Efeito da lactoferrina no crescimento, adesão, biofilme e sinergismo com antimicrobianos em cepas de Bacteroides fragilis e Bacteroides thetaiotaomicron

• Autor(a) principal: Almeida, Juliana Soares de Sá
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/12703
• topic: Bacteroides fragilis; Bacteroides thetaiotaomicron; Lactoferricina; Biofilme; Laminina-1; Lactoferrina; Bacteroides fragilis; Bacteroides thetaiotaomicron; Lactoferrina; Biofilme; Bacteroides fragilis; Bacteroides thetaiotaomicron; Biofilm; Laminin-1; Lactoferrin; Lactoferricin

As espécies Bacteroides fragilis e B. thetaiotaomicron compõem a microbiota humana, a qual é regulada por diversos fatores do hospedeiro, incluindo proteínas com atividades antimicrobianas como a lactoferrina (LF). Essa glicoproteína está presente em diversas secreções e sua principal atividade é quelar íons de ferro. Quando atinge o trato digestivo a LF é digerida por pepsinas gástricas gerando um peptídeo bactericida denominado lactoferricina. Este estudo teve como objetivo avaliar alterações no crescimento das espécies B. fragilis e B. thetaiotaomicron, na presença de apo e holo-lactoferrina e lactoferricina em meio semi-definido para Bacteroides spp. suplementado com diferentes fontes de ferro; a influência da LF na adesão bacteriana à laminina-1; o efeito da LF sobre a formação do biofilme e o efeito sinérgico ou antagônico da associação de LF com os antimicrobianos cefoxitina e cloranfenicol. As cepas foram cultivadas anaerobicamente em caldo Brucella ou brain heart infusion e incubadas por 24 horas a 37 ºC. Todos os experimentos foram realizados em câmara de anaerobiose (80% N2, 10% CO2 e 10% H2). O crescimento das espécies B. fragilis e B. thetaiotaomicron foi avaliado em ensaios de microdiluição em caldo, na presença de apo e holo-lactoferrina e lactoferricina. Os ensaios de adesão à laminina-1 foram realizados em lamínulas depositadas em placas de polietileno, visualizadas através de microscopia de fluorescência e quantificadas pelo software Image J. A formação do biofilme foi avaliada em ensaios de microdiluição em placas. A avaliação do sinergismo entre apo e holo-lactoferrina e os antimicrobianos foi realizada através de microdiluição em caldo. O crescimento bacteriano não foi inibido pela presença da apo, holo-lactoferrina e lactoferricina. A LF inibiu a adesão de B. fragilis à laminina-1. A capacidade de formação de biofilme foi fortemente inibida na presença de LF e não houve sinergismo ou antagonismo entre a associação da LF com os antimicrobianos. A atividade biológica da LF sobre as espécies analisadas parece estar restrita aos mecanismos de adesão bacteriana