Pesquisa de proteínas líticas fágicas e formulações lipossomais para a sua entrega a Helicobacter pylori

• Autor(a) principal: Gomes, Maria de Vasconcelos
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.14/17423
• topic: Helicobacter pylori; Bacteriófagos; Lisina; Holina; Lipossomas; Bacteriophages; Lysin; Holin; Liposomes; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias

Devido ao aumento à resistência aos antibióticos de Helicobacter pylori é necessário desenvolver estratégias de erradicação alternativas, como por exemplo a terapia fágica, onde é possível utilizar proteínas líticas fágicas. Alguns dos genomas dos profagos de H. pylori identificados integram genes líticos, como a lisina, ou a holina. Foi pesquisado em 176 estirpes de H. pylori, a presença do gene da holina, habitualmente com localização próxima do gene da lisina. Esta estratégia revelou a presença do gene da holina em 32,4 % das estirpes analisadas. Destas, 87,7 % são também positivas para a presença do gene da integrase, cuja associação estatística foi verificada. Estes dados sugerem a presença de genes fágico líticos. A bactéria H. pylori é Gram-negativa e como tal a camada com o peptidoglicano está coberta com uma membrana externa impedindo o acesso da lisina ao peptidoglicano. Com o objetivo de ultrapassar esta barreira foram desenvolvidas formulações lipossomais com diferentes composições de forma a procurar uma que seja mais adequada à fusão com a membrana externa de H. pylori com consequente libertação do seu conteúdo (fármaco ou lisina) no espaço periplásmico. Para verificar a ação dos lipossomas foi realizado um ensaio de entrega de vancomicina e lisozima na forma livre e encapsulada em duas formulações lipossomais de forma a determinar a MIC para cada um dos compostos. Os resultados da determinação da MIC e a observação de imagens TEM sugerem que os lipossomas podem ser adequados para a entrega de fármacos ao espaço periplásmico de H. pylori.