AnÃlise espacial e temporal da expressÃo de genes relacionados ao metabolismo de lipÃdios em sementes de pinhÃo manso (Jatropha curcas L.)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Washington Luiz Gomes Costa
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=9438
Resumo: O esgotamento das reservas de energia nÃo-renovÃvel, como petrÃleo, carvÃo e gÃs natural, tÃm estimulado a busca por fontes alternativas geradoras de energia. Neste contexto, o pinhÃo manso (Jatropha curcas L.) tem recebido especial atenÃÃo por parte dos pesquisadores, devido à presenÃa de grande quantidade de Ãleo em suas sementes, que pode ser convertida em biodiesel. O objetivo deste trabalho foi investigar o comportamento de genes relacionados ao metabolismo de lipÃdios durante os processos de desenvolvimento e germinaÃÃo da semente de pinhÃo manso. Para quantificar com exatidÃo os nÃveis de expressÃo gÃnica por RT-qPCR foi feita uma seleÃÃo entre nove candidatos a genes de referÃncia. Nossos resultados mostraram que na anÃlise de sementes em desenvolvimento, os genes GAPDH, UCP, ACT11, PP2A2 e CICLOF foram os mais estÃveis. Para as sementes em germinaÃÃo, os genes considerados mais estÃveis foram EF1-α, PP2A2, GAPDH, PUB3 e ACT11. Para validar nossos resultados com genes de referÃncia, foi utilizado o padrÃo de expressÃo do gene que codifica a proteÃna oleosina no qual foi observado que o mesmo foi similar aos observados em artigos cientÃficos pesquisados, indicando que os genes de referÃncia estavam apropriados para normalizaÃÃo dos dados de RT-qPCR. ApÃs obtenÃÃo desses dados, efetuou-se um estudo da expressÃo por RT-qPCR de 20 genes envolvidos com o metabolismo de lipÃdios. Nossos resultados revelaram que os genes oleosina, β-cetoacil-ACP Sintase I e II, tioesterase A e triacilglicerol lipase I, bem como outros genes envolvidos na biossÃntese de lipÃdios, alcanÃaram altos nÃveis de expressÃo no desenvolvimento da semente. Os genes acil-CoA sintetase, tiolase e triacilglicerol lipase II, relacionados com a degradaÃÃo de lipÃdios apresentaram altos nÃveis de transcritos na germinaÃÃo da semente. Os dados obtidos neste trabalho contribuem para o entendimento das vias metabÃlicas estudadas, fornecendo subsÃdios para a produÃÃo, via engenharia genÃtica, de variedades melhoradas do pinhÃo manso.
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spelling info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisAnÃlise espacial e temporal da expressÃo de genes relacionados ao metabolismo de lipÃdios em sementes de pinhÃo manso (Jatropha curcas L.)Analysis of the spatial and temporal expression of genes related to lipid metabolism in seeds of Jatropha (Jatropha curcas L.)2013-02-15Francisco de Assis de Paiva Campos07292082300http://lattes.cnpq.br/7845809799936552Josà HÃlio Costa54226570391http://lattes.cnpq.br/9164931802712627 Fabiano de Moura Teixeira02194116702http://lattes.cnpq.br/8429252367963369FÃbio CÃsar Sousa Nogueira66151899334http://lattes.cnpq.br/924643015472006747261331368http://lattes.cnpq.br/1073853630274470Washington Luiz Gomes CostaUniversidade Federal do CearÃPrograma de PÃs-GraduaÃÃo em BioquÃmicaUFCBR normalizaÃÃo genes de referÃnciaexpressÃo gÃnicagene expression reference genes normalizationBIOQUIMICAO esgotamento das reservas de energia nÃo-renovÃvel, como petrÃleo, carvÃo e gÃs natural, tÃm estimulado a busca por fontes alternativas geradoras de energia. Neste contexto, o pinhÃo manso (Jatropha curcas L.) tem recebido especial atenÃÃo por parte dos pesquisadores, devido à presenÃa de grande quantidade de Ãleo em suas sementes, que pode ser convertida em biodiesel. O objetivo deste trabalho foi investigar o comportamento de genes relacionados ao metabolismo de lipÃdios durante os processos de desenvolvimento e germinaÃÃo da semente de pinhÃo manso. Para quantificar com exatidÃo os nÃveis de expressÃo gÃnica por RT-qPCR foi feita uma seleÃÃo entre nove candidatos a genes de referÃncia. Nossos resultados mostraram que na anÃlise de sementes em desenvolvimento, os genes GAPDH, UCP, ACT11, PP2A2 e CICLOF foram os mais estÃveis. Para as sementes em germinaÃÃo, os genes considerados mais estÃveis foram EF1-α, PP2A2, GAPDH, PUB3 e ACT11. Para validar nossos resultados com genes de referÃncia, foi utilizado o padrÃo de expressÃo do gene que codifica a proteÃna oleosina no qual foi observado que o mesmo foi similar aos observados em artigos cientÃficos pesquisados, indicando que os genes de referÃncia estavam apropriados para normalizaÃÃo dos dados de RT-qPCR. ApÃs obtenÃÃo desses dados, efetuou-se um estudo da expressÃo por RT-qPCR de 20 genes envolvidos com o metabolismo de lipÃdios. Nossos resultados revelaram que os genes oleosina, β-cetoacil-ACP Sintase I e II, tioesterase A e triacilglicerol lipase I, bem como outros genes envolvidos na biossÃntese de lipÃdios, alcanÃaram altos nÃveis de expressÃo no desenvolvimento da semente. Os genes acil-CoA sintetase, tiolase e triacilglicerol lipase II, relacionados com a degradaÃÃo de lipÃdios apresentaram altos nÃveis de transcritos na germinaÃÃo da semente. Os dados obtidos neste trabalho contribuem para o entendimento das vias metabÃlicas estudadas, fornecendo subsÃdios para a produÃÃo, via engenharia genÃtica, de variedades melhoradas do pinhÃo manso.The depletion of non-renewable energy such as oil, coal and natural gas, has stimulated the search for alternative sources of energy generation. In this context, physic nut (Jatropha curcas L.) has received special attention from researchers due to the presence of large amounts of oil in its seeds that can be converted into biodiesel. The objective of this study was to investigate the behavior of genes related to lipid metabolism during the development and germination of physic nut seeds. To accurately quantify the levels of gene expression by RT-qPCR, a selection of nine candidates for reference genes was performed. Our results showed that the GAPDH, UCP, ACT11, PP2A2 and CICLOF were the most stable genes during the development of the seeds. In germinating seeds, EF1-α, PP2A2, GAPDH, PUB3 and ACT11 were considered the most stable genes. To validate our findings with reference genes, we used the expression profile of the gene encoding the oleosin protein in which that was similar to those observed in the literature evaluated, indicating that they were suitable reference genes for data normalization by RT-qPCR. After obtaining these data, we performed a gene expression study by RT-qPCR of 20 genes involved in lipid metabolism. Our results revealed that the oleosin, β-ketoacyl-ACP Synthase I and II, thioesterase A and triacylglycerol lipase I genes, as well as other genes involved in lipid biosynthesis, achieved high expression levels in developing seeds. Acyl-CoA synthetase, thiolase and triacylglycerol lipase II, genes related to the degradation of lipids, showed high transcript levels in germinating seeds. The data obtained in this study contribute to the understanding of the metabolic pathways studied, providing subsidies for production of improved varieties of physic nut via genetic engineering.FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgicohttp://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=9438application/pdfinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFCinstname:Universidade Federal do Cearáinstacron:UFC2019-01-21T11:22:32Zmail@mail.com -
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