Análise das proteínas glicosiladas secretadas pelo isolado trichoderma harzianum (ALL-42) induzida por parede celular de fitopatógenos

• Autor(a) principal: Naoum, Stéphanie
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG
• Texto Completo: http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/323
• topic: Glicoproteínas; Secretoma; Trichoderma harzianum; Enzimas; Parede celular.; Glycoproteins; Secretome; Trichoderma harzianum; Enzymes; Cell wall; CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA

As glicoproteínas são moléculas formadas pela união de proteínas à glicanos por um processo pós-traducional denominado glicosilação. Este processo é realizado nos mais variados tipos celulares, entre eles a célula fúngica, e as glicoproteínas produzidas por estas células possuem papéis biológicos essenciais à vida. Trichoderma harzianum (ALL-42) é um fungo muito estudado devido ao seu papel de biocontrole e indução de crescimento vegetal. Estudos envolvendo substâncias produzidas por este microrganismo podem colaborar para o entendimento deste mecanismo. O objetivo principal deste trabalho foi identificar e analisar as proteínas glicosiladas secretadas pelo T. harzianum quando induzido por meio de cultura contendo paredes celulares de diferentes fitopatógenos. Os secretomas produzidos para as paredes de Sclerotinia sclerotiorum e Fusarium oxysporum foram então submetidos à cromatografia por afinidade Concanavalin A e posteriormente realizada a eletroforese SDS-PAGE e coloração por Pro-Q Emerald 488 para identificação de glicoproteínas. As bandas apresentadas no gel foram recortadas e submetidas à espectrometria de massa. Os resultados demonstraram a presença de algumas proteínas como galactose oxidases, glicosídeo hidrolases, β-1,3-exoglucanases e proteases, com funções enzimáticas importantes no mecanismo de degradação de parede celular de fitopatógeno e a presença destas proteínas coincide com resultados obtidos em outros estudos. As amostras demonstraram atividade enzimática para sete substratos testados, escolhidos de acordo com as enzimas identificadas por espectrometria de massas e análise da expressão gênica relativa. Os genes relacionados a estas proteínas identificadas no glicosecretoma foram encontrados em maior expressão quando T. harzianum (ALL-42) foi crescido com as paredes de fitopatógenos em relação a duas outras situações, crescido em glicose e em glicerol, como fontes de carbono.