Potencial biotecnológico de Tabebuia aurea (Manso): Benth & Hook frente a micro-organismos patogênicos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ramos, Carmel da Silva
Data de Publicação: 2011
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UCB
Texto Completo: https://repositorio.ucb.br:9443/jspui/handle/123456789/12214
Resumo: Atualmente, uma das principais preocupações no ambiente hospitalar é o alto risco de infecção causada por micro-organismos patogênicos que adquiriram resistência aos antibióticos convencionais. Nesta perspectiva, a busca de novos compostos com atividade antibacteriana tem se intensificado nas últimas décadas, sendo focado na descoberta de peptídeos antimicrobianos (PAMs). Tabebuia aurea, também conhecido como ipê amarelo, possui substâncias com propriedades antibacteriana, antifúngica, antiofídicas e anticancerígenas conforme relatado na literatura. Este trabalho teve como objetivo analisar as propriedades antibacteriana, antitríptica e hemolítica de sementes de Tabebuia aurea. Para isso a extração de proteínas foi realizada com tampão Tris HCl 50mM (pH 7,5) e o extrato bruto precipitado com acetona 99.5%, gerando uma fração rica em proteínas (FRP), a qual foi posteriormente avaliada contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus, demostrando um potencial inibitório de 42 e 32%, respectivamente. Além disso, a FRP foi submetida a cromatografia de exclusão molecular (Superdex -75), onde foram obtidas 21 frações cromatográficas (FC), sendo as frações F25, F26 e F27 capazes de inibir 94, 95 e 97% respectivamente do desenvolvimento de E. coli. A massa molecular aparente destas frações foi estimada por géis SDS-PAGE, com uma variação 3 a 14 kDa. As frações com atividade antibacteriana foram submetidas a cromatografia líquida de fase reversa em coluna analítica C18. O Perfil cromatográfico da fração F26 apresentou dois picos proteícos sendo eluídos a 26 % e 38 % de acetonitrila com um tempo de retenção de 24 e 26 minutos. Os resultados para os ensaios hemolíticos e antipríticos das frações com atividade antibacteriana foram negativos em relação a citotoxidade a células humanas e tripsina bovina. Como conclusão, de acordo com os dados obtidos até o presente momento, as proteínas isoladas da sementes de Tabebuia aurea apresentam um potencial biotecnológico que pode, em um futuro próximo, ser utilizado no desenvolvimento de fármacos.
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Este trabalho teve como objetivo analisar as propriedades antibacteriana, antitríptica e hemolítica de sementes de Tabebuia aurea. Para isso a extração de proteínas foi realizada com tampão Tris HCl 50mM (pH 7,5) e o extrato bruto precipitado com acetona 99.5%, gerando uma fração rica em proteínas (FRP), a qual foi posteriormente avaliada contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus, demostrando um potencial inibitório de 42 e 32%, respectivamente. Além disso, a FRP foi submetida a cromatografia de exclusão molecular (Superdex -75), onde foram obtidas 21 frações cromatográficas (FC), sendo as frações F25, F26 e F27 capazes de inibir 94, 95 e 97% respectivamente do desenvolvimento de E. coli. A massa molecular aparente destas frações foi estimada por géis SDS-PAGE, com uma variação 3 a 14 kDa. As frações com atividade antibacteriana foram submetidas a cromatografia líquida de fase reversa em coluna analítica C18. O Perfil cromatográfico da fração F26 apresentou dois picos proteícos sendo eluídos a 26 % e 38 % de acetonitrila com um tempo de retenção de 24 e 26 minutos. Os resultados para os ensaios hemolíticos e antipríticos das frações com atividade antibacteriana foram negativos em relação a citotoxidade a células humanas e tripsina bovina. Como conclusão, de acordo com os dados obtidos até o presente momento, as proteínas isoladas da sementes de Tabebuia aurea apresentam um potencial biotecnológico que pode, em um futuro próximo, ser utilizado no desenvolvimento de fármacos.Currently, a main concern in hospitals is the high risk of infection caused by pathogenic microorganisms that have acquired resistance to conventional antibiotics. In this perspective, the search for new compounds with antibacterial activity has intensified in recent decades and is focused on the discovery of antimicrobial peptides (AMPs). Tabebuia aurea, also known as ipe yellow, possess substances with antibacterial, antifungal, and anticancer antiophidic as reported in the literature. This study aimed to analyze the properties of antibacterial, hemolytic and trypsin inhibitor from seeds of Tabebuia aurea. For this protein extraction was performed with 50 mM Tris HCl (pH 7.5) and the crude extract precipitated with acetone 99.5%, producing a fraction rich in protein (FRP), which was subsequently tested against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, demonstrating an inhibitory potential of 42 and 32% respectively. In addition, the FRP was subjected to size exclusion chromatography (Superdex -75), where 21 were obtained chromatographic fractions (CF), and the fractions F25, F26 and F27 can inhibit 94, 95 and 97% respectively of the development of E . coli. The apparent molecular weight of these fractions was estimated by SDS-PAGE gels, ranging from 3 to 14 kDa. The fractions with antibacterial activity were subjected to liquid chromatography on reversed phase C18 analytical column. The chromatographic profile of fraction F26 showed two protein peaks were eluted by 26% and 38% acetonitrile with a retention time of 24 and 26 minutes. The results for the hemolytic and antipríticos showed that all fractions were not cytotoxic and did not show inhibitory activity against bovine trypsin. In conclusion, according to the data obtained to date, proteins isolated from the seeds of Tabebuia aurea have a potential of biotechnology that may in the near future, be used in drug development.Submitted by Maria José Martins (mmartins@ucb.br) on 2019-07-17T15:21:02Z No. of bitstreams: 1 CarmelRamosTCCGraduacao2011.pdf: 915596 bytes, checksum: bfc449b3d886bd4a86aab4883822d15f (MD5)Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2019-07-19T11:40:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarmelRamosTCCGraduacao2011.pdf: 915596 bytes, checksum: bfc449b3d886bd4a86aab4883822d15f (MD5)Made available in DSpace on 2019-07-19T11:40:06Z (GMT). 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Currently, a main concern in hospitals is the high risk of infection caused by pathogenic microorganisms that have acquired resistance to conventional antibiotics. In this perspective, the search for new compounds with antibacterial activity has intensified in recent decades and is focused on the discovery of antimicrobial peptides (AMPs). Tabebuia aurea, also known as ipe yellow, possess substances with antibacterial, antifungal, and anticancer antiophidic as reported in the literature. This study aimed to analyze the properties of antibacterial, hemolytic and trypsin inhibitor from seeds of Tabebuia aurea. For this protein extraction was performed with 50 mM Tris HCl (pH 7.5) and the crude extract precipitated with acetone 99.5%, producing a fraction rich in protein (FRP), which was subsequently tested against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, demonstrating an inhibitory potential of 42 and 32% respectively. In addition, the FRP was subjected to size exclusion chromatography (Superdex -75), where 21 were obtained chromatographic fractions (CF), and the fractions F25, F26 and F27 can inhibit 94, 95 and 97% respectively of the development of E . coli. The apparent molecular weight of these fractions was estimated by SDS-PAGE gels, ranging from 3 to 14 kDa. The fractions with antibacterial activity were subjected to liquid chromatography on reversed phase C18 analytical column. The chromatographic profile of fraction F26 showed two protein peaks were eluted by 26% and 38% acetonitrile with a retention time of 24 and 26 minutes. The results for the hemolytic and antipríticos showed that all fractions were not cytotoxic and did not show inhibitory activity against bovine trypsin. In conclusion, according to the data obtained to date, proteins isolated from the seeds of Tabebuia aurea have a potential of biotechnology that may in the near future, be used in drug development.
description Atualmente, uma das principais preocupações no ambiente hospitalar é o alto risco de infecção causada por micro-organismos patogênicos que adquiriram resistência aos antibióticos convencionais. Nesta perspectiva, a busca de novos compostos com atividade antibacteriana tem se intensificado nas últimas décadas, sendo focado na descoberta de peptídeos antimicrobianos (PAMs). Tabebuia aurea, também conhecido como ipê amarelo, possui substâncias com propriedades antibacteriana, antifúngica, antiofídicas e anticancerígenas conforme relatado na literatura. Este trabalho teve como objetivo analisar as propriedades antibacteriana, antitríptica e hemolítica de sementes de Tabebuia aurea. Para isso a extração de proteínas foi realizada com tampão Tris HCl 50mM (pH 7,5) e o extrato bruto precipitado com acetona 99.5%, gerando uma fração rica em proteínas (FRP), a qual foi posteriormente avaliada contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus, demostrando um potencial inibitório de 42 e 32%, respectivamente. Além disso, a FRP foi submetida a cromatografia de exclusão molecular (Superdex -75), onde foram obtidas 21 frações cromatográficas (FC), sendo as frações F25, F26 e F27 capazes de inibir 94, 95 e 97% respectivamente do desenvolvimento de E. coli. A massa molecular aparente destas frações foi estimada por géis SDS-PAGE, com uma variação 3 a 14 kDa. As frações com atividade antibacteriana foram submetidas a cromatografia líquida de fase reversa em coluna analítica C18. O Perfil cromatográfico da fração F26 apresentou dois picos proteícos sendo eluídos a 26 % e 38 % de acetonitrila com um tempo de retenção de 24 e 26 minutos. Os resultados para os ensaios hemolíticos e antipríticos das frações com atividade antibacteriana foram negativos em relação a citotoxidade a células humanas e tripsina bovina. Como conclusão, de acordo com os dados obtidos até o presente momento, as proteínas isoladas da sementes de Tabebuia aurea apresentam um potencial biotecnológico que pode, em um futuro próximo, ser utilizado no desenvolvimento de fármacos.
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