Efeitos renais e mecanismos de morte celular promovidos pelo veneno da serpente Bothropoides pauloensis

• Autor(a) principal: Aline Diogo Marinho
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=11815
• topic: FARMACOLOGIA

De acordo com o MinistÃrio da SaÃde do Brasil, as serpentes do gÃnero Bothrops sÃo as principais envolvidas nos acidentes ofÃdicos no paÃs e a insuficiÃncia renal aguda (IRA) à uma complicaÃÃo grave dos envenenamentos por estas serpentes. Neste trabalho, foram investigados os efeitos renais do veneno total de Bothropoides pauloensis (VBp) em sistema de rim isolado de rato e em cultura de cÃlulas tubulares renais da linhagem MDCK (Madin-Darby Canine Kidney). Para perfusÃo de rim isolado foram utilizados ratos Wistar pesando entre 250 e 300g, cujos rins foram excisados cirurgicamente e perfundidos com soluÃÃo de Krebs-Henseleit contendo 6%p/v de albumina bovina previamente dialisada. Foram investigados os efeitos do VBp (3Âg/mL e 10 Âg/mL; n=6). Verificamos queda na pressÃo de perfusÃo (PP) na concentraÃÃo de 10μg/mL aos 90 e 120 min. A resistÃncia vascular renal (RVR) tambÃm diminuiu na concentraÃÃo de 10μg/mL aos 90 e 120 minutos e na concentraÃÃo de 3 μg/mL aos 120 min. O fluxo urinÃrio (FU) diminuiu aos 90 e 120 minutos em ambas as concentraÃÃes, nÃo apresentando diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 120min. O ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG) apresentou uma reduÃÃo aos 60 minutos em ambas as concentraÃÃes, mantendo-se diminuÃda atà o final do experimento, nÃo havendo diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 60min. O percentual de transporte tubular de sÃdio (%TNA+) foi reduzido em ambas as concentraÃÃes nos tempos de 60,90 e 120min, nÃo apresentando diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 60 min; O transporte tubular de cloreto(%TCl-) tambÃm foi reduzido aos 60, 90 e 120min. Em ambas as concentraÃÃes; O transporte tubular de potÃssio (%TK+) diminuÃram aos 60, 90 e 120 minutos na concentraÃÃo de 10μg/mL, na concentraÃÃo de 3μg/mL reduziu aos 60 min,retornando a valores prÃximos ao controle no tempo de 90 e 120min. NÃo havendo diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes nos tempos de 60 e 90 min. A anÃlise mostrou a presenÃa de alteraÃÃes morfolÃgicas significativas, como acÃmulo de proteÃnas a nÃvel tubular. Na cultura de cÃlulas MDCK, o VBp foi capaz de diminuir a viabilidade celular (CI50= 7,5μg/mL). Citometria de fluxo com anexina V e iodeto de propÃdio mostrou que a morte celular ocorreu predominantemente por apoptose. Tratamento com VBp (7,5 μg / mL) levou a despolarizaÃÃo significativa do potencial de membrana mitocondrial. Verificamos a geraÃÃo de EspÃcies Reativas de OxigÃnio. A anÃlise morfolÃgica das cÃlulas mostrou caracterÃsticas indicativas de apoptose. Esses resultados demonstram que o veneno de B. pauloensis alterou todos os parÃmetros renais avaliados na perfusÃo de rim isolado e foi citotÃxico para cultura de cÃlulas MDCK.