Esferóides celulares : como confiar neles por metodologias não destrutivas
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Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFABC |
Texto Completo: | http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=122322 |
Resumo: | Orientadora: Profa. Dra. Andrea Cecília Dorión Rodas. |
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Esferóides celulares : como confiar neles por metodologias não destrutivasTISSUE ENGINEERINGBIOFABRICATION3D CELL CULTURE3D BIOPRINTINGREGENERATIVE MEDICINEENGENHARIA TECIDUALBIOFABRICAÇÃOCULTIVO CELULAR 3DBIOIMPRESSÃO 3DMEDICINA REGENERATIVAPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM ENGENHARIA BIOMÉDICA - UFABCOrientadora: Profa. Dra. Andrea Cecília Dorión Rodas.Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-graduação em Engenharia Biomédica. São Bernardo do Campo, 2021.The use of 3D cellular models has been developing very fast. Among the methodologies for biofabrication of these models, most of them have the final application as components of new materials ¿ cell interaction or drug screening. The spheroid shape is the easiest form to have a simple 3D model. However, this model lacks standardization of its characteristics for further use in biofabrication. Because of this, the aim of this work is to give a set of indexes for spheroids production and formation that can be used as a non-destructive way to keep the spheroid for other applications. The methodology chosen for spheroid preparation was the non-adhesive using non-adherent micromolds with the cell line NHI-3T3. It varied the initial number of cells to make the spheroids, and they were imaged in 3 and 7 days of culture. The spheroids in the images were analyzed according to the ASTM F1877-16 where the calculated indexes were: the Equivalent Circle diameter (ECD), The Aspect Ratio (AR), Roundness (R) and Form Factor (FF) were calculated. Convolutional Neural Networks (CNN) were also applied to identify live and dead cells. As results, the spheroids formed with the initial amount 1.0 x 105 cells presented the best index to spheroid formation, more than this the spheroids had an elliptic form and less than this is observed a cluster formation at 7 days of cultivation. Among the CNNs used to classify the dead and live cells in the images, the AlexNet was the most suitable for this application. This initial characterization applying the ASTM-F1877-16 showed to be suitable for initial spheroid parameters, which allow qualitative data to be quantitative. When spheroids are used for this application, as for example in bioprinting of translucent materials, followed by AlexNet CNN, it is possible to have a full new material analyzed and characterized prior to the use without losing any sample.O uso de modelos celulares 3D tem se desenvolvido muito rapidamente. Entre as metodologias de biofabricação destes modelos, a maioria apresenta aplicação final como componentes de novos materiais - interação celular ou triagem de medicamentos. A forma esferóide é a forma mais fácil de se ter um modelo 3D simples. Entretanto, este modelo carece de padronização de suas características para uso posterior na biofabricação. Por isso, o objetivo deste trabalho é fornecer um conjunto de indicadores para a produção e formação de esferóides que possam ser usados de maneira não destrutiva mantendo o esferoide para outras aplicações. A metodologia escolhida para a fabricação do esferoide foi o método não adesivo utilizando micromoldes não aderentes, com a linhagem celular NHI-3T3. Variou-se o número inicial de células para produção de esferóides, e elas foram fotografadas com 3 e 7 dias de cultura. As imagens dos esferóides foram analisadas de acordo com a ASTM F1877-16, onde foram calculados o índice de Diâmetro de Círculo Equivalente (ECD), A Relação de Aspecto (AR), Arredondamento (R) e Fator de Forma (FF). As Redes Neurais Convolucionais (CNN) também foram aplicadas para identificar células vivas e mortas. Como resultado, os esferóides formados com a quantidade inicial de 1.0 x 105 células apresentaram o melhor índice de formação de esferóides, mais do que isso os esferóides tinham uma forma elíptica e menos do que isso se observa uma formação de agrupamento aos 7 dias de cultivo. Entre as CNNs utilizadas para classificar as células mortas e vivas nas imagens, a AlexNet foi a mais adequada para esta aplicação. Esta caracterização inicial aplicando a ASTM-F1877-16 mostrou ser adequada para os parâmetros iniciais dos esferóides, que permitem que os dados qualitativos tornem-se quantitativos. Quando esferóides são utilizados para esta aplicação, como por exemplo na bioimpressão de materiais translúcidos, seguida pela CNN AlexNet, é possível ter um material novo completo analisado e caracterizado antes do uso sem que se perca nenhuma amostra.Rodas, Andrea Cecilia DorionPrates, Ilka Tiemy KatoLopes, Praticia SantosSantos, Camila Campos2021info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf91 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=122322http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=122322&midiaext=79664http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=122322&midiaext=79663Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=122322porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-09-24T09:56:09Zoai:BDTD:122322Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2024-09-24T09:56:09Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false |
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