Aplicação do planejamento Box-Behnken na otimização de método de extração de flavonoides usando extração acelerada com solventes (ASE) e quantificação de marcadores químicos por CLAE-DAD-UV em espécies do gênero Passiflora

• Autor(a) principal: Gomes, Silvana Vieira Floresta
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFBA
• Texto Completo: http://repositorio.ufba.br/ri/handle/ri/16138
• topic: Box-Behnken; Extração acelerada; Flavonoides; Passiflora; CLAE-DAD; Box-Behnken; Accelerated extraction; Flavonoids; Passiflora; HPLC-DAD

O presente trabalho descreve a aplicação de planejamento Box-Behnken para otimização de método de extração de flavonoides, usando extração acelerada com solventes (ASE), e o desenvolvimento e validação de um método analítico por CLAE com detecção por arranjo de diodos (DAD), para a quantificação dos principais marcadores químicos nas folhas de Passiflora alata, P. capsularis, P. cincinnata, P. edulis f. flavicarpa, P. edulis f. edulis, P. galbana, P. gibertii, P. maliformis, P. malacophylla, P. morifolia, P. mucronata, P. quadrangularis, P. racemosa, P. setacea, P. suberosa, P. tenuifila e P. vitifolia, cultivadas na Embrapa Mandioca e Fruticultura, Cruz das Almas-BA. A otimização do método de extração no extrator acelerado com solventes (ASE) foi realizada através de um planejamento Box- Behnken de três fatores, proporção da solução hidroetanólica (%), temperatura e nº de ciclos e três níveis experimentais (+1, 0, -1), com o objetivo de se obter as melhores condições para a determinação do teor de fenólicos totais, flavonoides totais e rendimento (%), avaliando simultaneamente as respostas processadas. As condições otimizadas foram a proporção hidroetanólica 64% (v/v), 80 ºC e 5 ciclos de extração. Um método analítico de perfil cromatográfico foi desenvolvido e validado, utilizando CLAE-DAD, para a análise dos extratos hidroetanólico 64% (v/v) das folhas de espécies de Passiflora estudadas. Os perfis cromatográficos das espécies de Passiflora demonstraram ser bastante diferentes entre si, o que possibilitará a sua aplicação no controle de qualidade químico, na identificação e determinação da autenticidade de fitoterápicos produzidos a partir de diferentes espécies de Passiflora de nossa flora. O método cromatográfico validado foi aplicado na quantificação dos flavonoides C-glicosilados, orientina, isoorientina, vitexina, isovitexina e rutina nas diferentes espécies de Passiflora. O teste de atividade antioxidante utilizando a metodologia do radical estável DPPH demonstrou que os extratos de P. capsularis, P. cincinnata, P. edulis f. flavicarpa, P. edulis f. edulis, P. galbana, P. gibertii, P. malacophylla, P. suberosa, P. tenuifila e P. vitifolia possui atividade antioxidante quando comparado ao padrão ácido gálico. No teste de atividade anticolinesterásica, as espécies de Passiflora não apresentaram atividade inibitória da enzima acetilcolinesterase. A atividade citotóxica in vitro utilizando o método de MTT demonstrou que, dos extratos de Passiflora analisados, somente o extrato de P. alata apresentou potencial citotóxico relevante, com percentual de inibição do crescimento tumoral maior que 90%, frente as linhagens de células do ovário – humano, carcinoma do cólon e glioblastoma.