Identificação, clonagem e sequenciamento de genes cry1 de isolados brasileiros de Bacillus thuringiensis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ricieto, Ana Paula Scaramal
Data de Publicação: 2024
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UEL
Texto Completo: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15033
Resumo: Resumo: O uso de bactérias entomopatogênicas como o Bacillus thuringiensis, como inseticidas biológicos tem se mostrado uma das alternativas viáveis ao uso de inseticidas sintéticos A atividade entomopatogênica é atribuída principalmente aos cristais paraesporais, os quais são compostos por um ou mais tipos de proteínas tóxicas, como as Cry que possuem especificidade para insetos de diferentes ordens Esta Dissertação apresenta uma revisão que aborda a descrição de B thuringiensis, o mecanismo de ação das proteínas Cry, genes cry e suas classificações, um artigo apresentando a clonagem de um gene cry de B thuringiensis BR145 e uma terceira parte composta por resultados complementares obtidos para B thuringiensis BR9 Neste trabalho foram utilizadas técnicas moleculares associadas às ferramentas de bioinformática visando à obtenção da sequência completa de um gene cry de uma linhagem de B thuringiensis e sua posterior clonagem A linhagem de B thuringiensis BR145, isolada de solo, foi selecionada por PCR através dos iniciadores degenerados O gene cry1I foi identificado nessa linhagem As sequências obtidas foram homólogas a região central do gene Sendo assim, novos iniciadores foram selecionados à partir de regiões consenso, homólogas às sequências de outros genes cry1I, visando obter as sequências completas das extremidades dos genes pela metodologia primer walking Neste estudo, obteve-se a clonagem do gene cry1Ia completo das linhagens BR9 e BR145 e a sequência completa desse gene de B thuringiensis BR145, bem como a sequência de aminoácidos da proteína Cry1Ia de B thuringiensis BR145 composta por 719 aminoácidos e com massa equivalente a 81 kDa
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