Biossensor para a deteção de miRNA em amostras reais

• Autor(a) principal: Serrano, Verónica Morgado
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.22/19684
• topic: Exossomas; miRNA 21-5p; Biossensores; Eletroquímica

Os exossomas são pequenas vesículas extracelulares (~30 to ~200 nm) com origem em células do corpo humano, saudáveis ou patogénicas. Os exossomas são formados a partir da invaginação de corpos multivesiculares, os endossomas tardios, que contêm no seu interior vesículas intraluminais (ILV’s). A invaginação dos endossomas estimula a libertação das ILV’s para o meio extracelular, que se fundem com a membrana plasmática, originando os exossomas. Estas pequenas vesículas extracelulares atuam na maior parte das atividades fisiológicas e patológicas, participando na comunicação intercelular e na transferência de ácidos nucleicos, lípidos e proteínas. Os exossomas transportam miRNAs para as células recetoras alvo, protegendo assim estes ácidos nucleicos da degradação inerente aos miRNA livres e incorporando-os nas células recetoras específicas, onde cumprem uma determinada função. O interesse pelos miRNA exossomais tem vindo a crescer, já que estes podem constituir biomarcadores emergentes para o diagnóstico, prognóstico e avaliação do tratamento do cancro. O presente estudo tem, por isso, com objetivo principal o desenvolvimento de um biossensor para a deteção do miRNA 21-5p em amostras reais de pacientes com cancro, recorrendo para este efeito a um sistema elétrodos impressos com transdução eletroquímica. Após otimização das várias variáveis envolvidas na construção do dispositivo sensor, o biossensor forneceu uma resposta linear entre 0.01fM – 10pM e um baixo limite de deteção, igual a 8.63 aM. Além disso, verificou-se uma resposta linear com soluções padrão preparadas em amostras de soro no intervalo 0.01fM – 100pM.