Production and purification of IgY antibodies with antimicrobial properties

• Autor(a) principal: Rosa, Marguerita Evangelho da
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22545
• topic: Biotecnologia ambiental e industrial; Aquacultura; Resistência a antibióticos; Imunoglobulinas - Purificação química

A Aquacultura tem recebido especial destaque nos últimos anos como alternativa às atividades de pesca tradicional, atualmente restritas pelos limites legais de captura. Neste sentido, têm-se desenvolvido novas técnicas de modo a aumentar o lucro e o rendimento das atividades associadas à aquacultura. No entanto, a sobre-exploração de espécies, poluição, surgimento de doenças e o aumento de microorganismos resistentes a antibióticos, surgem como consequências deste desenvolvimento. Vibrio anguillarum é uma bactéria Gram-negativa que causa infeções em peixes de sistemas de aquacultura e que origina perdas económicas significativas. Estas infeções são normalmente tratadas com recurso a agentes antimicrobianos, tais como antibióticos. No entanto, a prevalência de bactérias resistentes a estes compostos destaca a necessidade crucial de desenvolvimento de estratégias terapêuticas alternativas. O uso de anticorpos, nomeadamente a imunoglobulina Y (IgY) produzidas em aves poedeiras e purificado a partir de gemas de ovos é uma abordagem promissora para o controlo de infeções por V. anguillarum na aquacultura. O atual trabalho centrou-se no desenvolvimento de anticorpos IgY específicos contra os determinantes de virulência associados a V. anguillarum como uma estratégia antimicrobiana capaz de melhorar a produtividade dos sistemas de aquacultura. Neste são apresentados resultados da produção, purificação e caracterização de anticorpos IgY de galinha e codorniz contra antigénios (extratos celulares, frações da membrana externa e péptidos do canal TolC) de V. anguillarum. Aves hiperimunes foram produzidas com sucesso para cada antigénio e foram purificadas as respetivas frações específicas de IgY (> 95% de pureza). Por fim, estudou-se o potencial antimicrobiano dos anticorpos anti-extrato celular de V. anguillarum por ensaios de crescimento bacteriano que revelaram um efeito bacteriostático promissor com 50% de inibição. Em suma, e face aos resultados obtidos, os anticorpos podem ser usados como agentes antimicrobianos alternativos para combater e prevenir infeções por V. anguillarum em sistemas de aquacultura.