ProteÃÂnas de tintas de moluscos marinhos composiÃÂÃÂo, funÃÂÃÂo e mecanismo de aÃÂÃÂo

• Autor(a) principal: Tallita Cruz Lopes Tavares
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=6997
• topic: Aplysia dactylomela; Bursatella leachii; Octopus sp.; Tinta; Atividade antimicrobiana; Defesa quÃÂmica; LAAO; Aplysia dactylomela; Bursatella leachii; Octopus sp.; Ink, antimicrobial activity, chemical defense; LAAO; BIOQUIMICA

Nos moluscos sem concha ou naqueles em que a mesma estÃÂ presente na forma vestigial, como cefalÃÂpedes e gastrÃÂpodes opistobrÃÂnquios, a falta dessa proteÃÂÃÂo externa conduziu ÃÂ evoluÃÂÃÂo de mecanismos de defesa dominados pela secreÃÂÃÂo ou incorporaÃÂÃÂo de substÃÂncias quÃÂmicas bioativas. ProteÃÂnas sintetizadas de novo sÃÂo bons exemplos dessas molÃÂculas, tendo sido encontradas nas tintas de vÃÂrias espÃÂcies de lesmas do mar, particularmente do gÃÂnero Aplysia. Muitas jÃÂ revelaram pertencer a famÃÂlias de proteÃÂnas com atividade oxidÃÂstica de L-aminoÃÂcidos (LAAOs), grupo do qual fazem parte tambÃÂm proteÃÂnas bioativas encontradas nos venenos de serpentes. A caracterizaÃÂÃÂo, portanto, das atividades biolÃÂgicas e do perfil bioquÃÂmico dessas proteÃÂnas ÃÂ muito ÃÂtil para que possamos entender como se dÃÂo os mecanismos defensivos desses animais e quÃÂo difundidos esses sÃÂo, alÃÂm de proporcionar subsÃÂdios para sua aplicaÃÂÃÂo biomedicinal. Esse estudo visou a elucidaÃÂÃÂo dos mecanismos de aÃÂÃÂo da dactilomelina-P, proteÃÂna antibacteriana purificada da tinta de Aplysia dactylomela, e a comparaÃÂÃÂo da composiÃÂÃÂo protÃÂica e das atividades antimicrobianas das tintas liberadas por dois gastrÃÂpodes, A. dactylomela e Bursatella leachii, e por um cefalÃÂpode, Octopus sp.. O estudo revelou que a dactilomelina-P ÃÂ uma L-aminoÃÂcido oxidase capaz de oxidar L-lisina e L-arginina, com maior afinidade por L- arginina, com Km de 0,22 +- 0,16 mM/L para a L-lys e de 0,015 +- 0,01 Mm/L para a L-arg. Demonstrou tambÃÂm que sua atividade antibacteriana ÃÂ medida por esta propriedade, tendo o perÃÂxido de hidrogÃÂnio, gerado na oxidaÃÂÃÂo enzimÃÂticca, grande aprtipaÃÂÃÂo na inibiÃÂÃÂo bacteriana. A proteÃÂna se comporta de maneira bacteriostÃÂtica quando em meio nÃÂo suplementado com L-lisina e L-angilina, sendo bactericida na presenÃÂa destes. AlÃÂm disso, a atividade antibacteriana mostrou ser dependente da concentraÃÂÃÂo de aminoÃÂcidos disponibilizados para oxidaÃÂÃÂo pela proteÃÂna. A atividade Staphylococcus aureus deve ocorrer por meio de mecanismos que nÃÂo induzam danoso na morfologia celular, uma vez que nÃÂo foi observada qualquer alteraÃÂÃÂo morfolÃÂgica por microscopia de forÃÂa atÃÂmica. JÃÂ a anÃÂlise das trÃÂs tintas pro PAGE-SDS revelou a presenÃÂa, em todas elas, de bandas protÃÂicas de cerca de 60 kDa, alÃÂm de bandas de peso moleculares mais baixos. Por Western blot pode-se observar a existÃÂncia de identidade imunolÃÂgica entre proteinas das trÃÂs tintas, visto que anticorpos policlonais produzidos contra a dactilomelina-P reconheceram proteÃÂna(s) de cerca de 60 kDa na tinta de B. leachii e de cerca de 30 kDa na tinta de Octopus sp. Dentre as trÃÂs tintas, somente a tinta de A. dactylomela apresentou atividades antibacterianas e antifÃÂngica