Platelet lysates loaded laminarin micropartcicles for cell attachment and expansion

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Martins, Cláudia Isabel Rodrigues
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22763
Resumo: A engenharia de tecidos tem estudado a combinação de vários materiais com células com o intuito de solucionar alguns problemas que as atuais terapias não conseguem dar resposta. Umas das respostas passa pelo desenvolvimento de pequenas estruturas, microgéis, que mimetizam a matriz extracelular e podem interagir de várias formas para criar uma estrutura tridimensional complexa. Este trabalho resume as principais técnicas de microfabricação que têm sido usadas no desenvolvimento de microgéis assim como as principais aplicações destas na engenharia de tecidos. Uma dessas técnicas, a microfluídica foi neste trabalho usada para produzir micropartículas de laminarina. Este polímero foi quimicamente modificado, adicionando grupos metacrilato que permitiram a reticulação das gotículas formadas pela microfluídica quando expostas a luz ultravioleta. Esta tecnologia permite encapsular lisados de plaquetas humanos durante a produção das micropartículas. As micropartículas apresentam elevado grau de monodispersão e uma forma esférica com diâmetro médio de 326.6 μm nas micropartículas com elevado grau de modificação e 303.3 μm nas micropartículas com baixo grau de modificação. Estudos de libertação demonstraram que diferentes graus de modificação da laminarina permite obter diferentes perfis de libertação das proteínas encapsuladas. Ao fim de 14 dias as micropartículas com alto grau de modificação tinham libertado 56.89 ± 1.03% da proteína encapsulada enquanto as micropartículas com baixo nível de modificação libertaram 35.31 ± 2.73%. As partículas funcionais foram então testadas como suporte para cultura de células. Os resultados mostraram que as partículas funcionalizadas com RGD e lisados encapsulados permitem uma eficiente adesão e expansão celular. As células cultivadas na superfície dos microgéis promovem ainda agregação dos mesmos em estruturas tridimensionais. Para aplicações clínicas, hidrogéis injetáveis/moldáveis são muitas vezes necessários para preencher defeitos de geometrias irregulares. Estes microgéis de elevada versatilidade podem vir a traduzir-se no desenvolvimento de sistemas de elevado desempenho para a produção de sistemas injetáveis para aplicações em engenharia de tecidos.
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Este polímero foi quimicamente modificado, adicionando grupos metacrilato que permitiram a reticulação das gotículas formadas pela microfluídica quando expostas a luz ultravioleta. Esta tecnologia permite encapsular lisados de plaquetas humanos durante a produção das micropartículas. As micropartículas apresentam elevado grau de monodispersão e uma forma esférica com diâmetro médio de 326.6 μm nas micropartículas com elevado grau de modificação e 303.3 μm nas micropartículas com baixo grau de modificação. Estudos de libertação demonstraram que diferentes graus de modificação da laminarina permite obter diferentes perfis de libertação das proteínas encapsuladas. Ao fim de 14 dias as micropartículas com alto grau de modificação tinham libertado 56.89 ± 1.03% da proteína encapsulada enquanto as micropartículas com baixo nível de modificação libertaram 35.31 ± 2.73%. As partículas funcionais foram então testadas como suporte para cultura de células. Os resultados mostraram que as partículas funcionalizadas com RGD e lisados encapsulados permitem uma eficiente adesão e expansão celular. As células cultivadas na superfície dos microgéis promovem ainda agregação dos mesmos em estruturas tridimensionais. Para aplicações clínicas, hidrogéis injetáveis/moldáveis são muitas vezes necessários para preencher defeitos de geometrias irregulares. Estes microgéis de elevada versatilidade podem vir a traduzir-se no desenvolvimento de sistemas de elevado desempenho para a produção de sistemas injetáveis para aplicações em engenharia de tecidos.Tissue engineering has studied the combination of diverse biomaterials with cells in order to overcome some limitations of traditional therapies. One of solutions is related with the development of microstructures, microgels, that mimic the extracellular matrix and can assemble to create a complex three-dimensional structure. This work reviews the microfabrication techniques that been used to fabricate these microstructures as well as the main application of these in tissue engineering. One of this technique, microfluidic flow-focusing has been used to produce laminarin microparticles. This polymer was chemical modified, by adding methacrylated groups that allowed the photopolymerization of laminarin droplets when exposed to UV light. This technology allows to encapsulate human platelet lysates during fabrication of microgels by microfluidic. The microparticles shows high monodisperse and spherical shape with an average diameter around 326.6 μm in the microparticles with high degree of modification and 303.3 μm in the microparticles with low degree of modifications. The release studies demonstrate that different levels of modification of the laminarin microparticles allow to obtain different encapsulated proteins release profiles. At the end of 14 days the high methacrylated laminarin released 56.89 ± 1.03% of total amount of protein while low methacrylated laminarin released 35.31 ± 2.73%. The results showed that RGD functionalized particles with encapsulated platelet lysates allow an efficient cell adhesion and expansion. The cells cultured on the surface of microgels promote the assembly in three dimensional structures. For clinical applications, injectable/moldable hydrogels are several times necessaries to fill defects of irregular geometries. This highly versatility microgels can be translated in the development of the highperformance systems to production of injectable systems for applications in tissue engineeringUniversidade de Aveiro2018-03-26T14:04:28Z2017-01-01T00:00:00Z2017info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10773/22763TID:202239160engMartins, Cláudia Isabel Rodriguesinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-22T11:44:35Zoai:ria.ua.pt:10773/22763Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T02:56:49.583148Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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