Avaliação da eficácia do coproseco no diagnóstico da amebíase através de método morfológico (exame parasitológico de fezes) e molecular (multiplex-PCR)

• Autor(a) principal: Garcia, Mariana Coimbra
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/5197
• topic: Amebíase; Multiplex-PCR; Diagnóstico laboratorial; Amebíase; Técnicas de laboratório clínico; Amebiasis; Laboratory diagnosis; Multiplex-PCR

Os parasitos intestinais são importantes causadores de inúmeros prejuízos à saúde humana, estando relacionados principalmente às baixas condições sanitárias e higiênicas da população afetada. A amebíase é uma infecção causada por Entamoeba histolytica. Entretanto, a diferenciação entre Entamoeba histolytica e a Entamoeba dispar, espécies morfologicamente idênticas, é fundamental para a conduta terapêutica, prevenção da doença invasiva e para a saúde pública. O método que tem sido mais utilizado na rotina laboratorial é o exame parasitológico de fezes (EPF), que tem sua importância na demonstração dos parasitos por microscopia. Para elevar sua sensibilidade, foi lançado no mercado o Coproseco® (CM Medical Comercial Hospitalar Ltda), frasco coletor contendo formalina seca, que permite e garante tanto a aplicação de várias técnicas na mesma amostra como a boa conservação desta. Para o diagnóstico da amebíase o EPF continua sendo um método amplamente utilizado. Nesse método, a distinção entre E. histolytica e E. dispar só é possível quando trofozoítas hematófagos são observados, identificando assim a forma patogênica do complexo, E. histolytica. No entanto, para que tenha elevada sensibilidade, é necessário coleta e conservação adequada da amostra. Este trabalho teve como objetivos: (1) avaliar a eficácia do coletor fecal Coproseco® no diagnóstico da amebíase, comparando a eficácia deste coletor na conservação da morfologia de cistos das amebas do complexo E.histolytica/E. dispar em material fecal mantido nele durante 2, 5, 10, 20 e 30 dias; e (2) realizar a técnica de Multiplex-PCR para a diferenciação das espécies E. histolytica e E. dispar, com a utilização de sedimento obtido após o método de sedimentação espontânea em fezes frescas e conservadas por 2, 5, 10, 20 e 30 dias de pacientes diferentes. Foram avaliados pacientes atendidos no Hospital Universitário Antônio Pedro com pedido médico para exame parasitológico de fezes em amostra fresca, nos anos de 2008 e 2009. Não foi observada boa preservação na morfologia de cistos das amebas do complexo conservadas na formalina seca por mais de 48h. Das cinquenta e oito amostras analisadas pela Multiplex-PCR, 20 foram positivas para E. dispar, ocorrendo duas infecções duplas de E. histolytica/E. dispar. Na Multiplex-PCR, ocorreu amplificação apenas das amostras conservadas por até 10 dias. A preservação das estruturas características dos cistos das amebas do complexo Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar pela formalina seca, conservante presente no Coproseco® é ineficaz e interfere na coloração de hematoxilina férrica, o que dificulta o diagnóstico desta parasitose. Quanto a diferenciação do complexo Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar por Multiplex-PCR, o Coproseco® permite a distinção das espécies somente quando as fezes são conservadas por até 10 dias. Assim, o material conservado no Coproseco® mostrou-se eficaz para o EPF e para posterior análise por Multiplex-PCR somente quando as amostras são mantidas nele por dois dias.