Aspecto sanitário e potencial alergênico de helmintos parasitos de peixes teleósteos marinhos do estado do Rio de Janeiro, Brasil
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Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) |
Texto Completo: | http://app.uff.br/riuff/handle/1/28764 |
Resumo: | O consumo de peixes parasitados pode representar um sério risco à Saúde Pública. Os cestóides Pterobothrium crassicolle e Pterobothrium heteracanthum (Trypanorhyncha: Pterobothriidae) são parasitos comumente encontrados em peixes teleósteos marinhos da América do Sul. Seu plerocerco pode se desenvolver nas vísceras e musculatura destes animais, conferindo aspecto repugnante quando em grande quantidade. Atualmente, algumas moléculas de parasitos de peixes têm sido implicadas no desenvolvimento de diversas manifestações clínicas em seres humanos, incluindo graus variados de alergias, que vão desde uma reação localizada até a anafilaxia. Entretanto, o potencial alergênico de extratos de Pterobotrídeos ainda não é conhecido, sendo assim, o objetivo deste estudo foi analisar o parasitismo em peixes teleósteos marinhos do Estado do Rio de Janeiro por helmintos zoonóticos e em seguida determinar o potencial alergênico de componentes presentes no extrato bruto (EB) de plerocercos e blastocistos de P. crassicolle e P. heteracanthum. Para este propósito, dois protocolos experimentais foram realizados. No primeiro, 18 camundongos fêmeas BALB/c foram separadas em 3 grupos que receberam 10 µg, 50 µg ou 100 µg de EB de P. heteracanthum, por via intraperitoneal (i.p.), nos dias 1 e 35. No segundo protocolo, 14 camundongos BALB/c do sexo feminino foram separados em dois grupos recebendo 50 µg de EB de plerocercos ou blastocistos de P. crassicolle, i.p., nos dias 1, 35 e 120. Em paralelo, grupos controle (animais não sensibilizados) foram instituídos para ambos os experimentos. Amostras de sangue foram coletadas pelo plexo retro-orbital antes da primeira imunização e repetidas nos dias 14, 35, 42, 49 e 56, para ambos osprotocolos, e também dias nos 120, 127 e 135 no segundo experimento. Os níveis séricos de IgG e IgE específicas foram testados por ELISA. A atividade biológica da IgE específica produzida nos animais foi avaliada pelo ensaio de anafilaxia cutânea passiva (ACP) em 6 ratos Lou-M/Tor do sexo masculino, desafiados com os EB parasitários ou extrato de bruto de musculatura de Micropogonias furnieri como controle. O perfil proteico e a imunorreatividade dos extratos foram analisados por SDS-PAGE e Western blot, respectivamente. Os animais imunizados com EB de P. heteracanthum e P. crassicolle apresentaram produção de IgG e IgE específicas logo após a primeira imunização, e a partir da segunda semana a maior parte das titulações já era estatisticamente distinta do grupo controle. A elevada concentração de IgE específica em algumas amostras induziu fortes reações de ACP na pele de ratos desafiados com EB de P. crassicolle, mostrando biologicamente a atividade alergênica do extrato. Perfis proteicos distintos entre os extratos, assim como as áreas de reconhecimento específico, foram observados por SDS-PAGE e Western blot. Os resultados obtidos mostraram que os EBs de P. crassicolle e P. heteracanthum apresentam moléculas capazes de induzir a produção de IgG e IgE específicas, apresentando assim atividade alergênica em modelos murinos. |
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Entretanto, o potencial alergênico de extratos de Pterobotrídeos ainda não é conhecido, sendo assim, o objetivo deste estudo foi analisar o parasitismo em peixes teleósteos marinhos do Estado do Rio de Janeiro por helmintos zoonóticos e em seguida determinar o potencial alergênico de componentes presentes no extrato bruto (EB) de plerocercos e blastocistos de P. crassicolle e P. heteracanthum. Para este propósito, dois protocolos experimentais foram realizados. No primeiro, 18 camundongos fêmeas BALB/c foram separadas em 3 grupos que receberam 10 µg, 50 µg ou 100 µg de EB de P. heteracanthum, por via intraperitoneal (i.p.), nos dias 1 e 35. No segundo protocolo, 14 camundongos BALB/c do sexo feminino foram separados em dois grupos recebendo 50 µg de EB de plerocercos ou blastocistos de P. crassicolle, i.p., nos dias 1, 35 e 120. Em paralelo, grupos controle (animais não sensibilizados) foram instituídos para ambos os experimentos. Amostras de sangue foram coletadas pelo plexo retro-orbital antes da primeira imunização e repetidas nos dias 14, 35, 42, 49 e 56, para ambos osprotocolos, e também dias nos 120, 127 e 135 no segundo experimento. Os níveis séricos de IgG e IgE específicas foram testados por ELISA. A atividade biológica da IgE específica produzida nos animais foi avaliada pelo ensaio de anafilaxia cutânea passiva (ACP) em 6 ratos Lou-M/Tor do sexo masculino, desafiados com os EB parasitários ou extrato de bruto de musculatura de Micropogonias furnieri como controle. O perfil proteico e a imunorreatividade dos extratos foram analisados por SDS-PAGE e Western blot, respectivamente. Os animais imunizados com EB de P. heteracanthum e P. crassicolle apresentaram produção de IgG e IgE específicas logo após a primeira imunização, e a partir da segunda semana a maior parte das titulações já era estatisticamente distinta do grupo controle. A elevada concentração de IgE específica em algumas amostras induziu fortes reações de ACP na pele de ratos desafiados com EB de P. crassicolle, mostrando biologicamente a atividade alergênica do extrato. Perfis proteicos distintos entre os extratos, assim como as áreas de reconhecimento específico, foram observados por SDS-PAGE e Western blot. Os resultados obtidos mostraram que os EBs de P. crassicolle e P. heteracanthum apresentam moléculas capazes de induzir a produção de IgG e IgE específicas, apresentando assim atividade alergênica em modelos murinos.Consumption of parasitized fish may represent a serious public-health hazard. The cestodes Pterobothrium crassicolle and Pterobothrium heteracanthum (Trypanorhyncha: Pterobothriidae) are parasites commonly found in marine teleost fish of South America. Their plerocerci can develop in organs and muscles of these animals, giving nasty looks when aplenty. Currently, few molecules of fish parasites have been involved in the development of various clinical manifestations in humans, including varying degrees of allergies, since a localized reaction to anaphylaxis. However, the allergenic potential of Pterobothriids’ extracts is still unknow. The aim of this study was to analyze the parasitism in marine fish of Rio de Janeiro State by zoonotic helminths and then determine the allergenic potential of components present in the crude extract (CE) of P. crassicolle and P. heteracanthum plerocerci and blastocysts. For this purpose, two experimental protocols were carried out. At first, 18 female BALB/c mice were separated into three groups and received 10 g, 50 g or 100 g of P. heteracanthum’s CE intraperitoneally (ip) on days 1 and 35. In the second protocol, 14 BALB/c females were separated into two groups receiving 50 g of CE of plerocerci or blastocysts of P. crassicolle, i.p., on days 1, 35 and 120. In parallel, control groups (non-sensitized animals) were established for both experiments. Blood samples were collected by retro-orbital plexus prior to the first immunization and again on days 14, 35, 42, 49 and 56, for both protocols, and also on days 120, 127 and 135 in the second. Serum titers of IgG and IgE were assayed by ELISA. The biological activity of specific IgE produced in the experimental animals was tested by passive cutaneous anaphylaxis (PCA) in 6 male Lou-M/Tor rats challenged with CE of both parasites or by fish extract prepeared with flesh of Micropogonias furnieri as control. The protein profile and sites of immunoreactivity were analyzed by SDS-PAGE and Western blot, respectively. Animals immunized with CE of P. heteracanthum and P. crassicolle showed production of specific IgE and IgG after the first immunization, and passed the second week, most titrations were statistically different from the control group. High concentration of specific IgE in some samples induced strong reactions by PCA assay in rats challenged with CE of P. crassicolle, showing biologically the allergenic activity of this extract. Protein profiles and specific recognition sites were different between extracts, as observed by SDS-PAGE and Western blot respectively. The results show that CE of P. crassicolle and P. heteracanthum present molecules capable of inducing the production of specific IgE and IgG, thus presenting allergenic activity in murine models.96 f.São Clemente, Sérgio Camona dehttp://lattes.cnpq.br/5719321462890654Verícimo, Maurício Afonsohttp://lattes.cnpq.br/3542098570637209Freire, Delir Corrêa Maues da Serrahttp://lattes.cnpq.br/0286501196032403Knoff, Marcelohttp://lattes.cnpq.br/0947649134691016Barros, Luciano Antuneshttp://lattes.cnpq.br/8336187135982826Lopes, Leila Maria da Silvahttp://lattes.cnpq.br/7194401099183884http://lattes.cnpq.br/8373835267965491Mattos, Danuza Pinheiro Bastos Garcia de2023-05-11T17:07:54Z2023-05-11T17:07:54Z2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfMATTOS, Danuza Pinheiro Bastos Garcia de. Aspecto sanitário e potencial alergênico de helmintos parasitos de peixes teleósteos marinhos do estado do Rio de Janeiro, Brasil. 2012. 96 f. 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