Participação de células endoteliais na proteção do verme adulto do Schistosoma mansoni
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Data de Publicação: | 2020 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFBA |
Texto Completo: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/38656 |
Resumo: | INTRODUÇÃO: A esquistossomose é uma doença parasitária considerada um problema de saúde prevalente em países tropicais em desenvolvimento, sendo o Praziquantel (PZQ) a droga de primeira escolha para o tratamento. O verme adulto do S. mansoni reside no lúmen vascular, apesar disso pouco se sabe sobre a interação das células endoteliais com o verme adulto e a participação dessas células durante a progressão ou proteção na infecção. Além disso, ainda não foi avaliada a expressão de genes antioxidantes por essas células durante a esquistossomose e após o tratamento. OBJETIVO: Avaliar a expressão de genes antioxidantes em células HUVEC cultivadas com vermes adultos de S. mansoni e expostas ao tratamento, bem como a capacidade de sobrevivência de vermes cultivados com HUVEC e expostas a agentes oxidantes. METODOLOGIA: Os nomes dos genes, enzimas e substratos utilizados nesse trabalho foram apresentados de forma codificada para manter sigilo por se tratar de informação sensível para inovação. Células HUVEC foram cultivadas e desafiadas com vermes adultos do S. mansoni e submetidas ao tratamento com PZQ nos tempos de 1, 3 e 6 horas. Após o desafio, foi realizada a extração de RNA utilizando trizol. Em seguida, foi realizada a reação de qPCR de genes antioxidantes. Para avaliar a capacidade de sobrevivência dos vermes adultos frente ao estresse oxidativo, foi realizado o cultivo de vermes adultos com o agente oxidante OX e vermes adultos com OX na presença de HUVEC. Os vermes foram avaliados por microscopia óptica. RESULTADOS: Células HUVEC apresentaram aumento na expressão dos genes antioxidantes αOX-A e αOX-B quando desafiadas apenas com o PZQ. Além disso, foi interessante notar que os vermes adultos não foram capazes de induzir ou suprimir os genes antioxidantes avaliados, com exceção do αOX-E, o qual teve sua expressão aumentada significativamente em células HUVEC após 6 horas de exposição a um casal de verme adulto. Quando avaliada a capacidade de sobrevivência, os vermes adultos cultivados com células HUVEC e desafiadas com OX apresentaram maior percentual de sobrevivência e resistiram a maiores concentrações de OX quando comparados a vermes adultos desafiados com OX sem a presença das HUVEC. Foi adicionado à cultura de vermes adultos a proteína antioxidante αOX-E juntamente com o agente oxidante OX, sendo demonstrando aumento da sobrevivência dos vermes também nessa condição mesmo em altas concentrações de OX. Assim, vermes adultos cultivados com células HUVEC se comportam semelhante à cultura dos vermes em que a αOX-E foi adicionada. CONCLUSÃO: O verme adulto de S. mansoni parece induzir as células HUVEC a expressarem mais αOX-E, molécula que está envolvida no controle do estresse oxidativo. Tornando dessa forma, um ambiente propício à sua sobrevivência. Essa informação pode auxiliar novas abordagens de tratamentos adjuvantes ao PZQ. |
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METODOLOGIA: Os nomes dos genes, enzimas e substratos utilizados nesse trabalho foram apresentados de forma codificada para manter sigilo por se tratar de informação sensível para inovação. Células HUVEC foram cultivadas e desafiadas com vermes adultos do S. mansoni e submetidas ao tratamento com PZQ nos tempos de 1, 3 e 6 horas. Após o desafio, foi realizada a extração de RNA utilizando trizol. Em seguida, foi realizada a reação de qPCR de genes antioxidantes. Para avaliar a capacidade de sobrevivência dos vermes adultos frente ao estresse oxidativo, foi realizado o cultivo de vermes adultos com o agente oxidante OX e vermes adultos com OX na presença de HUVEC. Os vermes foram avaliados por microscopia óptica. RESULTADOS: Células HUVEC apresentaram aumento na expressão dos genes antioxidantes αOX-A e αOX-B quando desafiadas apenas com o PZQ. 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CONCLUSÃO: O verme adulto de S. mansoni parece induzir as células HUVEC a expressarem mais αOX-E, molécula que está envolvida no controle do estresse oxidativo. Tornando dessa forma, um ambiente propício à sua sobrevivência. Essa informação pode auxiliar novas abordagens de tratamentos adjuvantes ao PZQ.INTRODUCTION: Schistosomiasis is a parasitic disease considered a prevalent health problem in tropical developing countries, and the Praziquantel (PZQ) is the drug of choice for treatment. The adult worm of S. mansoni resides in the vascular lumen, although little is known about the interaction of endothelial cells with the adult worm and the participation of these cells during progression or protection from infection. In addition, the expression of antioxidant genes by these cells has not yet been evaluated during schistosomiasis and after treatment. AIM: To evaluate the expression of antioxidant genes in HUVEC cells grown with adult S. mansoni worms and exposed to treatment, as well as the survival capacity of worms with HUVEC and exposed to oxidizing agents. METHODOLOGY: The names of the genes, enzymes and substrates used in this work were presented in a coded form to keep confidentiality because it is sensitive information for innovation. HUVEC cells were cultured and challenged with adult S. mansoni worms and subjected to PZQ treatment at 1, 3 and 6 hours. After the challenge, RNA extraction was performed using trizol. Then, the qPCR reaction of antioxidant genes was performed. To evaluate the adult worms ability to survive oxidative stress, adult worms were cultivated with the oxidizing agent OX and adult worms with OX in the presence of HUVEC. The worms were evaluated by optical microscopy. RESULTS: HUVEC cells showed increased expression of the antioxidant genes αOX-A and αOX-B when challenged only with PZQ. In addition, it was interesting to note that adult worms were not able to induce or suppress the antioxidant genes evaluated, with the exception of αOX-E, which had its expression significantly increased in HUVEC cells after 6 hours of exposure to an adult worm couple . When the survival capacity was evaluated, adult worms grown with HUVEC cells and challenged with OX showed a higher percentage of survival and resisted higher concentrations of OX when compared to adult worms challenged with OX without the presence of HUVEC. The antioxidant protein αOX-E was added to the culture of adult worms together with the oxidizing agent OX, demonstrating an increased survival of worms in this condition even in high concentrations of OX. Thus, adult worms grown with HUVEC cells behave similarly to the culture of the worms in which αOX-E was added. CONCLUSION: The adult S. mansoni worm seems to induce HUVEC cells to express more αOX-E, a molecule that is involved in the control of oxidative stress. Thus making it an environment conducive to their survival. This information can help new approaches to adjuvant treatments to PZQ.Submitted by Glauber de Assunção Moreira (glauber.moreira@ufba.br) on 2023-12-11T17:05:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 701 bytes, checksum: 42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708c (MD5) DISSERTAÇÃO Oliveira, Bruna Souza Santos.pdf: 1286925 bytes, checksum: c40360e04b9984c0cbcb2aced87f1332 (MD5)Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2023-12-12T20:14:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 701 bytes, checksum: 42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708c (MD5) DISSERTAÇÃO Oliveira, Bruna Souza Santos.pdf: 1286925 bytes, checksum: c40360e04b9984c0cbcb2aced87f1332 (MD5)Made available in DSpace on 2023-12-12T20:14:10Z (GMT). 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