Otimização da produção de lacase por Botryosphaeria rhodina MAMB-05 em óleo de soja como única fonte de carbono

• Autor(a) principal: João Paulo Sacchetto
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEL
• Texto Completo: http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000155004

Lacases (EC 1.10.3.2) são oxidases multicúpricas que catalizam reações de oxidação de compostos fenólicos e não-fenólicos com a concomitante redução do oxigênio à água. Estas enzimas estão envolvidas na patogenicidade e morfogênese de diversos organismos incluindo-se fungos ligninolíticos. As lacases fúngicas tem sido estudadas e aplicadas em vários processos biotecnológicos tais como no tratamento de efluentes industriais, no processamento de sucos, vinhos e cerveja, e também no branqueamento de polpa e papel. O fungo ascomiceto Botryosphaeria rhodina MAMB-05 foi isolado de cancro de eucalipto e selecionado previamente como ligninolítico e produtor constitutivo de lacases. No presente trabalho foi avaliada a influência da adição de fontes de nitrogênio inorgânicas (NH4Cl, NaNO3, (NH4)2SO4, NH4NO3), orgânicas (extrato de levedura, uréia, peptona, milhocina), de fosfato inorgânico (KH2PO4, Na2HPO4, NaH2PO4, K2HPO4) e de diferentes concentrações de íons cobre 0, 12,5, 25, 50 e 100 µg mL-1, na produção de lacase pelo fungo, utilizando-se óleo de soja como única fonte de carbono. O NaNO3 e KH2PO4 foram as fontes de nitrogênio e fosfato selecionadas, respectivamente. Um planejamento fatorial composto central 23 foi desenvolvido para determinar as concentrações destas respectivas fontes de nitrogênio e fostato e de íons cobre para otimizar a produção da enzima. A análise por metodologia de superfície de resposta demonstrou que a máxima produção de lacase (3,07 ± 0,04 U mg-1) foi obtida na presença de NaNO3, (100 g L-1), KH2PO4 (125 g L-1) e 50 µg mL-1 de CuSO4.5H20. Nos experimentos de validação do método em laboratório a produção de lacase obtida por B. rhodina MAMB-05 foi 2,95 ± 0,1U mg-1 nas condições otimizadas acima descritas. Cultivos nas condições otimizadas foram desenvolvidos em biorreatores de bancada, nos quais foram obtidos títulos mais elevados de lacase (19 ± 2,82 U mg-1) em 24 horas de cultivo, e de lipase (0,56 ± 0,007 U mg-1) em 72 horas.