não injetada. A peça foi digitalizada com um scanner intraoral 3Shape Trios ao longo do tempo (antes de injetar os fillers- t0, imediatamente após a injeção- t1, 30 minutos depois- t2, 2 horas depois- t3 e 24 horas depois- t4). Os ficheiros STL obtidos foram comparados com base em medições comparativas realizadas em 3 pontos de cada linha de avaliação por amostra. A análise estatística foi realizada através da 28ª versão do software IBM® SPSS® Statistics, tendo-se estabelecido um nível de significância de α=5%. Foram realizados os testes Shapiro-Wilk para a avaliação da normalidade, o teste de Levene e o teste ANOVA. As comparações múltiplas foram estabelecidas através do teste Tukey post-hoc. Os resultados foram apresentados sobre a forma de média e desvio-padrão. Todos os fillers revelaram um aumento de peso após a absorção de água. Quando comparado o swelling ratio entre grupos, o Lips revelou-se estatisticamente superior (Sw= 2,6158 ± 0,1605) comparativamente com os restantes grupos (p <0,05). O Universal (Sw= 2,3062 ± 0,1644) foi ainda estatisticamente superior (p= 0,021) ao Fine Lines (Sw= 2,0262 ± 0,1651). Na avaliação bidimensional qualitativa observou-se uma maior fluidez e menor capacidade de manter a sua forma e consistência iniciais no Fine Lines. O Lips Soft e o Universal mostraram ser também mais fluidos, ao contrário do Lips e do Volume, que tinham uma aparência mais viscosa e uma menor perda de consistência. A avaliação quantitativa das dimensões iniciais vai de encontro a esta análise, sendo que o Fine Lines apresenta uma largura inicial (0,426 ± 0,041 cm) estatisticamente superior aos outros fillers (p <0,05), com exceção do Lips Soft (0,366 ± 0,038 cm). O Volume (0,303 ± 0,027 cm) apresentou valores estatisticamente inferiores ao Universal (0,366 ± 0,038 cm; p= 0,018) e ao Lips Soft (p= 0,007). No que diz respeito à avaliação do volume tridimensional na pele do porco, imediatamente após injeção dos fillers, o Fine Lines apresentou a maior capacidade de projeção tecidual, estatisticamente superior aos grupos Universal e Volume (p <0,001). Lips apresentou a segunda maior projeção, havendo também diferenças estatísticas com o Volume (p= 0,006) e o Universal (p <0,001), que apresentaram a terceira e quarta maior projeção, respetivamente. Não existiram diferenças estatísticas em relação à expansão percentual total- foi igualmente maior no Fine Lines (92 ± 43 %), seguido do Universal (79 ± 39 %), Lips (44 ± 41 %) e, por fim, Volume (39 ± 13 %), apesar de não existirem diferenças estatísticas. Não foram obtidos resultados relativos ao Lips Soft por limitação de stock. Este estudo mostrou que todos os fillers estudados têm a capacidade de absorver água e de expandir até pelo menos 24 horas após a sua injeção na pele. O Lips mostrou ser aquele que consegue absorver mais água, estando associado a uma alta coesividade e viscosidade, o que se traduz numa expansão total 3D de 44 ± 41 %. O Fine Lines teve tendência para absorver menos, apesar deste não apresentar diferenças estatísticas com todos os grupos, sendo também o filler mais fluido e menos coeso, com uma expansão total 3D de 92 ± 43 %, não se tendo verificado, no entanto, diferenças estatísticas na comparação da expansão total entre grupos. Estes valores podem dever-se ao baixo tamanho amostral da avaliação 3D ou à influência de outras propriedades dos fillers que não foram avaliadas neste estudo, já que existe uma sinergia entre estas propriedades no que diz respeito à performance clínica dos fillers de ácido hialurónico. Apesar de conseguirmos determinar qual o filler com a maior capacidade de absorção de água e realizar uma avaliação qualitativa bidimensional da consistência e coesividade dos grupos em estudo, são necessários mais estudos com uma amostra maior que estabeleçam uma comparação entre a projeção tridimensional dos mesmos, e que contribuam para o estabelecimento de protocolos objetivos e detalhados para a aplicação de ácido hialurónico injetável, sempre com o objetivo de garantir um tratamento individualizado e o mais eficiente possível em cada situação clínica.Objectives: This study intended to evaluate and compare water absorption and expansion capacity (both two-dimensional and three-dimensional) of the different hyaluronic acid fillers from Fillmed’s ART FILLER® line (Universal, Fine Lines, Volume, Lips e Lips Soft). Materials and Methods: Water absorption (n=10) was measured through swelling ratio, by dividing the weight of each filler after having absorbed PBS (phosphate-buffered saline) over 24 hours by their initial dry weight. For two-dimensional evaluation (n=6) each filler sample was injected on top of microscope coverslips. Photographs were taken with a metallic ruler before and two hours after adding PBS, and qualitative and quantitative analysis were performed. Three-dimensional volume (n=1) was measured up until 24 hours after injecting each filler in ex vivo pig skin. The skin was scanned with the 3Shape TRIOS scanner and comparative measurements were performed with STL files. Differences were considered statistically significant at p-value ≤ 0,05. Results: There were statistically significant differences between Lips and all other fillers regarding swelling ratio (p < 0,05), with Lips’ being the highest (Sw= 2,6158 ± 0,1605). Fine Lines’ (Sw= 2,0262 ± 0,1651) was statistically lower (p= 0,021) than Universal’s (Sw= 2,3062 ± 0,1644). Fine Lines was the most fluid, with a statistically significant higher initial width (0,426 ± 0,041 cm) when compared to all fillers (p <0,05), except Lips Soft. Volume was the most viscous and retained its initial shape the most. There were no statistically significant differences regarding total 3D expansion. Conclusion: All fillers absorbed water and expanded, with Lips absorbing the most water and Fine Lines showing a tendency to expand the most vertically, even though it was the most fluid and least cohesive. Future studies should use larger samples and further investigate these properties and what influences them.Santos, Virgínia CarvalhoCruz, Mariana Brito daRepositório da Universidade de LisboaPaulino, Patrícia Bengala2024-01-04T11:44:04Z2023-07-262023-07-26T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/61591TID:203352947enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-01-08T01:17:03Zoai:repositorio.ul.pt:10451/61591Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T01:30:44.135893Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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Deste modo, o presente estudo pretende avaliar algumas destas propriedades numa gama de fillers comercializados pela Fillmed® (Medical Filler D.S.P., França), constituída pela gama ART FILLER Universal, ART FILLER Fine Lines, ART FILLER Volume, ART FILLER Lips e ART FILLER Lips Soft, uma das marcas mais comercializadas em Portugal, tendo essencialmente dois objetivos baseados no carácter hidrofílico do ácido hialurónico, que se traduz na sua capacidade de reter água e de expandir, contribuindo deste modo para a capacidade de volumização dos fillers. Pretende-se assim, por um lado, avaliar e comparar a capacidade de absorção de água dos cinco grupos de estudo e, por outro lado, avaliar a sua capacidade de expansão. Para os objetivos propostos foram realizadas avaliações com metodologias distintas. Inicialmente, num estudo in vitro, foi determinada a capacidade de absorção de água de cada filler, recorrendo a 10 amostras de cada um deles. Foi calculado o peso inicial de todos os tubos Eppendorfs utilizados com recurso a uma balança analítica, aos quais foi adicionado ácido hialurónico injetável de cada grupo em estudo e PBS (solução tampão fosfato-salino). Todas as soluções foram homogeneizadas e incubadas numa estufa por 24 horas a 37ºC. Posteriormente foram centrifugadas a 3500 rpm durante 5 minutos e o sobrenadante foi descartado, tendo sido determinado o peso final de todas as amostras dos grupos em estudo. O peso final de cada amostra foi dividido pelo seu peso inicial, de modo a obter o swelling ratio (Sw), cálculo que traduz o aumento de peso de cada amostra e, por isso, a sua capacidade de absorver água. Para avaliação e comparação in vitro 2D (bidimensional) das alterações de volume de cada filler de ácido hialurónico em estudo, foram utilizadas 6 amostras por grupo. A mesma quantidade de todas as amostras foi disposta em lâminas de microscópio, sendo estas fotografadas paralelamente a uma régua metálica, de forma calibrada pelo mesmo operador. Foi realizada uma avaliação estrutural qualitativa e quantitativa com recurso ao programa Fiji ImageJ por 3 medições em centímetros, correspondentes à largura das linhas obtidas. As amostras foram posteriormente hidratadas com igual volume de PBS por 2 horas e realizada nova avaliação fotográfica padronizada, permitindo a comparação das amostras. Finalmente, foi realizada a avaliação das alterações volumétricas 3D (tridimensional) dos fillers em estudo mimetizando as condições in vivo. Foram incluídas amostras dos grupos em estudo na pele de porco (tecido ex vivo) e avaliadas por scanneamento digital ao longo do tempo. Igual quantidade de amostra de cada grupo foi injetada superficialmente na pele de porco, em linhas de igual tamanho. Como controlo definiu-se igual tamanho numa porção da peça tecidual não injetada. A peça foi digitalizada com um scanner intraoral 3Shape Trios ao longo do tempo (antes de injetar os fillers- t0, imediatamente após a injeção- t1, 30 minutos depois- t2, 2 horas depois- t3 e 24 horas depois- t4). Os ficheiros STL obtidos foram comparados com base em medições comparativas realizadas em 3 pontos de cada linha de avaliação por amostra. A análise estatística foi realizada através da 28ª versão do software IBM® SPSS® Statistics, tendo-se estabelecido um nível de significância de α=5%. Foram realizados os testes Shapiro-Wilk para a avaliação da normalidade, o teste de Levene e o teste ANOVA. As comparações múltiplas foram estabelecidas através do teste Tukey post-hoc. Os resultados foram apresentados sobre a forma de média e desvio-padrão. Todos os fillers revelaram um aumento de peso após a absorção de água. Quando comparado o swelling ratio entre grupos, o Lips revelou-se estatisticamente superior (Sw= 2,6158 ± 0,1605) comparativamente com os restantes grupos (p <0,05). O Universal (Sw= 2,3062 ± 0,1644) foi ainda estatisticamente superior (p= 0,021) ao Fine Lines (Sw= 2,0262 ± 0,1651). Na avaliação bidimensional qualitativa observou-se uma maior fluidez e menor capacidade de manter a sua forma e consistência iniciais no Fine Lines. O Lips Soft e o Universal mostraram ser também mais fluidos, ao contrário do Lips e do Volume, que tinham uma aparência mais viscosa e uma menor perda de consistência. A avaliação quantitativa das dimensões iniciais vai de encontro a esta análise, sendo que o Fine Lines apresenta uma largura inicial (0,426 ± 0,041 cm) estatisticamente superior aos outros fillers (p <0,05), com exceção do Lips Soft (0,366 ± 0,038 cm). O Volume (0,303 ± 0,027 cm) apresentou valores estatisticamente inferiores ao Universal (0,366 ± 0,038 cm; p= 0,018) e ao Lips Soft (p= 0,007). No que diz respeito à avaliação do volume tridimensional na pele do porco, imediatamente após injeção dos fillers, o Fine Lines apresentou a maior capacidade de projeção tecidual, estatisticamente superior aos grupos Universal e Volume (p <0,001). Lips apresentou a segunda maior projeção, havendo também diferenças estatísticas com o Volume (p= 0,006) e o Universal (p <0,001), que apresentaram a terceira e quarta maior projeção, respetivamente. Não existiram diferenças estatísticas em relação à expansão percentual total- foi igualmente maior no Fine Lines (92 ± 43 %), seguido do Universal (79 ± 39 %), Lips (44 ± 41 %) e, por fim, Volume (39 ± 13 %), apesar de não existirem diferenças estatísticas. Não foram obtidos resultados relativos ao Lips Soft por limitação de stock. Este estudo mostrou que todos os fillers estudados têm a capacidade de absorver água e de expandir até pelo menos 24 horas após a sua injeção na pele. O Lips mostrou ser aquele que consegue absorver mais água, estando associado a uma alta coesividade e viscosidade, o que se traduz numa expansão total 3D de 44 ± 41 %. O Fine Lines teve tendência para absorver menos, apesar deste não apresentar diferenças estatísticas com todos os grupos, sendo também o filler mais fluido e menos coeso, com uma expansão total 3D de 92 ± 43 %, não se tendo verificado, no entanto, diferenças estatísticas na comparação da expansão total entre grupos. Estes valores podem dever-se ao baixo tamanho amostral da avaliação 3D ou à influência de outras propriedades dos fillers que não foram avaliadas neste estudo, já que existe uma sinergia entre estas propriedades no que diz respeito à performance clínica dos fillers de ácido hialurónico. Apesar de conseguirmos determinar qual o filler com a maior capacidade de absorção de água e realizar uma avaliação qualitativa bidimensional da consistência e coesividade dos grupos em estudo, são necessários mais estudos com uma amostra maior que estabeleçam uma comparação entre a projeção tridimensional dos mesmos, e que contribuam para o estabelecimento de protocolos objetivos e detalhados para a aplicação de ácido hialurónico injetável, sempre com o objetivo de garantir um tratamento individualizado e o mais eficiente possível em cada situação clínica.
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