Avaliação de Klebsiella spp. como potencial reservatório de resistoma bacteriano em ecossistema marinho da região costeira de Niterói/RJ

• Autor(a) principal: Rocha, Sabrina Rodrigues
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/31174
• topic: Klebsiella spp.; ESBL; Resistência aos antibióticos; Ambiente marinho; Klebsiella; Ambiente marinho; Resistência microbiana a medicamentos; Klebsiella spp.; ESBL; Antibiotic resistance; Marine environment

A resistência aos antibióticos é uma questão crítica que se alastra globalmente. Nesse sentido, enterobactérias produtoras de β-lactamases de espectro estendido (ESBL) e produtoras de carbapenemases representam grande ameaça para o tratamento de grande parte das infecções humanas e veterinárias. Entretanto, essa questão se estende além do âmbito da medicina, abrangendo também implicações ecológicas. Nesse contexto, o ambiente marinho desempenha um papel importante como reservatório de microrganismos patogênicos, muitos dos quais apresentam resistência a antibióticos. Dentre estes, o gênero Klebsiella destaca-se como importante membro da família Enterobacteriaceae, sendo reconhecido como um importante patógeno oportunista capaz de causar infecções graves, principalmente em ambientes associados à assistência à saúde. Considerando a importância desses fatores, a presente pesquisa teve como objetivo caracterizar e analisar os perfis de suscetibilidade antimicrobiana de espécies de Klebsiella isoladas de ecossistemas marinhos de Niterói. Amostras de água foram coletadas nas praias de Icaraí (I), Jurujuba (J) e Piratininga (P), juntamente com moluscos bivalves (M) da maricultura de Niterói. O isolamento bacteriano foi realizado em meios de cultura seletivos como ágar Eosina Metileno Azul (EMB) e Agar MacConkey. Colônias presuntivas de Klebsiella spp. foram cuidadosamente selecionadas e sua identificação foi realizada por meio de espectrometria de massa usando MALDI-TOF. Além disso, os meios cromogênicos CHROMagar ESBL e CHROMagar KPC foram utilizados para detecção fenotípica da presença de ESBL e carbapenemases. Por fim, o teste de suscetibilidade a antibióticos (TSA) foi realizado usando o método de difusão em disco de acordo com as diretrizes do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). O teste de sinergismo de disco duplo foi empregado para a confirmação fenotípica da suspeita de bactérias produtoras de ESBL. Reações em cadeia da polimerase (PCR) foram realizadas para detecção genotípica de resistência a β-lactâmicos, tendo como alvo os genes blaCTX-m-1, blaCTX-m-2, blaCTX-m-8 e blaKPC. Como resultado, dos 65 isolados, um total de 56 isolados foram identificados como Klebsiella spp., sendo: 71,4% K. pneumoniae, 10,7% K. aerogenes e os 17,9% restantes classificados como outras espécies, com distribuição; J= 25, P= 8 , I= 11 e M= 12. Quanto ao perfil de suscetibilidade antimicrobiana, foram detectados maiores percentuais de resistência à Ampicilina (69,7%), Cefazolina (26,8%), Cefotaxima (10,7%), Cefoxitina (10,7%). Amostras resistentes a três ou mais β-lactâmicos foram testadas fenotipicamente para suscetibilidade a outros fármacos, com intuito de detectar bactérias multirresistentes (MDR); cinco amostras foram consideradas MDR. A análise genotípica detectou a presença do gene blaCTX-m-8 em duas cepas (IB5.1 e 2MM5.1, com origem em Icaraí e Moluscos) e o gene blaKPC em uma (PE5.6 com origem Piratininga). Os testes fenotípicos confirmatórios detectaram produção de ESBL em quatro cepas (JB12.14, JB12.19, IB5.1, 2MM5.1). Em contrapartida, duas amostras positivas fenotipicamente (JB12.14 e JB12.19 com origem em Jurujuba) não apresentaram nenhum dos genes testados. A presença de isolados resistentes a antibióticos sugere a aquisição e disseminação de genes de resistência neste ambiente aquático. Portanto, esses resultados enfatizam a perspectiva do conceito One Health, que recomenda que os esforços colaborativos das ciências clínicas, veterinárias e ambientais trabalhem para alcançar a saúde ideal para todos