Desenvolvimento e validação de método analítico por CLAE-DAD para quantificação da hibalactona isolada das plantas subterrâneas de Hydrocotyle umbellata L. (Araliaceae) e otimização da sua extração por ultrassom

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Oliveira, Matheus Gabriel de
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFG
Texto Completo: http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/9745
Resumo: Hydrocotyle umbellata L., also known as "acariçoba", is an herb of the Araliaceae family native to the American continent. Recently, the antinociceptive, anti-inflammatory and anxiolytic-like effects of the specie were attributed to the lignan hibalactone found in the subterraneous parts of the plant. However, there is a lack of studies regarding its extraction process and analytical methods for its determination.This work aimed to develop and validate an HPLC-PDA analytical method for the determination of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts and to apply experimental design techniques to optimize its ultrasound-assisted extraction (UAE). HPLC analysis were performed on a Waters® e2695 with PDA detector in a reversed-phase chromatography using acetonitrile/methanol/water (10:65:25), flow of 0.8 mL/min, detection at 290 nm and C18 column (250 mm x 4.6 mm, 5 μm). The primary validation parameters were determined according to Brazilian legislation. The optimization of the hibalactone UAE was performed using Box-Behnken desing and Response surface methodology (RSM) to investigate the influence of the following parameters: solid-to-liquid ratio, ethanolic strength and extraction temperature.The HPLC method proved to be selective, linear, precise, accurate and robust, being useful for the analysis of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts extracts. The optimal UAE condition was obtained with solid-to-liquid ratio of 1:5 g/mL, ethanolic strength of 70% (v/v) and temperature of 65 °C. The experimental values of hibalactone content under optimal UAE conditions were in good agreement with the RSM predicted values. In this study, it was possible to develop and validate HPLC analytical method for the determination of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts and to determine its optimal UAE conditions for application in quality control and standardization of raw materials of the specie.
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Recently, the antinociceptive, anti-inflammatory and anxiolytic-like effects of the specie were attributed to the lignan hibalactone found in the subterraneous parts of the plant. However, there is a lack of studies regarding its extraction process and analytical methods for its determination.This work aimed to develop and validate an HPLC-PDA analytical method for the determination of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts and to apply experimental design techniques to optimize its ultrasound-assisted extraction (UAE). HPLC analysis were performed on a Waters® e2695 with PDA detector in a reversed-phase chromatography using acetonitrile/methanol/water (10:65:25), flow of 0.8 mL/min, detection at 290 nm and C18 column (250 mm x 4.6 mm, 5 μm). The primary validation parameters were determined according to Brazilian legislation. The optimization of the hibalactone UAE was performed using Box-Behnken desing and Response surface methodology (RSM) to investigate the influence of the following parameters: solid-to-liquid ratio, ethanolic strength and extraction temperature.The HPLC method proved to be selective, linear, precise, accurate and robust, being useful for the analysis of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts extracts. The optimal UAE condition was obtained with solid-to-liquid ratio of 1:5 g/mL, ethanolic strength of 70% (v/v) and temperature of 65 °C. The experimental values of hibalactone content under optimal UAE conditions were in good agreement with the RSM predicted values. In this study, it was possible to develop and validate HPLC analytical method for the determination of hibalactone in H. umbellata subterraneous parts and to determine its optimal UAE conditions for application in quality control and standardization of raw materials of the specie.Hydrocotyle umbellata L., conhecida popularmente como "acariçoba", é uma erva da família Araliaceae nativa do continente Americano. Em estudos recentes, as atividades antinociceptiva, anti-inflamatória e ansiolítica da acariçoba foram atribuídas a presença da lignana hibalactona nas partes subterrâneas da planta. Contudo, há uma escassez de estudos relacionados ao seu processo de extração e métodos analíticos para sua quantificação. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método analítico para quantificação da hibalactona nas partes subterrâneas de H. umbellata por CLAE-DAD e aplicar técnicas de planejamento fatorial para otimizar a extração desse composto por ultrassom. O método de quantificação por CLAE foi desenvolvido em um cromatógrafo Waters® e2695 com fase estacionária C18 Zorbax (250 mm x 4,6 mm, 5 μm), fase móvel constituída de acetonitrila: metanol: água (10:65:25), vazão de 0,8 mL/min e comprimento de onda de 290 nm. O método proposto foi validado conforme regulamentação da RDC n° 899/2003 da ANVISA. A extração por ultrassom foi investigada utilizando Planejamento Box-Behnken associado a metodologia de superfície de resposta (MSR), para avaliação dos fatores: proporção sólido-líquido, graduação alcoólica e temperatura. O método de CLAE demonstrou seletividade, linearidade, repetibilidade, exatidão e robustez para a quantificação da hibalactona. As condições ótimas encontradas para extração da hibalactona foram: proporção sólido-líquido de 1:5 g/mL, graduação alcoólica de 70% (v/v) e temperatura de 65 °C. Os valores experimentais apresentaram boa concordância com os valores preditos, demonstrando a adequabilidade do modelo de MSR obtido na otimização da extração da hibalactona de H. umbellata. Através deste estudo foi possível desenvolver e validar método de CLAE para quantificação da hibalactona nas partes subterrâneas de H. umbellata e determinar suas condições ótimas de extração pela técnica de ultrassom para a amostra estudada, contribuindo, portanto, para o controle de qualidade e padronização de produtos derivados da espécie.Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2019-06-25T18:53:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Matheus Gabriel de Oliveira -2018.pdf: 1669898 bytes, checksum: ef9c69a4a6d87987739a28f43dbd36f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2019-06-27T12:55:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Matheus Gabriel de Oliveira -2018.pdf: 1669898 bytes, checksum: ef9c69a4a6d87987739a28f43dbd36f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Made available in DSpace on 2019-06-27T12:55:06Z (GMT). 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(Araliaceae) subterraneous parts and its ultrasound-assisted extraction optimizationinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis824936988196152412600600600600601028116152420937569976364134497549962075167498588264571reponame:Repositório Institucional da UFGinstname:Universidade Federal de Goiás (UFG)instacron:UFGLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82165http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/ce03fee1-1cba-471a-a8b0-6d47db357eee/downloadbd3efa91386c1718a7f26a329fdcb468MD51CC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/74c7f9a4-be4d-4944-8c15-58770d85f423/download4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52license_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/935b0130-9b37-4586-a278-8ba17ec29640/downloadd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53license_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/edb52f91-8308-4c97-80f9-b38e9d7148dd/downloadd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54ORIGINALDissertação - Matheus Gabriel de Oliveira -2018.pdfDissertação - Matheus Gabriel de Oliveira -2018.pdfapplication/pdf1669898http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/b7903b0f-9134-4e0f-b667-8bea2bf8afb2/downloadef9c69a4a6d87987739a28f43dbd36f2MD55tede/97452019-06-27 09:55:06.326http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Acesso Abertoopen.accessoai:repositorio.bc.ufg.br:tede/9745http://repositorio.bc.ufg.br/tedeRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.bc.ufg.br/oai/requesttasesdissertacoes.bc@ufg.bropendoar:2019-06-27T12:55:06Repositório Institucional da UFG - Universidade Federal de Goiás (UFG)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