Interação de Aeromonascaviae e hydrophila com células intestinais e epiteliais humanas in vitro e epitélio intestinal de coelhos ex vivo
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Tese |
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Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UERJ |
Texto Completo: | http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/14367 |
Resumo: | Aeromonas is an important pathogen for humans and animals and is responsible for the etiology of intestinal and extraintestinal diseases. The presence of Aeromonas spp. in food and water demonstrates that it s an important vehicle of infection in humans. The pathology caused by these bacteria involves several virulence factors, such as the ability to adhere, invade and produce toxins. The properties conferred by these factors have been extensively studied in experiments of interaction between bacterial strains and cell culture. However, there is no animal model established to study Aeromonas spp. pathogenesis. The present study assessed the interaction of eight Aeromonas spp. strains, previously isolated from human faeces, food and water with HEp-2, Caco-2 and T-84 cell lines as to the cytotoxic effects, the pattern of adhesion, invasive capacity and intracellular survival. We also evaluated the interaction of five A. caviae strains isolated from human diarrheic faeces with rabbit ileal and colonic mucosa ex vivo, using in vitro organ culture model (IVOC). The results showed that Aeromonas strains were adherent to three cells lines in 6 h of incubation, displaying the aggregative adherence pattern. Among eight strains studied, 50 % produced cytotoxic effects on HEp-2 cells, while none of the strains produced cytotoxic effects on Caco-2 and T-84 cells at 48 h. This study demonstrated that strains of Aeromonas isolated from different sources were able to invade intestinal (T-84, Caco-2) and epithelial (HEp-2) cell lines cultivated in vitro surviving within intracellular environments up to 72 h. All strains adhered to rabbit ileal and colonic mucosa, with higher degree of adherence on the colonic mucosa. The typical aggregative adherence pattern was observed among all strainsstudied. Through electron microscopy and light microscopy we observed extensive colonization of ileal and colonic mucosa, large mucus production, biofilm formation and morphological alterations such as intense vacuolization, structural disorganization, cell extrusion and destruction of the villi. Our study demonstrated that the in vitro organ culture (IVOC) of rabbit intestinal mucosa may be used to investigate the mechanisms of pathogenesis of Aeromonas spp. Our results also contributed to reinforce the pathogenic potential of Aeromonas strains, confirming its importance inpublic health. |
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The presence of Aeromonas spp. in food and water demonstrates that it s an important vehicle of infection in humans. The pathology caused by these bacteria involves several virulence factors, such as the ability to adhere, invade and produce toxins. The properties conferred by these factors have been extensively studied in experiments of interaction between bacterial strains and cell culture. However, there is no animal model established to study Aeromonas spp. pathogenesis. The present study assessed the interaction of eight Aeromonas spp. strains, previously isolated from human faeces, food and water with HEp-2, Caco-2 and T-84 cell lines as to the cytotoxic effects, the pattern of adhesion, invasive capacity and intracellular survival. We also evaluated the interaction of five A. caviae strains isolated from human diarrheic faeces with rabbit ileal and colonic mucosa ex vivo, using in vitro organ culture model (IVOC). The results showed that Aeromonas strains were adherent to three cells lines in 6 h of incubation, displaying the aggregative adherence pattern. Among eight strains studied, 50 % produced cytotoxic effects on HEp-2 cells, while none of the strains produced cytotoxic effects on Caco-2 and T-84 cells at 48 h. This study demonstrated that strains of Aeromonas isolated from different sources were able to invade intestinal (T-84, Caco-2) and epithelial (HEp-2) cell lines cultivated in vitro surviving within intracellular environments up to 72 h. All strains adhered to rabbit ileal and colonic mucosa, with higher degree of adherence on the colonic mucosa. The typical aggregative adherence pattern was observed among all strainsstudied. Through electron microscopy and light microscopy we observed extensive colonization of ileal and colonic mucosa, large mucus production, biofilm formation and morphological alterations such as intense vacuolization, structural disorganization, cell extrusion and destruction of the villi. Our study demonstrated that the in vitro organ culture (IVOC) of rabbit intestinal mucosa may be used to investigate the mechanisms of pathogenesis of Aeromonas spp. Our results also contributed to reinforce the pathogenic potential of Aeromonas strains, confirming its importance inpublic health.Aeromonas é um importante patógeno para o homem e animais, sendo responsável pela etiologia de doenças intestinais e extra-intestinais. A presença de Aeromonas spp. nos alimentos e na água faz com que estes sejam importantes veículos de infecções para os seres humanos. A patologia causada por esta bactéria envolve inúmeros fatores de virulência, dentre eles a capacidade de aderir, invadir e produzir toxinas. As propriedades atribuídas a esses fatores têm sido extensivamente estudadas em experimentos de interação entre cepas bacterianas e cultura de células. No entanto, não há um modelo animal bem estabelecido no estudo da patogênese de Aeromonas spp. O presente estudo avaliou a interação de oito cepas de Aeromonas spp. previamente isoladas, a partir de fezes humanas, alimentos e água com linhagens celulares HEp-2, T-84 e Caco-2 quanto a ação das toxinas citotóxicas, o padrão de aderência celular, a capacidade de invasão e a sobrevivência intracelular. A interação de cinco cepas de A. caviae originárias de fezes diarreicas humanas com mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, utilizando cultivo de órgão in vitro (IVOC) também foi avaliada. Observamos que todas as cepas de Aeromonas foram aderentes às três linhagens celulares em 6 horas de incubação, exibindo o padrão agregativo. Entre as oito cepas estudadas, 50% produziram efeitos citotóxicos em células HEp-2, enquanto que nenhuma cepa foi citotóxica em células Caco-2 e T-84 após 48 horas de incubação. Este estudo demonstrou que as cepas de Aeromonas isoladas de diferentes fontes foram capazes de invadir linhagens intestinais (T-84, Caco-2) e linhagem epitelial (HEp-2) cultivadas in vitro e que sobreviveram no ambiente intracelular por até 72 h. Todas as cepas aderiram a mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, com maior grau de aderência na mucosa colônica. O típico padrão agregativo de aderência foi observado entre as cepas estudadas. Através de microscopia eletrônica e microscopia de luz foi possível observar extensiva colonização da mucosa do íleo e do cólon, grande produção de muco, formação de biofilme e alterações morfológicas tais como, intensa vacuolização, desorganização estrutural, extrusão celular e destruição das vilosidades. Nosso estudo demonstrou que a cultura de órgão in vitro (IVOC) da mucosa intestinal de coelho pode ser utilizada para investigar os mecanismos de patogênese de Aeromonas spp. Nossos resultados também contribuíram para corroborar o potencial patogênico de cepas de Aeromonas, ratificando sua importância na área de saúde pública.Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T15:14:00Z No. of bitstreams: 1 Paula Azevedo dos Santos Tese completa.pdf: 2247901 bytes, checksum: de2f4110fb7968af2bf65df8905ed4b1 (MD5)Made available in DSpace on 2021-01-07T15:14:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula Azevedo dos Santos Tese completa.pdf: 2247901 bytes, checksum: de2f4110fb7968af2bf65df8905ed4b1 (MD5) Previous issue date: 2016-09-25Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológicoapplication/pdfporUniversidade do Estado do Rio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em MicrobiologiaUERJBRCentro Biomédico::Faculdade de Ciências MédicasAeromonas sppAdhesionInvasionIntracellular survivalCytotoxic effectsIn vitro organ culture (IVOC)Aeromonas sppAderênciaInvasãoPersistência intracelularCitotoxicidadeCultura de órgão in vitro (IVOC)AeromonasCélulas InteraçãoCitotoxicidadeTécnicas in vitroAdesão celularCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA APLICADA::MICROBIOLOGIA MEDICAInteração de Aeromonascaviae e hydrophila com células intestinais e epiteliais humanas in vitro e epitélio intestinal de coelhos ex vivoInteraction of Aeromonas caviae and hydrophila with human intestinal and epithelial cells in vitro and rabbit intestinal epithelium ex vivoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UERJinstname:Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ)instacron:UERJORIGINALPaula Azevedo dos Santos Tese completa.pdfapplication/pdf2247901http://www.bdtd.uerj.br/bitstream/1/14367/1/Paula+Azevedo+dos+Santos+Tese+completa.pdfde2f4110fb7968af2bf65df8905ed4b1MD511/143672024-02-26 19:54:44.086oai:www.bdtd.uerj.br:1/14367Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bdtd.uerj.br/PUBhttps://www.bdtd.uerj.br:8443/oai/requestbdtd.suporte@uerj.bropendoar:29032024-02-26T22:54:44Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UERJ - Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ)false |
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Interação de Aeromonascaviae e hydrophila com células intestinais e epiteliais humanas in vitro e epitélio intestinal de coelhos ex vivo Santos, Paula Azevedo dos Aeromonas spp Adhesion Invasion Intracellular survival Cytotoxic effects In vitro organ culture (IVOC) Aeromonas spp Aderência Invasão Persistência intracelular Citotoxicidade Cultura de órgão in vitro (IVOC) Aeromonas Células Interação Citotoxicidade Técnicas in vitro Adesão celular CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA APLICADA::MICROBIOLOGIA MEDICA |
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