Evaluation of grape stems extracts from cultivar ‘Sousão’ as a source of compounds inhibitors of oxidative stress in vitro using keratinocytes

• Autor(a) principal: Queiroz, Marcelo Flávio Jesus
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/8016
• topic: Bioquímica; Vitis vinifera; Stresse oxidativo; Apoptose; Compostos fenólicos; Propriedades bioativas; Engaço

A vinicultura é uma das mais importantes atividades sócio-económicas em Portugal, bem como em toda a bacia do Mediterrâneo. De todos os resíduos resultantes do processo de vinificação o engaço, que é descartado antes do início da produção do vinho, está entre os resíduos que aparecem em maiores quantidades. O potencial antioxidante dos extratos de engaço de uva tem sido muito falado na ultima década, no entanto existe uma falta de informação sobre o potencial dos seus compostos fenólicos individuais e o estabelecimento de combinações desses compostos individuais com outros compostos antioxidantes. Neste trabalho, extratos polifenólicos de engaço de uvas da casta ‘Sousão’ (Vitis vinifera L.) foram analisados por HPLC-UV-Vis semi-preparativo obtendo-se compostos fenólicos isolados e purificados (isorhamnetina-3-O-(6-O-feruil)-glicosídeo, ácido caftárico, malvidina-3-O-glucosídeo, quercitina-3-O-rutinosídeo, quercitina-3-O-glucoronídeo, kaempferol-3-O-rutinosídeo, malvidina-3-O-(6-O-cafeoíl)-glucosídeo, malvidina-3-O-rutinosídeo e Σ-viniferina) que foram caracterizados por HPLC-PDA-ESi-MSn. Os compostos isolados e purificados foram testados para a sua capacidade anti-radicalar (DPPH e ABTS) para estabelecer o valor de metade da sua concentração máxima inibitória (IC50). De acordo com o potencial anti-radicalar destes compostos onde foi calculado o IC50 (malvidina-3-O-glucosídeo (0,41 μmol/L), quercetina-3-O-glucuronídeo (1,25 μmol/L), e malvidina-3-O-(6-O-cafeoíl)-glucosídeo (0,43 μmol/L)) foi testado o seu efeito na viabilidade celular, atividade anti-inflamatória, capacidade de modulação dos marcadores de stresse oxidativo e na supressão do mesmo e a capacidade de diminuir os processos apoptóticos usando os modelos celulares (in vitro) HaCaT (linha celular não tumoral de queratinócitos humanos) e RAW 264.7 (linha celular não tumoral de macrófagos murinos) sob condições basais e em ambiente oxidativo. Os resultados obtidos durante estas determinações permitiram identificar as combinações malvidina-3-O-glucosídeo + Vitamina E e quercetina-3-O-glucuronide + Vitamina C como as mais valiosas e efetivas no que diz respeito à atividade anti-inflamatória (inibiram cerca de 75 % da produção de NO nas células RAW 264.7 quando estimuladas por lipopolissacarídeo) e à atividade anti-radicalar (ex. mostrou os menores valores de ROS medidos pela técnica da citometria de fluxo). A quercitina-3-O-glucoronídeo e a malvidina-3-O-(6-O-cafeoil)-glucosídeo mostraram o maior potencial anti-apoptótico como comprovado pela diminuição em caspase-3 clivada que é um marcador pró-apoptótico. Estes resultados permitiram melhorar o conhecimento das atividades biológicas exercidas pelos extratos completos e pelos compostos individuais, indicando que estes exercem uma proteção celular benéfica contra o stresse oxidativo e que podem ser potenciais candidatos a ser usados no desenvolvimento de novos ingredientes funcionais para comidas, bebidas, cosméticos e também nutracêuticos.