Padronização de protocolos de implementação do Caenorhabditis elegans como modelo de estudo em bioquímica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silveira, Pedro Henrique de Sousa
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/31625
Resumo: O uso de métodos alternativos na pesquisa científica teve um crescimento acentuado nas últimas décadas graças ao surgimento de metodologias que possam substituir, refinar ou reduzir a prática envolvendo modelos animais e à criação de instituições governamentais para a validação e incentivo destas técnicas ao redor mundo. O uso do nematódeo Caenorhabditis elegans se torna atrativo, pois além de ser um método alternativo, possui vantagens em sua utilização como modelo. Dentre esses recursos que vão desde seu fácil manuseio e manipulação em laboratório até características de interesse na pesquisa como um genoma completamente sequenciado e semelhante a metazoários, um diagrama neuronal completo e número fixo de células descritas. Além disso, características como 80% das proteínas serem comparáveis a de seres humanos permite que estudos relacionados ao metabolismo sejam feitos. O metabolismo energético tem sido estudado tanto para desvendar o seu funcionamento, como também os impactos das desregulações causadas, como no caso do estresse oxidativo. Este desequilíbrio ocorre pelo aumento do número de espécies reativas de oxigênio somadas à saturação ou perda de função de processos antioxidantes naturais ao corpo que acabam por gerar diversos tipos de doenças e transtornos pelo organismo, abrindo margem para diferentes estudos e aprofundamentos. Desse modo, o objetivo do trabalho foi implementar o nematódeo Caenorhabditis elegans como modelo de estudo no laboratório de Bioquímica das Interações (Instituto de Biologia da UFF) para investigação de aspectos bioquímicos e comportamentais em diferentes contextos de pesquisa. Foram realizadas análises qualitativas sobre os procedimentos de sincronização e estresse oxidativo, abordando desde alterações feitas para melhor adaptação ao laboratório e mudanças que pudessem gerar melhores resultados. Além disso, foi feita uma análise quantitativa do estresse oxidativo, junto da comparação do experimento em estágios de desenvolvimentos distintos somados à proposição inicial de uma metodologia para estudar os efeitos do extrato aquoso da Alga Parda. Por fim, espera-se a realização de mais experimentos futuros para a implementação da metodologia envolvendo algas marinhas e que o presente estudo possibilite e incentive a integração do C.elegans a outras áreas.
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Além disso, características como 80% das proteínas serem comparáveis a de seres humanos permite que estudos relacionados ao metabolismo sejam feitos. O metabolismo energético tem sido estudado tanto para desvendar o seu funcionamento, como também os impactos das desregulações causadas, como no caso do estresse oxidativo. Este desequilíbrio ocorre pelo aumento do número de espécies reativas de oxigênio somadas à saturação ou perda de função de processos antioxidantes naturais ao corpo que acabam por gerar diversos tipos de doenças e transtornos pelo organismo, abrindo margem para diferentes estudos e aprofundamentos. Desse modo, o objetivo do trabalho foi implementar o nematódeo Caenorhabditis elegans como modelo de estudo no laboratório de Bioquímica das Interações (Instituto de Biologia da UFF) para investigação de aspectos bioquímicos e comportamentais em diferentes contextos de pesquisa. Foram realizadas análises qualitativas sobre os procedimentos de sincronização e estresse oxidativo, abordando desde alterações feitas para melhor adaptação ao laboratório e mudanças que pudessem gerar melhores resultados. Além disso, foi feita uma análise quantitativa do estresse oxidativo, junto da comparação do experimento em estágios de desenvolvimentos distintos somados à proposição inicial de uma metodologia para estudar os efeitos do extrato aquoso da Alga Parda. Por fim, espera-se a realização de mais experimentos futuros para a implementação da metodologia envolvendo algas marinhas e que o presente estudo possibilite e incentive a integração do C.elegans a outras áreas.The use of alternative methods in scientific research has seen marked growth in recent decades thanks to the emergence of methodologies that can replace, refine or reduce practices involving animal models and the creation of government institutions to validate and encourage these techniques around the world. The use of the nematode Caenorhabditis elegans is attractive because, in addition to being an alternative method, it has advantages in its use as a model. These resources range from easy handling and manipulation in the laboratory to characteristics of interest in research such as a completely sequenced genome similar to metazoans, a complete neuronal diagram and a fixed number of described cells. Furthermore, characteristics such as 80% of proteins being comparable to those of humans allows studies related to metabolism to be carried out. Energy metabolism has been studied both to unveil its functioning, as well as the impacts of the dysregulations caused, as in the case of oxidative stress. This imbalance occurs due to the increase in the number of reactive oxygen species added to the saturation or loss of function of the body's natural antioxidant processes, which end up generating different types of diseases and disorders throughout the body, leaving room for different studies and in-depth studies. Thus, the objective of the work was to implement the nematode Caenorhabditis elegans as a study model in the Biochemistry of Interactions laboratory (Institute of Biology at UFF) to investigate biochemical and behavioral aspects in different research contexts. Qualitative analyzes were carried out on synchronization and oxidative stress procedures, covering everything from changes made to better adapt to the laboratory and changes that could generate better results. Furthermore, a quantitative analysis of oxidative stress was carried out, along with the comparison of the experiment at different stages of development, added to the initial proposition of a methodology to study the effects of the aqueous extract of Brown Seaweed. Finally, it is expected that more future experiments will be carried out to implement the methodology involving seaweed and that the present study will enable and encourage the integration of C.elegans into other areas.27 f.Ribeiro, Manuel Gustavo Leitãohttp://lattes.cnpq.br/8039485934181427Cabral, Luiz Morshttp://lattes.cnpq.br/5525595141868422Gonzalez, Marcelo Salaberthttp://lattes.cnpq.br/4918518097114077Almeida, Lucas Tadeu de Andradehttp://lattes.cnpq.br/4081690656346053Silveira, Pedro Henrique de Sousa2023-12-21T15:10:22Z2023-12-21T15:10:22Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfSILVEIRA, Pedro Henrique de Sousa. 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