A nitrosilação de proteínas em Leishmania infantum

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nunes, João Pedro da Costa
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/10697
Resumo: Tese de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2013
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Este objectivo foi conseguido utilizando duas abordagens proteómicas: a identificação por peptide mass fingerprint (PMF) por MALDI-FT-ICR e a análise por cromatografia líquida nano e espectrometria de massa (nanoLC-MS). O segundo objectivo foi a identificação dos processos metabólicos em que a nitrosilação pelo óxido nítrico poderá estar envolvida, de forma a perceber qual a importância desta modificação pós-traducional em L. infantum. No total foram identificadas 137 proteínas diferentes, 8 por MALDI-FT-ICR e 134 por nanoLC-MS. De salientar que apenas 3 proteínas identificadas por MALDI-FT-ICR não foram identificadas através de nanoLC-MS. De entre os vários processos celulares identificados, que contêm proteínas nitrosiladas, podemos destacar como mais relevantes os processos de folding proteíco, a resposta ao stress e o metabolismo dos glúcidos. No que diz respeito ao folding proteico, a S-nitrosilação das proteínas de choque térmico Hsp70 e Hsp83, bem como da proteína dissulfito isomerase, poderá modelar a sua função como chaperone. Em relação à resposta ao stress, é interessante a S-nitrosilação do triparedoxina peroxidase e do glioxalase I, enzimas envolvidos no stress oxidativo e carbonílico, respectivamente. A modificação destes enzimas pelo NO poderá inibir a sua actividade enzimática. Por fim, em relação ao metabolismo de glúcidos, a S-nitrosilação do GAPDH poderá exercer um papel fundamental no controlo do fluxo glicolítico o enolase poderá ter um papel importante no scavange do NO produzido pelo hospedeiro na fase de amastigota.The parasite Leishmania infantum, endemic from the Mediterranean region, including Portugal, it’s the leading cause of visceral leishmaniasis, a lethal condition if untreated and for which there are no human vaccines. Due to their complex life cycle, these parasites use posttranslational modifications (PTM), e.i. S-nitrosylation, to regulate the expression and function of proteins being these extremely important in the parasite’s development and infection capacity. One of the two main objectives of this project was the Leishmania infantum nitrosoproteome identification. This objective was accomplished using two proteomic approaches: identification by peptide mass fingerprint (PMF) through MALDI-FTICR and analysis through nanoscale liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (nanoLC-MS). The second objective was the identification of the metabolic processes in which nitric oxide nitrosylation might be involved to allow us to understand more about the importance of this posttranslational modification in L. infantum. Totally we identified 137 different proteins, 8 through MALDI-FT-ICR and 134 through nanoLC-MS. Among the celular processes identified as containing nitrosilated proteins, protein folding, stress response and carbohydrate metabolism are the most important ones. S-nitrosilation of heat shock proteins Hsp70 and Hsp83, as well as of disulfide isomerase may modelate chaperon function. Besides of that, it´s interesting that S-nitrosilation of Tryparedoxin peroxidase and glyoxalase I, enzymes involved in oxidative and carbonylic stress, respectively, may inhibit theirs enzymatic activity. Lastly, the S-nitrosilation of GAPDH may be relevant in glycolytic flux control and enolase may be important in the scavange of NO.Silva, Marta SousaGomes, Ricardo Jorge dos Anjos, 1979-Repositório da Universidade de LisboaNunes, João Pedro da Costa2014-03-07T11:23:37Z20132013-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/10697TID:201328291porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-08T15:56:22Zoai:repositorio.ul.pt:10451/10697Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:34:38.169357Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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