Atividade antifosfolipÃsica A2 da harpalicina 2, uma isoflavona isolada de Harpalyce brasiliana Benth.

• Autor(a) principal: Rafael Matos Ximenes
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=8398
• topic: Harpalyce brasiliana; Harpalicina 2; Harpalyce brasiliana; harpalycina 2; phospholipase A2; venem; FARMACOLOGIA

As fosfolipases A2 secretÃrias (sPLA2, EC 3.1.1.4) hidrolisam a ligaÃÃo Ãster sn-2 dos fosfolipÃdios, liberando Ãcidos graxos e lisofosfolipÃdios. A expressÃo destas enzimas esta elevada em diversas condiÃÃes patolÃgicas como, artrite reumatÃide, sepse, aterosclerose e cÃncer. AlÃm disto, as sPLA2s sÃo os principais componentes tÃxicos dos venenos de algumas serpentes, sendo os principais responsÃveis pelo dano tecidual local. A harpalicina 2 Ã uma isoflavona isolada das folhas de Harpalyce brasiliana Benth., uma raiz-de-cobra utilizada na medicina popular do Nordeste para tratar envenenamentos por serpentes e condiÃÃes inflamatÃrias. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da harpalicina 2 nas atividades enzimÃtica, edematogÃnica e miotÃxica de sPLA2s isoladas dos venenos de Bothrops pirajai (PrTX-III), Crotalus durissus terrificus (Cdt F15), Apis mellifera (Apis) e Naja naja (Naja). AlÃm disso, o efeito sobre agregaÃÃo plaquetÃria induzida pela piratoxina-III (PrTX-III) em decorrÃncia do tratamento com a harpalicina 2 tambÃm foi avaliado. A harpalicina 2 inibiu todas as sPLA2s testadas, com percentuais de inibiÃÃo de 58,7, 78,8, 87,7 e 88,1 % para PrTX-III, Cdt F15, Apis e Naja, respectivamente. A primeira fase da atividade edematogÃnica induzida pela administraÃÃo das sPLA2s tambÃm foi inibida pela harpalicina 2, assim como a miotoxicidade. Quando avaliada especificamente sobre a PrTX-III, em comparaÃÃo com os inibidores padrÃo, Ãcido aristolÃchico (Aris Ac) e brometo de p-bromofenacila (p-BPB), a IC50 da harpalicina 2 sobre a atividade enzimÃtica foi de 11,34 Â 0,28 μg/mL. AlteraÃÃes conformacionais como um leve desenovelamento e a transiÃÃo da forma dimÃrica para monomÃrica tambÃm foram observadas apÃs o tratamento com a harpalicina 2, sem contudo alterar a massa da proteÃna. Nos experimentos de agregaÃÃo plaquetÃria, a harpalicina 2 incubada previamente com a PrTX-III inibiu a agregaÃÃo quando comparada a proteÃna nÃo tratada. O efeito inibitÃrio do Ãcido aristolÃchico e do p-BPB foram menores do que os da harpalicina 2, que tambÃm inibiu a agregaÃÃo induzida pelo Ãcido araquidÃnico. Os resultados de docking, obtidos utilizando as estruturas cristalogrÃficas das sPLA2s oriundas do Protein Data Bank, revelaram uma tendÃncia entre os valores dos GOLD scores e os percentuais de inibiÃÃo da atividade enzimÃtica e de agregaÃÃo plaquetÃria, apontando a formaÃÃo de ligaÃÃes de hidrogÃnio entre a harpalicina 2 e resÃduos importantes do sÃtio ativo das sPLA2s, como a histidina-48. Em conclusÃo, estes resultados mostraram o efeito inibitÃrio da harpalicina 2 sobre as atividades enzimÃticas e tÃxicas das sPLA2s, corroborando, em parte, o uso da H. brasiliana na medicina popular.