Isolamento endógeno de plasmídeos e avaliação do potencial biotecnológico de bactérias associadas a esponjas marinhas

• Autor(a) principal: Bonifácio, Daniel Boer
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22730
• topic: Biotecnologia industrial e ambiental; Esponjas; Plasmídeos; Ecologia marinha

O microbioma das esponjas marinhas representa um tópico de investigação de interesse crescente uma vez que é ainda incipiente o conhecimento sobre as interações ecológicas entre os poríferos e a sua microflora e sobretudo, pelo seu potencial interesse comercial. Um elevado número de substâncias, incluindo moléculas farmacologicamente ativas, foi já identificado em esponjas marinhas e nos seus microrganismos associados. A elevada diversidade do microbioma de esponjas enquanto comunidade microbiana leva à hipótese de que este possa também conter uma grande diversidade de plasmídeos. No entanto, a informação disponível sobre o papel dos plasmídeos (mobiloma) nas interações entre os poríferos e os seus simbiontes ou na produção de metabolitos é ainda escassa. Este trabalho teve como objetivo a exploração do potencial biotecnológico de bactérias associadas a esponjas marinhas através do isolamento de plasmídeos e da caracterização bioquímica das bactérias cultiváveis do microbioma. O isolamento de bactérias contendo plasmídeos foi feito em meios de cultivo suplementados com antibióticos (cloranfenicol, canamicina, tetraciclina, trimetoprim ou metais/metaloides tóxicos (arsenito de sódio, cloreto de mercúrio) como agentes seletivos. Esta abordagem permitiu obter 42 estirpes das quais 18 continham plasmídeos. O meio seletivo contendo trimetoprim permitiu selecionar o maior número de isolados e o maior número de plasmídeos. No entanto, os meios suplementados com cloranfenicol e canamicina resultaram na maior percentagem de estirpes contendo plasmídeos. Para a caracterização fisiológica e bioquímica dos isolados, avaliou-se a produção de hemolisinas, biosurfactantes aniónicos e inibidores de quorum sensing. A atividade hemolítica foi detetada em isolados pertencentes aos géneros Bacillus, Pseudomonas, Psychrobacter, Shewanella e Vibrio. Nenhum dos isolados evidenciou produção de biosurfactantes aniónicos. Isolados dos géneros Pseudomonas, Vibrio e Bacillus mostraram atividade de inibição de quorum sensing. Tendo em consideração os dados obtidos, em trabalhos futuros, pretendemos proceder à sequenciação dos plasmídeos obtidos e à identificação de genes que codificam para vias metabólicas envolvidas na degradação de moléculas específicas, tais como N-Acil homoserina lactonas, e para outras famílias de compostos de interesse biotecnológico.