Sildenafil diminui a hiperreatividade de aneis isolados de traqueia de ratos e altera a expressÃo genica de proteÃnas Canonical transient receptor potential apÃs desafio antigÃnico

• Autor(a) principal: Cristiano Teles de Sousa
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=14979
• topic: FARMACOLOGIA; FARMACOLOGIA; FARMACOLOGIA

O sildenafil (Viagra Â) à um inibidor seletivo da guanosina monofosfato cÃclico (cGMP), um tipo especÃfico de fosfodiesterase-5 (PDE5) Ãtil no tratamento da disfunÃÃo erÃtil e hipertensÃo arterial pulmonar. O aumento do nÃvel de GMPc intracelular causado pela inibiÃÃo da PDE5 provoca vÃrios eventos celulares, como relaxamento da musculatura lisa das vias aÃreas e inibiÃÃo da inflamaÃÃo celular. O objetivo deste estudo foi avaliar o mecanismo de aÃÃo do sildenafil em traqueias de animais naive e desafiados a ovoalbumina; avaliar a interferÃncia do sildenafil na expressÃo e no funcionamentode dos canais de cÃlcio operados por estoque em traqueias de animais naive, sensibilizados e desafiados a ovoalbumina. No presente trabalho foram utilizados ratos machos, da espÃcie Wistar, os animais foram sensibilizados ativamente por meio de injeÃÃes intraperitoneais de ovalbumina (3 aplicaÃÃes em dias alternados - nos dias 1, 3 e 5), o desafio antigÃnico (broncoprovocaÃÃo) ocorreu no perÃodo entre os dias 21 e 50 pÃs-sensibilizaÃÃo, exatamente 24 horas antes da realizaÃÃo dos experimentos in vitro. Apos a remoÃÃo os anÃis de traqueia foram montados nas camaras de banho isolado e realizadas as curvas concentraÃÃo efeito. Quando comparamos o efeito relaxante do sildenafil a IC50 nos animais com epitÃlio integro 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que a IC50 para o para as preparaÃÃes sem epitÃlio (n = 7) foi de 232,25 [129,58 â 416,23] ÂM, (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Nas preparaÃÃes nÃo tratadas com L-NAME a IC50 foi de 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que nas preparaÃÃes tratadas com L-NAME (n = 7) foi de 348,1 [248 â 488,5] ÂM (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Verificamos nos animais naive um aumento na EC50 para a contraÃÃo produzida pelo carbacol de 0,22 [0,17 - 0,30] ÂM (n = 8) na ausÃncia de sildenafil, para 2,01 [1,21 â 3,33] ÂM (n = 7) na presenÃa de 30 ÂM de sildenafil, para 2,85 [2,09 â 3,87] ÂM na presenÃa de 100 ÂM de sildenafil, e para 2,45 [1,67 â 3,6] ÂM (n = 10) na presenÃa de 300 ÂM de sildenafil. Nos animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina o sildenafil 30ÂM inibiu a hiperreatividade brÃnquica. Com relaÃÃo a entrada de cÃlcio capacitativo, o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de 42,9  7,3% nos animais naÃve para 10,8  3,7% na presence de 30 ÂM de sildenafil (p<0,05). Nos animais desafiados o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de (98,0  11,8%, n = 6) sem a presenÃa de sildenafil para 22,7  5,4% na presenÃa de sildenafil 30 ÂM (p <0,05). Relacionando com a expressÃo genica os animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina, tratados com sildenafil ocorreu um aumento significativo na expressÃo dos genes TRPC1 TRPC6 (p<0,05, Teste de HolmSidak), Em contraste a expressÃo de TRPC5, nÃo expressou mudanÃas apÃs o desafio antigÃnico, entretanto diminuiu de forma significativa apÃs o tratamento com sildenafil (p<0,05, Teste de HolmSidak). Nesse estudo, verificamos que o efeito miorrelaxante do sildenafil envolve o NO, GMPc, canais de potÃssio e canais de cÃlcio operados por estoque. A presenÃa do sildenafil tambÃm foi capaz de reduzir significativamente a resposta ao antÃgeno nos tecidos provenientes de ratos sensibilizados e desafiados, e de alterar a expressÃo de genes pertencentes à subfamÃlia dos TRPC, relacionando o envolvimento da via fosfodiesterase 5 na expressÃo celular de genes TRPC no musculo liso traqueal.