Estudos preliminares para estabelecimento de protocolo de criopreservação em sementes recalcitrantes

• Autor(a) principal: Leal, Isaias Luis
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFFS (Repositório Digital da UFFS)
• Texto Completo: https://rd.uffs.edu.br/handle/prefix/3763
• topic: Sementes; Congelamento; Criopreservação; Nitrogênio

As sementes recalcitrantes apresentam alto grau de umidade resultando em rápido processo de deterioração com baixa longevidade em ambiente natural e limitada conservação pós-colheita. Sementes com esse comportamento não toleram umidades e temperaturas baixas, que são os principais fatores utilizados pelos métodos convencionais de conservação de sementes, portanto, não são adequados para sementes recalcitrantes. Uma alternativa promissora para a conservação das sementes recalcitrantes é a criopreservação em nitrogênio líquido. Diante disso, o objetivo do trabalho foi estabelecer um protocolo de criopreservação de sementes de Araucaria angustifolia e Campomanesia xanthocarpa. O trabalho foi dividido em oito experimentos: os dois primeiros com sementes de A. angustifolia, do terceiro ao sexto experimento com embriões de A. angustifolia, e o sétimo e o oitavo com sementes de C. xanthocarpa. No experimento I testou-se a aclimatação em ácido abscísico+crioproteção em PVS2 e congelamento em ultrafreezer na viabilidade de sementes pelo teste de tetrazólio e grau de umidade. No experimento II, avaliou-se a aclimatação em ácido abscísico+crioproteção em PVS2 e congelamento em freezer na emergência de sementes e grau de umidade. No experimento III, foi avaliado a imersão direta de embriões em nitrogênio líquido e em freezer. No experimento IV, foi avaliado diferentes períodos de imersão em PVS2 de embriões. No experimento V, verificou-se o efeito da crioproteção em PVS2 sobre o congelamento em freezer e a criopreservação em nitrogênio líquido de embriões. No experimento VI, testou-se a aclimatação de embriões entre papel de germinação umidecido com solução de 2 M glicose+0,4M sacarose em 25, 20, 15 e 10°C 12 horas-1 + criopreservação em nitrogênio líquido. Do experimento III ao VI, avaliou-se o grau de umidade e a viabilidade dos embriões pelo teste de tetrazólio. No experimento VII, testou-se a aclimatação em ácido abscísico+crioproteção em PVS2 no congelamento em freezer e criopreservação em nitrogênio líquido de sementes de C. xanthocarpa. No experimento VIII, testou-se a crioproteção em solução de PVS2 em diferentes períodos de tempo. A aclimatação em ABA+ crioproteção em PVS2 resultou na indicação de embriões viáveis pelo teste de tetrazólio quando estes foram submetidos ao congelamento em ultrafreezer. Porém quando o mesmo tratamento aclimatação em ABA+crioproteção em PVS2 foram submetidos ao congelamento em freezer, houve 100 % de mortalidade na emergência. Infere-se que apesar do resultado promissor no experimento I, não se pode descartar a subjetividade do teste de tetrazólio, conforme o resultado obtido no experimento II. A criopreservação em nitrogênio líquido e o congelamento em ultrafreezer foram letais as sementes e aos embriões de A. angustifolia e para as sementes de C. xanthocarpa. Em excesão ao experimento VI, em que embriões aclimatados em solução de 2M glicose +0,4 M sacorose, indicaram alguns embriões respirando após a criopreservação em nitrogênio líquido, todavia não se pode descartar a subjetividade do teste de tetrazólio. Indica-se novos trabalhos testando a metodologia do experimento VI, e colocando as sementes para serem avaliadas em emergência. Com estas sequências de tratamentos utilizados não foi possível estabelecer um protocolo eficiente de criopreservação para sementes de A. angustifolia e C. xanthocarpa.