Estudo do mecanismo de aÃÃo citotÃxica de naftoquinonas sintÃticas anÃlogas do lapachol

• Autor(a) principal: Arinice de Menezes Costa
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=11008
• topic: Naphthoquinones; Reactive Oxygen Species; FARMACOLOGIA

O lapachol, uma naftoquinona natural, e seus derivados sintÃticos tÃm demonstrado, nos Ãltimos anos, importantes aÃÃes citotÃxicas contra varias linhagens de cÃlulas tumorais, assim como significante atividade antitumoral contra alguns tumores. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o mecanismos de aÃÃo citotoxica em cÃlulas HL-60 de duas naftoquinonas sintÃticas anÃlogas do lapachol (compostos 1 e 2). Inicialmente foi investigado a atividade antiproliferativa dessas naftoquinonas apÃs um perÃodo de incubaÃÃo de 72h em cÃlulas leucÃmicas (HL-60) e cÃlulas mononucleadas do sangue perifÃrico (CMSP) onde foi observado que essas naftoquinonas mostraram-se ativas para estas linhagens com CI50 de 12 ÂM, 2,3 ÂM e 4,3 ÂM para o lapachol, composto 1 e composto 2, respectivamente em cÃlulas HL-60 e 13,7 ÂM e 34,0 ÂM para o composto 1 e 2 em cÃlulas CMSP, respectivamente. A atividade antiproliferativa em cÃlulas HL-60 apÃs 24 horas de incubaÃÃo foi avaliada com e sem co-tratamento com o antioxidante n-acetilcisteÃna (NAC). Assim, a CI50 sem NAC apÃs 24 horas de exposiÃÃo ao lapachol, composto 1 e composto 2 foi de 42,9 μM, 2,7 ÂM e 4,3 ÂM , respectivamente. JÃ CI50 com NAC (5 ÂM) apÃs 24 horas de exposiÃÃo ao lapachol, composto 1 e composto 2 foi de 180,0 μM, 46,0 ÂM e 18,0 ÂM , respectivamente. Estudos feitos em cÃlulas HL-60 indicaram que o lapachol e seus dois anÃlogos induzem morte celular por apoptose e necrose, como mostrado pelas mudanÃas morfolÃgicas avaliadas atravÃs do uso de coloraÃÃo May-GrÃnwald-Giemsa. Nos ensaios realisados por citometria de fluxo foi revelado que estes compostos promovem a geraÃÃo de espÃcies reativas de oxigÃnio (EROs) 18,86%, 13,31% e 39,11% respectivamente para o lapachol (82 ÂM) e compostos 1 e 2 (3,5 ÂM) e 40,94% e 60,49% para os compostos 1 e 2 (7,0 ÂM), respectivamente. O lapachol (82 ÂM) e os compostos 1 e 2 (3,5 ÂM) diminuÃram o nÃmero de cÃlulas com membrana Ãntegra 26,51%, 34,78% e 29,58% respectivamente e os compostos 1 e 2 (7,0 ÂM) diminuÃram 75,3% e 71,1%, respectivamente. A fragmentaÃÃo do DNA promovida por esses compostos foi observada a partir de 3 horas de exposiÃÃo sendo mais intensa apÃs 24 horas de exposiÃÃo aos compostos testados. O lapachol e os compostos 1 e 2 tambÃm promoveram a ativaÃÃo de caspases relacionadas com a via intrÃnseca de morte celular. AlÃm disso, mostraram induzir a quebra de fitas de DNA. Todos os efeitos citotÃxicos foram abolidos quando os compostos 1 e 2 foram co-incubados com o NAC, mostrando, dessa forma, a participaÃÃo de EROs na citotÃxicidade destas naftoquinonas.