Investigação de fatores de virulência extraintestinal em cepas de Escherichia coli multirresistente isoladas de aves de criação no Estado do Rio de Janeiro

• Autor(a) principal: Meschesi, Enzo Lage
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/31776
• topic: E. coli; Virulência; Resistência; Biofilmes; Saúde única; Escherichia coli; Bactéria; Ave doméstica; Frango de corte; Microbioma gastrointestinal; Virulence; Resistance; Biofilm; Unique health

Escherichia coli é uma bactéria extensamente distribuída e investigada, que desempenha um papel essencial na microbiota gastrointestinal de diversos animais de sangue quente, incluindo humanos e aves. Na maioria dos casos, atua como um microrganismo comensal, mas apresenta capacidade de causar doenças tanto no ambiente intestinal (InPEC - E. coli patogênica intestinal), quanto extraintestinal (EXPEC - E. coli patogênica extraintestinal). E. coli possui alta capacidade de carrear e adquirir elementos genéticos móveis através da transferência horizontal de genes, como genes de virulência e resistência a antimicrobianos, tanto entre cepas diferentes, como com bactérias de outras espécies. Devido a essa plasticidade genética, a presença de fatores de virulência em cepas de origem aviária, principalmente aquelas apresentando perfil de multirresistência a drogas (MDR), é importante sob o aspecto da saúde única, pois conseguem afetar as esferas da saúde humana, animal e ambiental. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de genes de virulência em cepas de E. coli MDR oriundas de carcaça e cloaca de aves assintomáticas de sistemas de criação intensivo e semi-intensivo no Estado do Rio de Janeiro. As amostras foram isoladas de swabs de cloaca e de lavagem de carcaça de frango, utilizando meios seletivo/indicadores como o Ágar CLED e Ágar MacConkey, identificadas a partir de provas bioquímicas convencionais e com confirmação por espectrometria de massa (MALDI-TOF MS). Para detecção dos genes de virulência, foram realizadas reações em cadeia da polimerase (PCR) tendo como alvo inicialmente os genes papC, hlyA, cnf, kps e irp2, separados como Grupo I, responsáveis pela produção de adesina, hemolisina, toxina, protectina e sideróforo, respectivamente. As cepas positivas para um ou mais desses genes foram adicionalmente testadas para os genes, iss, csg, ecpA, e fimH separados como Grupo II, associados a sobrevivência no soro, fímbria curli, fímbria comum de E. coli e fímbria do tipo 1, respectivamente. A triagem dos genes foi feita inicialmente utilizando pools com DNA de 8-10 cepas, sendo em sequência realizadas reações individuais de cada pool positivo. Das 78 cepas MDR avaliadas, quando testadas para os marcadores do Grupo I, 14% (11/78) apresentaram o gene papC, 27% (21/78) apresentaram kps, 28% (22/78) apresentaram irp2, nenhuma apresentou o gene cnf e o gene hlyA. Quando testadas para os genes do Grupo II, foi observado que 73% (72/78) apresentaram o gene csg, 91% (71/78) apresentaram o gene ecpA, 94% (73/78) apresentaram o gene fimH, e 40% (31/78) apresentaram o gene iss. Além disso foram efetuados testes de formação de biofilme em placas de poliestireno, onde, 69% (54/78) não apresentaram formação de biofilme, 15,4% (12/78) apresentaram produção fraca de biofilme, 12,8% (10/78) apresentaram produção moderada de biofilme, e 2,6% (2/78) apresentaram produção forte de biofilme. Esses achados são interessantes uma vez que foram detectados genes de virulência característicos de ExPEC em isolados de origem aviárias MDR, reiterando a relevância da monitorização não apenas da resistência bacteriana, mas também da virulência, como forma de corroborar para uma melhor condição de saúde única.