Caracterização genética de plasmídeos relacionados com a resistência a quinolonas em Escherichia coli

• Autor(a) principal: Macedo, Gonçalo Nuno Barroca de
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.14/15914
• topic: Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Biotecnologia Industrial

As águas residuais e alguns cursos de água representam importantes reservatórios de bactérias resistentes a antibióticos e dos seus genes, uma vez que recebem bactérias comensais e patogénicas de origem humana e animal. Por esse motivo, a água constitui um importante veículo de disseminação de bactérias de origem fecal, como por exemplo Escherichia coli, principalmente em ambientes urbanos. A prevalência de resistência a beta-lactâmicos e a quinolonas tem vindo a aumentar em E. coli, possivelmente devido a processos de transferência horizontal de genes. Muitos dos genes que conferem resistência a estes antibióticos estão localizados em plasmídeos, em particular nos plasmídeos do grupo de incompatibilidade F (incF). Neste estudo, 11 isolados de Escherichia spp. resistentes a ciprofloxacina, foram caracterizados com o intuito de compreender os mecanismos utilizados na dispersão de resistência a quinolonas. As estirpes estudadas, nove E. coli e duas E. fergusonii, foram isoladas de águas residuais municipais e de efluente hospitalar. A pesquisa de determinantes genéticos de resistência a quinolonas, a beta-lactâmicos e de integrões, revelou a presença os genes aac(6’)-Ib-cr (n=4), qepA (n=2) e qnrS (n=1), blaTEM (n=6), blaOXA (n=3), ampC (n=11) e integrões de classe 1 (n=10). Não foram detectados os determinantes genéticos qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, blaCTX nem blaSHV, também pesquisados. A caracterização dos grupos de incompatibilidade dos plasmídeos permitiu concluir que todos os isolados possuíam plasmídeos incF e ainda incI1 (n=2), incN (n=2), incY (n=2), IncA/C (n=2), incK (n=2) e incB/O (n=3). Após ensaios de transformação com a estirpe E. coli Top10 como receptora, houve aquisição de plasmídeos incF a partir de duas estirpes dadoras, e dos genes aac(6’)-Ib-cr (1/2), qnrS (1/2), blaTEM (1/2) e ampC (2/2). A caracterização por Multilocus Sequence Typing (MLST) dos replicões dos plasmídeos incF permitiu identificar sete genótipos distintos. Este trabalho sugere uma elevada diversidade de plasmídeos em estirpes de Escherichia provenientes de efluentes municipais ou hospitalares e que podem estar associados à disseminação de resistência a quinolonas e beta-lactâmicos. Estudos futuros ajudarão a compreender quais os factores ambientais que podem potenciar a transferência destes plasmídeos para outras bactérias no ambiente.