Avaliação da capacidade inibitória de segmentos conservados da leishmanolisina sobre a interação entre Leishmania (Viannia) braziliensis e macrófagos humanos

• Autor(a) principal: Ribeiro, Rafaela Magalhães Rodrigues
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFBA
• Texto Completo: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36068
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA; Leishmania braziliensis; leishmanolisina; macrófagos; Leishmania braziliensis; leishmanolysin; macrophages

Introdução: A leishmaniose compreende um largo espectro de doenças ocasionadas por protozoários do gênero Leishmania, tendo como hospedeiro os animais domesticados, principalmente cães em peridomicílio, e transmitido ao ser humano por meio da picada dos flebotomíneos (tendo como gênero Lutzomyia o principal responsável pela transmissão da doença nas Américas). As apresentações clínicas da doença variam conforme o parasito e o estado imunopatológico do infectado, desde as formas visceral, mucocutânea ou cutânea. No Brasil, a maior parte dos casos relatados de leishmaniose se dá pela espécie Leishmania (Viannia) braziliensis, principalmente nas regiões Norte e Nordeste, configurando um problema de saúde pública. Nesse sentido, foram realizados experimentos laboratoriais envolvendo a leishmaniolisina, ou GP63, glicoproteína mais abundante na superfície do protozoário, importante fator de virulência para a infecção e capaz de estimular a produção de citocinas por meio da resposta imune Th1. Estudos prévios mostram que essa glicoproteína apresenta segmentos conservados entre os parasitos, sendo eles os principais alvos do estudo. Objetivo: Avaliar a contribuição de segmentos conservados da glicoproteína GP63 ou a interação do parasito com a célula hospedeira. Metodologia: Foram realizadas avaliações laboratoriais acerca dos ensaios de inibição da infecção de macrófagos derivados de monócitos (MDM) por parasitas, no Serviço de Imunologia (SIM) do Complexo Hospitalar Universitário Professor Edgard Santos (C – HUPES), da Universidade Federal da Baia (UFBA), em Salvador - Bahia. Doadores sadios que concordaram em participar do estudo, assinando o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE), foram incluídos para obtenção dos MDM, e os isolados de Leishmania (Viannia) Braziliensis foram previamente obtidos por meio de aspirado da lesão de pele em pacientes com Leishmaniose Cutânea localizada em Corte de Pedra – Bahia. As MDM em cultura foram incubadas com exemplares da Leishmania (Viannia) braziliensis e peptídeos sintéticos da GP63 correspondentes aos segmentos conservados, e a determinação da porcentagem de infecção nos experimentos que envolveram parasitos, peptídeos e MDM foi realizada ao microscópio óptico. As análises estatísticas e comparação dos resultados foram realizadas através da ANOVA, considerando significativas as diferenças de p < 0,05. A interpretação da curva dose resposta foi realizada por meio das regressões linear e não linear, e foi utilizado pós-teste de Dunnett para múltiplas comparações entre cada peptídeo e suas concentrações. Resultados: Os ensaios de inibição nas concentrações de 0, 100, 200, 300 µM mostraram significância (p < 0,05) em todos peptídeos, exceto HEVAH e SRYD na concentração de 100 µM em relação ao grupo controle. O efeito dose-resposta dos peptídeos SRYD e HEVAH foram r = -0,113 (SRYD) e r = -0,1634 (HEVAH), e houve alteração do estado de infecção com os demais peptídeos: k = -0,015 (PAVGNIPA), k = -0,007 (KAREQYGC) e k = -0,010 (CONCATÂMERO). Discussão: A inibição da infecção usando peptídeos sintéticos já vem sendo descrita na literatura, e é possível constatar a participação dos segmentos SRYD e HEVAH na inibição da infecção in vitro, podendo inferir o mesmo para os demais peptídeos. Conclusão: A utilização de segmentos conservados diminui a infecção do parasito na célula hospedeira, podendo ser possíveis alvos para o surgimento de imunoprofilaxia.