Solid-Phase purification of deoxyguanosine-benzo[a]pyrene diol epoxide adducts from genomic DNA adduct synthesis

• Autor(a) principal: Formenton-Catai,Ana Paula
• Data de Publicação: 2005
• Outros Autores: Machado,Rosecler Pereira, Lanças,Fernando M., Carrilho,Emanuel
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: Journal of the Brazilian Chemical Society (Online)
• Texto Completo: http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-50532005000500020
• topic: BPDE; biomarkers; carcinogens; capillary electrophoresis; mass spectrometry

Hidrocarbonetos polinucleares aromáticos são compostos largamente presentes no meio ambiente e são reconhecidamente considerados compostos carcinogênicos e/ou mutagênicos. Tais substâncias quando presentes em organismos são metabolizados e podem se ligar ao DNA formando adutos. Tais adutos podem induzir erros de replicação os quais podem causar um tumor carcinogênico ou uma mutação genética. Conseqüentemente, a determinação de tais adutos é útil na avaliação do risco de desenvolvimento de câncer. Neste estudo, a síntese do aduto de DNA formado da reação (±)-anti-7,8,9,10-tetrahidrobenzo[a]pireno-7,8-diol 9,10-epóxido (BPDE) com DNA de timo de bezerro foi conduzida. O maior produto formado nesta reação é a ligação do BPDE coma a base guanosina. Uma vez que a reação foi conduzida utilizando DNA genômico, um protocolo de purificação dos adutos foi necessário para isolar o principal aduto. Um método usando extração em fase sólida foi desenvolvido para isolamento e purificação do aduto. Os resultados mostraram que um gradiente seqüencial de água/metanol foi necessário para eluir o aduto. Eletroforese capilar de zona com detecção por fluorescência induzida a laser foi usada para monitorar a purificação a cada etapa do processo de desenvolvimento e o aduto de grau analítico foi caracterizado por espectroscopia UV/Vis e fluorescência e espectrometria de massas com ionização electrospray.