AvaliaÃÃo dos efeitos renais da fraÃÃo L-aminoÃcido Oxidase isolada do veneno da serpente Bothrops marajoensis.

• Autor(a) principal: Rodrigo Tavares Dantas
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=6052
• topic: Bothrops marajoensis, L-amino acid oxidase, Kidney; FARMACOLOGIA

No mundo, existem cerca de 3.000 espÃcies de serpentes das quais 10 a 14% sÃo peÃonhentas. Dentre os paÃses sul-americanos, o Brasil à o que apresenta maior nÃmero de acidenÂtes/ano com cerca de 20.000 acidentes ofÃdicos por ano. De acordo com o MinistÃrio da SaÃde, as serpentes do gÃnero Bothrops sÃo as principais envolvidas nos acidentes ofÃdicos no paÃs e a insuficiÃncia renal aguda (IRA) à uma complicaÃÃo grave dos envenenamentos produzidos por estas serpentes. Tendo em vista que a fraÃÃo L-aminoÃcido oxidase (LAAO) constitui grande parte da composiÃÃo total do veneno de serpentes, em algumas serpentes chegando a constituir mais de 30% do total de proteÃnas do veneno, neste trabalho, foram investigados os efeitos renais da fraÃÃo L-aminoÃcido oxidase isolada do veneno da serpente Bothrops marajoensis (LAAOBM) em sistema de perfusÃo de rim isolado e em cultura de cÃlulas tubulares renais da linhagem MDCK (Madin-Darby Canine Kidney). Para perfusÃo de rim isolado foram utilizados ratos Wistar pesando entre 250 e 300g, cujos rins foram excisados cirurgicamente e perfundidos com soluÃÃo de Krebs-Hanseleit contendo 6%p/v de albumina bovina previamente dialisada. Foram investigados os efeitos da LAAOBM (10 Âg/mL; n=4) sobre a PressÃo de PerfusÃo (PP), ResistÃncia Vascular Renal (RVR), Fluxo UrinÃrio (FU), Ritmo de FiltraÃÃo Glomerular (RFG), Percentual de Transporte Tubular Proximal de SÃdio (%pTNa+),Percentual de Transporte Tubular de SÃdio (%TNa+), de PotÃssio (%TK+) e de Cloreto (%TCl-). As cÃlulas MDCK foram cultivadas em meio de cultura RPMI 1640 suplementado com 10% v/v de Soro Bovino Fetal e entÃo incubadas com a LAAOBM nas concentraÃÃes de 50; 25; 12,5; 6,25; 3,125 e 1,652 Âg/mL. ApÃs 24 horas de incubaÃÃo, foram realizados os ensaios de viabilidade e proliferaÃÃo celular utilizando-se o mÃtodo do MTT. A LAAOBM promoveu uma reduÃÃo da pressÃo de perfusÃo aos 90 minutos de experimento e esta reduÃÃo foi ainda discretamente maior aos 120 minutos. Observou-se tambÃm queda da resistÃncia vascular renal aos 120 minutos. Houve uma queda abrupta e acentuada do fluxo urinÃrio aos 90 minutos que, apesar da tendÃncia à recuperaÃÃo observada aos 120 minutos, ainda mostrou-se bastante reduzido quando comparado ao grupo controle. A infusÃo da LAAOBM tambÃm promoveu uma reduÃÃo do ritmo de filtraÃÃo glomerular aos 90 minutos quando comparada ao grupo controle e este parÃmetro manteve-se ainda no mesmo patamar de reduÃÃo aos 120 minutos. A LAAOBM reduziu gradativamente o percentual de transporte tubular de sÃdio aos 90 e 120 minutos e o percentual de transporte tubular de cloreto nos tempos de 60, 90 e 120 minutos. A anÃlise histolÃgica dos rins perfundidos com LAAOBM mostrou a presenÃa de alteraÃÃes morfolÃgicas significativas, como acÃmulo de proteÃnas nos espaÃos tubulares e glomerulares. Na cultura de cÃlulas MDCK a LAAOBM promoveu uma reduÃÃo da viabilidade celular a partir da concentraÃÃo de 3,25Âg/mL atà a concentraÃÃo de 50Âg/mL, com valor da CI50 de 2,43Âg/mL. Foram observadas tambÃm, atravÃs de microscÃpio Ãptico invertido, alteraÃÃes morfolÃgicas destas cÃlulas, tais vacuolizaÃÃo citoplasmÃtica, alteraÃÃo do estado de confluÃncia e desprendimento das mesmas do substrato de cultura. Estes resultados demonstram que a LAAOBM alterou todos os parÃmetros vasculares e renais avaliados na perfusÃo de rim isolado e possui aÃÃo citotÃxica sobre as cÃlulas MDCK apÃs 24 horas de incubaÃÃo.