Identification of neuronal proteins that interact with PP1y2

• Autor(a) principal: Cotrim, Cândida Zita dos Santos
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/4508
• topic: Biologia molecular; Proteínas; Fosfatases

A proteína fosfatase 1 (PP1) está envolvida em múltiplos processos de grande relevância fisiológica (por ex. aprendizagem, memória e neurotransmissão) e patológica (envelhecimento, doenças neurodegenerativas). No entanto, restam ainda por estabelecer importantes interacções de relevância fisiológica, bem como a localização intracelular onde estas interacções ocorrem. Esta complexidade é originada pela existência de três isoformas da PP1, organizadas tanto espacialmente como temporalmente e que podem alterar a sua localização intracelular de forma dinâmica. Este projecto focalizou a identificação de proteínas expressas em cérebro humano que interagem com PP1γ2, através da técnica Dois Híbrido em leveduras. Através desta técnica foram obtidos 317 clones positivos, permitindo a identificação de 298 proteínas que ligam à PP1γ2 e 19 proteínas que ligam PP1γ2end, entre as quais algumas proteínas já conhecidas por interagirem com a PP1, outras nunca antes associadas com a PP1 e várias proteínas não caracterizadas. Foi feito um estudo mais detalhado para três proteínas das mais abundantes, PINK1, BRI2 e BRI3. A ligação destas proteínas com PP1 foi analisada através de várias técnicas e a sua localização subcelular e co-localização com a PP1γ e APP foi estudada por imunocitoquímica. Os resultados aqui apresentados corroboram a localização subcelular destas proteínas e a ligação já descrita entre a APP e BRI2. Permitem acrescentar que PINK1, BRI2 e BRI3 interagem com PP1γ e que não só a proteína BRI2 mas também a BRI3 interagem com APP. Estudos futuros serão necessários para compreender o papel destas interacções no sistema neuronal. Estes resultados também validam o uso do sistema YTH como um meio de estudo para melhor compreender as funções da PP1 e sua regulação em diferentes eventos celulares.