Interação in vitro de cepas de Aeromonas caviae com células T-84 e Hep-2 quanto à capacidade de invadir, persistir e induzir morte celular

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Alves, Maria Angélica de Mattos
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UERJ
Texto Completo: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/14382
Resumo: Initially considered fish pathogens, today Aeromonas are considered emerging human pathogens. The genus has wide environmental distribution and is responsible for intestinal and extraintestinal infections ranging from self-limited to severe cases. The disease caused by this pathogen is favored by many virulence factors, including exotoxins, hemolysin, siderophores, flagella, ability to adhere to and invade cells and formation of biofilms. This study analyzes certain pathogenic mechanisms mediated by A. caviae evaluating the participation of micro-organism in cell colonization processes. Qualitative and quantitative in vitro assays were used to test the cytotoxicity, adhesion, invasion, intracellular persistence and potential to induce cell death in HEp-2 cell lines and / or T-84. The five strains of A. caviae studied previously isolated fish showed pattern of aggregative adherence to T-84 but were not cytotoxic to this cell line. The five strains were able to invade HEp-2 cells and T-84 at 6 hours of incubation. These strains were subjected to the quantitative assay of intracellular persistence and survived for up to 48h in HEp-2 cells and 72 hours for T-84 cells. All strains were able to induce typical morphological features of apoptosis and necrosis in both cell lines used, such as fragmentation and chromatin condensation and nuclear increase, although at different times according to the cell line. Finally, our results contributed to reinforcing the pathogenic potential of strains of Aeromonas caviae foodborne.
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The disease caused by this pathogen is favored by many virulence factors, including exotoxins, hemolysin, siderophores, flagella, ability to adhere to and invade cells and formation of biofilms. This study analyzes certain pathogenic mechanisms mediated by A. caviae evaluating the participation of micro-organism in cell colonization processes. Qualitative and quantitative in vitro assays were used to test the cytotoxicity, adhesion, invasion, intracellular persistence and potential to induce cell death in HEp-2 cell lines and / or T-84. The five strains of A. caviae studied previously isolated fish showed pattern of aggregative adherence to T-84 but were not cytotoxic to this cell line. The five strains were able to invade HEp-2 cells and T-84 at 6 hours of incubation. These strains were subjected to the quantitative assay of intracellular persistence and survived for up to 48h in HEp-2 cells and 72 hours for T-84 cells. All strains were able to induce typical morphological features of apoptosis and necrosis in both cell lines used, such as fragmentation and chromatin condensation and nuclear increase, although at different times according to the cell line. Finally, our results contributed to reinforcing the pathogenic potential of strains of Aeromonas caviae foodborne.Inicialmente considerada patógenos de peixes, hoje as Aeromonas são consideradas patógenos humanos emergentes. O gênero possui ampla distribuição ambiental e é responsável por infecções intestinais e extra-intestinais que variam de quadros auto-limitados a graves. A patologia causada por este patógeno é favorecida pelos inúmeros fatores de virulência, que incluem exotoxinas, hemolisinas, sideróforos, flagelos, capacidade de aderir e invadir células e formação de biofilmes. No presente estudo analisamos determinados mecanismos de patogenicidade mediados por A. caviae avaliando a participação deste microrganismo nos processos de colonização celular. Foram utilizados ensaios qualitativos e quantitativos in vitro para testar a citotoxicidade, adesão, invasão, persistência intracelular e potencial de induzir a morte celular em linhagens celulares HEp-2 e/ou T-84. As cinco cepas de A. caviae estudadas, isoladas previamente de peixes, apresentaram padrão de aderência agregativa para T-84, entretanto não apresentaram atividade citotóxica para essa linhagem celular. As cinco cepas de A. caviae foram capazes de invadir as células HEp-2 e T-84 em 6 horas de incubação. Estas cepas foram submetidas ao teste quantitativo de persistência intracelular e sobreviveram por até 48h em células HEp-2 e por 72h em células T-84. Todas as cepas foram capazes de induzir características morfológicas típicas de apoptose e necrose em ambas as linhagens celulares utilizadas, tais como fragmentação e condensação da cromatina e aumento nuclear, embora com tempos diferentes de acordo com a linhagem celular estudada. Finalmente, nossos resultados contribuíram para reforçar o potencial patogênico das cepas de Aeromonas caviae de origem alimentar.Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T15:15:29Z No. of bitstreams: 1 Maria Angelica de Mattos Alves Dissertacao completa.pdf: 747693 bytes, checksum: 419bdcb9655f776675d7ac94888f5456 (MD5)Made available in DSpace on 2021-01-07T15:15:29Z (GMT). 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