Desenvolvimento de método de diagnóstico molecular e sorológico da Doença de Chagas utilizando como marcador o inibidor de serino peptidase 2 de Trypanosoma cruzi

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santana, Carla Moreira
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFABC
Texto Completo: http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125873
Resumo: Orientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida Sperança
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spelling Desenvolvimento de método de diagnóstico molecular e sorológico da Doença de Chagas utilizando como marcador o inibidor de serino peptidase 2 de Trypanosoma cruziDOENÇA DE CHAGASTRYPANOSOMA CRUZIECOTINAISP2DIAGNÓSTICO MOLECULARCHAGAS DISEASEECOTINMOLECULAR DIAGNOSISPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOSSISTEMAS - UFABCOrientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida SperançaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biossistemas, São Bernardo do Campo, 2022.A Doença de Chagas (DC) ou tripanossomíase americana é uma zoonose causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, pertencente à Ordem Kinetoplastida, família Trypanosomatidae, subgênero Schyzotripanum e gênero Trypanosoma, sendo a terceira causa mais comum de infecção parasitária no mundo e a mais importante na América Latina. A infecção por T. cruzi pode ocorrer por transmissão vetorial por triatomíneos, artrópodes da família Reduviidae; congênita e por ingestão de triatomíneos infectados. Após a infecção inicial, pode ocorrer a fase aguda com sintomas graves, mas comumente, a DC evolui para a fase crônica ou indeterminada, caracterizada por ausência de sinais clínicos e sintomas de envolvimento cardíaco ou digestivo, o que pode estar relacionado às diferentes populações genéticas do T. cruzi. Segundo a mais recente classificação, há seis populações genéticas de T. cruzi (discrete typing units – DTUs, TcI a IV), distribuídas de acordo com a região e hábitos dos triatomíneos transmissores. Seu conhecimento é importante para planejamento de ações de controle da transmissão de T. cruzi. O diagnóstico da DC por testes sorológicos utiliza o parasita como antígeno, o que diminui a especificidade do método. Na fase crônica, a detecção de ácidos nucleicos de parasitas pode ser realizada por PCR em tempo real ou PCR qualitativo (baixa sensibilidade em amostras clínicas) com marcadores que não permitem a identificação das DTUs. Portanto, mais estudos são necessários para obtenção de marcadores moleculares e sorológicos para o diagnóstico e prognóstico da DC. O objetivo deste estudo foi investigar o papel do inibidor de serino peptidase 2 (TcISP2) de T. cruzi no diagnóstico de DC crônica. Inicialmente, a imunogenicidade da TcISP2 recombinante, produzida em Eschericchia coli (rTcISP2), foi evidenciada em camundongos BalbC infectados com a cepa Y de T. cruzi (DTU I), por "Enzyme Linked ImmunonoSorbent Assay" (ELISA). A avaliação do gene que codifica a TcISP2 como marcador para diagnóstico molecular foi realizada em amostras de descarte de sangue e soro de pacientes com DC atendidos na seção de infecção do Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia, coletadas de maio de 2019 a outubro de 2021.Chagas disease (CD) or American trypanosomiasis is a zoonosis caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, belonging to the Kinetoplastida Order, Trypanosomatidae family, Schyzotripanum subgenus and Trypanosoma genus, being the third most common cause of parasitic infection in the world and the most important in Latin America. T. cruzi infection can occur through vector transmission by triatomines, arthropods of the Reduviidae family; congenital disease and by ingestion of infected triatomines. After the initial infection, the acute phase with severe symptoms may occur, but CD commonly progresses to the chronic or indeterminate phase, characterized by the absence of clinical signs and symptoms of cardiac or digestive involvement, which may be related to different genetic populations of T. cruzi. According to the most recent classification, there are six genetic populations of T. cruzi (discrete typing units – DTUs, TcI to IV), distributed according to the region and habits of the transmitting triatomines. This knowledge is important for planning actions to control the transmission of T. cruzi.The diagnosis of CD by serological tests uses the parasite as an antigen, which reduces the specificity of the method. In the chronic phase, the detection of parasite nucleic acids can be performed by real-time PCR or qualitative PCR (low sensitivity in clinical samples) with markers that do not allow the identification of DTUs. Therefore, further studies are needed to obtain molecular and serological markers for the diagnosis and prognosis of CD. The objective of this study was to investigate the role of the T. cruzi serine peptidase 2 inhibitor (TcISP2) in the diagnosis of chronic CD. Initially, the immunogenicity of recombinant TcISP2, produced in Escherichia coli (rTcISP2), was evidenced in BalbC mice infected with the Y strain of T. cruzi (DTU I) by the "Enzyme Linked ImmunonoSorbent Assay" (ELISA).The evaluation of the gene that encodes TcISP2 as a marker for molecular diagnosis was carried out on discarded blood samples from CD patients treated at the infection section of Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia, collected from May 2019 to October 2021Sperança, Márcia AparecidaSuzuki, Rodrigo BuzinaroSasaki, Sergio DaishiSantana, Carla Moreira2022info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf79 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125873http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=125873&midiaext=81083Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=125873porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2023-12-15T11:07:36Zoai:BDTD:125873Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2023-12-15T11:07:36Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false
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