Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Garcia, Felipe Baena
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFABC
Texto Completo: http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865
Resumo: Orientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida Sperança
id UFBC_fdd3f3adc33bf75d3590f358f2708d38
oai_identifier_str oai:BDTD:125865
network_acronym_str UFBC
network_name_str Repositório Institucional da UFABC
repository_id_str
spelling Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruziDOENÇA DE CHAGASINIBIDOR DE SERINO PROTEASEECOTINATRYPANOSOMA CRUZICHAGAS' DISEASESERINE PROTEASE INHIBITORECOTINPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOSSISTEMAS - UFABCOrientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida SperançaCo-orientadora: Profa. Dra. Aline Diniz CabralTese (doutorado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biossistemas, São Bernardo do Campo, 2023.Ecotina, um inibidor de serino protease (ISP) descoberto em Escherichia coli, inibe uma ampla gama de serino proteases tipo tripsina, protegendo os microrganismos da resposta imune do hospedeiro. Em eucariotos, os genes que codificam os ISPs foram encontrados apenas em protozoários da família Trypanosomatidae, incluindo o gênero Trypanosoma, que inclui o Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas. O T. cruzi codifica uma proteína ortóloga dos Trypanosomatidae da ecotina, o ISP2, que em espécies de Leishmania apresentaram atividade inibitória em proteases de mamíferos da família S1A, sugerindo seu papel nas interações vertebrado-hospedeiro-parasita. Neste estudo, foi realizada a caracterização estrutural e bioquímica do recombinante do ISP2 de T. cruzi (rTcISP2), produzido em E. coli. A proteína recmbinante foi purificada na forma solúvel e analisada por dicroísmo circular, espectroscopia de fluorescência, eletroforese nativa, espalhamento dinâmico de luz, espalhamento de raios-X a baixo ângulo e modelagem por homologia. Os dados obtidos revelaram que o rTcISP2 é biologicamente ativo e forma homodímeros em solução. Além disso, a atividade inibitória de rTcISP2 contra elastase de neutrófilos humanos é a mais alta entre ortólogos da ecotina/ISPs de bactérias e tripanossomatídeos. O papel da elastase de neutrófilo no controle de parasitas T. cruzi por meio da modulação de respostas imunes inatas celulares e humorais em hospedeiros vertebrados, tornam o TcISP2 um componente molecular chave para a eficiência da infecção do parasita, fornecendo uma base útil para a investigação das interações parasita-hospedeiro e o potencial do TcISP2 para aplicações biotecnológicas.Ecotin, a serine peptidase inhibitor (ISP), discovered in Escherichia coli, inhibit a wide range of trypsin-like serine peptidases, protecting microorganisms from the host's immune response. In eukaryotes, ISPs encoding genes were found only in Trypanosomatidae protozoa, including the genus Trypanosoma, which harbors Trypanosoma cruzi, the ethiological agent of Chagas' disease. T. cruzi encodes the ISP2 Trypanosomatidae orthologous, which in Leishmania species present inhibitory activity on mammalian proteases from S1A family suggesting its role in vertebrate-host-parasite interactions. In this study, the structural and biochemical characterization of the recombinant T. cruzi ISP2 (rTcISP2), produced in E. coli was purified in soluble form and analyzed by circular dichroism, fluorescence spectroscopy, native electrophoresis, dynamic light scattering, low X-ray scattering and homology modeling. The obtained data revealed that rTcISP2 was biologically active and forms homodimers in solution. Furthermore, inhibitory activity of rTcISP2 against human neutrophil elastase is the highest among ecotins/ISPs orthologous from bacteria and trypanosomatids. The role of neutrophil elastase to control T. cruzi parasites through modulation of cellular and humoral innate immune responses in vertebrate hosts, make TcISP2 a key molecular component for parasite infection efficiency, providing a useful basis for investigation of host-parasite interactions and the potential of TcISP2 for biotechnological applications.Sperança, Márcia AparecidaCabral, Aline DinizLaporta, Gabriel ZorelloLago, João Henrique GhilardiCunha, Rodrigo Luiz Oliveira RodriguesSilva, Wanius José Garcia daGarcia, Felipe Baena2023info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf67 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865&midiaext=81081Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=125865porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2023-12-14T15:29:49Zoai:BDTD:125865Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2023-12-14T15:29:49Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false
dc.title.none.fl_str_mv Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
title Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
spellingShingle Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
Garcia, Felipe Baena
DOENÇA DE CHAGAS
INIBIDOR DE SERINO PROTEASE
ECOTINA
TRYPANOSOMA CRUZI
CHAGAS' DISEASE
SERINE PROTEASE INHIBITOR
ECOTIN
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOSSISTEMAS - UFABC
title_short Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
title_full Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
title_fullStr Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
title_full_unstemmed Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
title_sort Caracterização molecular do inibidor de serino protease 2 (ISP2) de Trypanosoma cruzi
author Garcia, Felipe Baena
author_facet Garcia, Felipe Baena
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Sperança, Márcia Aparecida
Cabral, Aline Diniz
Laporta, Gabriel Zorello
Lago, João Henrique Ghilardi
Cunha, Rodrigo Luiz Oliveira Rodrigues
Silva, Wanius José Garcia da
dc.contributor.author.fl_str_mv Garcia, Felipe Baena
dc.subject.por.fl_str_mv DOENÇA DE CHAGAS
INIBIDOR DE SERINO PROTEASE
ECOTINA
TRYPANOSOMA CRUZI
CHAGAS' DISEASE
SERINE PROTEASE INHIBITOR
ECOTIN
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOSSISTEMAS - UFABC
topic DOENÇA DE CHAGAS
INIBIDOR DE SERINO PROTEASE
ECOTINA
TRYPANOSOMA CRUZI
CHAGAS' DISEASE
SERINE PROTEASE INHIBITOR
ECOTIN
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOSSISTEMAS - UFABC
description Orientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida Sperança
publishDate 2023
dc.date.none.fl_str_mv 2023
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865
url http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125865&midiaext=81081
Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=125865
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
67 f. : il.
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFABC
instname:Universidade Federal do ABC (UFABC)
instacron:UFABC
instname_str Universidade Federal do ABC (UFABC)
instacron_str UFABC
institution UFABC
reponame_str Repositório Institucional da UFABC
collection Repositório Institucional da UFABC
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1813263963808333824

Registros relacionados