Saccharomyces boulardii Interfere nas vias de sinalizaÃÃo celular NF-KB, MAPK e TLR/MYD88 alteradas pelo 5-fluorouracil

• Autor(a) principal: Priscilla Fernanda Campos Justino
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=16619
• topic: FARMACOLOGIA; FARMACOLOGIA; FARMACOLOGIA

IntroduÃÃo: A mucosite induzida por antineoplÃsicos à um fator limitante na terapia anticÃncer. O trato gastrintestinal à vulnerÃvel por causa da alta proliferaÃÃo e frequÃncia de renovaÃÃo celular. Saccharomyces boulardii (SB) à uma levedura probiÃtica que à utilizada para proteger a microflora gastrintestinal do desequilÃbrio e de distÃrbios gastrintestinais associados. Objetivos: Avaliar o efeito do tratamento com SB na resposta inflamatÃria e nas vias de sinalizaÃÃo celular (NFkB e MAPK) e nos receptores Toll-like 2 e 4 associados a proteÃna adaptadora (MyD88) no curso da mucosite intestinal experimental induzida por 5-FU. MÃtodos: Camundongos machos Swiss (25-30g) foram tratados com 5-FU (450mg/Kg, i.p.) ou com soluÃÃo salina (controle). O grupo SB recebeu durante 3 dias consecutivos somente o SB (1.109 UFC/Kg, gavagem) atà o dia do sacrifÃcio. O grupo 5-FU+SB recebeu SB por 3 dias consecutivos apÃs a administraÃÃo do 5-FU. No 4 dia apÃs o 5-FU ou 5-FU+SB, os animais foram sacrificados, amostras de jejuno e Ãleo foram retiradas e os parÃmetros gerais da mucosite foram avaliados (leucograma, perca de peso, diarreia, histologia e MPO). Utilizou-se tambÃm as cÃlulas Caco2 incubadas com 5-FU (1mM) e SB por 24h. Avaliou-se tambÃm a inflamaÃÃo e as vias de sinalizaÃÃo celular, para isso avaliamos a expressÃo de NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK), iNOS, citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-α, IL-1β, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-ɣ), receptores toll-like 2 e 4 e, MyD88. Utilizou-se os mÃtodos de ELISA e ImunohistoquÃmica para as anÃlises em tecidos animais e, utilizamos as tÃcnicas de qPCR e de WB para as anÃlises celulares. Resultados: O tratamento com 5-FU foi capaz de induzir uma lesÃo intestinal com um importante comprometimento da barreira epitelial funcional com a presenÃa das seguintes alteraÃÃes: encurtamento acentuado das vilosidades intestinais, necrose parcial de criptas, vacuolizaÃÃo de cÃlulas, presenÃa de infiltrado de polimorfonucleares, aumento das concentraÃÃes de citocinas pro-inflamatÃrias (TNF-α, IL-1β, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-ɣ), aumento das concentraÃÃes de iNOS, alteraÃÃes das vias celulares NF-kB e MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK) e alteraÃÃo dos receptores Toll-like 2 e 4 e de MyD88. O tratamento com 5-FU+SB reduziu significativamente as lesÃes intestinais, com recuperaÃÃo dos vilos, recuperaÃÃo da profundidade das criptas, diminuiÃÃo do infiltrado neutrofÃlico e de iNOS, reduÃÃo da concentraÃÃo das citocinas pro-inflamatÃrias. Reduziu a alteraÃÃo causada pelo 5-FU nas vias celulares NF-kB e MAPK e nas expressÃes de receptores TLR2 e TLR4 e de MyD88. ConclusÃo: O SB reverte a mucosite intestinal causada pelo 5-FU, com a participaÃÃo de TNF-α, IL-1β, CXCL-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-ɣ e iNOS. O SB parece inibir as vias NF-kB e MAPK. Nossos achados, em parte, poderiam explicar os sintomas persistentes da mucosite intestinal nos pacientes sob o tratamento com 5-FU, alÃm de contribuir para o entendimento dessa patogÃnese, auxiliando na descoberta de novas abordagens terapÃuticas com o uso de Saccharomyces boulardii.