Estudo da atividade das proteases calpaina e metaloprotease no músculo esquelético do camundongo MDX com distrofia muscular de duchenne

• Autor(a) principal: Brito, Rhayanna Gaglianone de
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/13975
• topic: Calpaína; Metaloprotease; Distrofia muscular de duchenne; Distrofina; Cálcio; Zimografia; Calpaína; Metaloproteinases da matriz associadas à membrana; Metaloproteinase 2 da matriz; Distrofia muscular de duchenne; Cálcio; Calpain; Metalloprotease; Duchenne muscular dystrophy; Dystrophin; Calcium; Zymography

Camundongo mdx é o modelo murino com fenótipo benigno da distrofia muscular de Duchenne (DMD), uma distrofinopatia genética fatal em humanos. O camundongo mdx apresenta mutação pontual no exon 23 no gene da distrofina determinando uma substituição das bases C para T na sequência do DNA gerando um codon de parada prematuro e uma proteína truncada com 27% do tamanho original que não se expressa. O camundongo mdx apresenta eficiente regeneração muscular. A isoforma 427-kDa da distrofina é uma proteína estrutural que se liga à actina e ao complexo de glicoproteínas transmembrana. A ausência ou alteração na expressão da distrofina no músculo esquelético compromete a integridade do sarcolema determinando maior influxo de íons como Ca+2 e efluxo de moléculas intracelulares como a creatina quinase. A perda na homeostase ativa enzimas dependentes de Ca+2 (calpaínas) e a cascata de autoproteólise levando o músculo à necrose e morte celular. Este trabalho teve por objetivo determinar por zimografia a ativação das enzimas calpaína e metaloproteases (MMP) -2, -9 nos músculos gastrocnêmio, solear, braquial, extensor longo dos dedos (EDL) e diafragma nas fases com predomínio de mionecrose (4 semanas) e regeneração muscular (12 semanas). A atividade da MMP-2 ativa somente foi observado nos músculos dos camundongos mdx. O músculo gastrocnêmio do mdx apresentou atividade proteolítica das calpaínas muito elevada, sendo 11,2 vezes (mdx-4 semanas) e 5,4 vezes (mdx-12 semanas) maior que o controle. A atividade da MMP-9 foi observado somente nos músculos do camundongo mdx.. Em conjunto, os resultados indicam que a ausência da distrofina ao gerar instabilidade no sarcolema, altera a homeostasia do cálcio ativando calpaínas que por ter como substrato proteínas do citoesqueleto, ativa a mionecrose (MMP-9) e o remodelamento tecidual (MMP-2; MMP-9).