Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2009 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFG |
Texto Completo: | http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1293 |
Resumo: | In Brazil, the snake Crotalus durissus collilineatus is much studied, particularly its component crotoxina. The crotoxina is the most toxic component of venom from the species cascavéis amicanas Crotalus durissus. It is composed of two different subunits, the crotapotina (acid component) and a phospholipase A2 (basic component). The enzyme phospholipase A2 is the most studied of these poisons, being largely responsible for its toxicity. Its main effects are neurotoxicity, myotoxicity, cytotoxicity, platelet aggregation, anti-coagulant and bactericide. This study aims to purify and characterize a new phospholipase A2 isolated from Crotalus durissus collilineatus, and uses it as a model for studies of compounds with potential antinflamatório. Samples (5mg) of crude venom of Crotalus durissus collilineatus were applied on a C18 column coupled to a system semipreparativa HPLC. 20 peaks were obtained for proteins / peptides, and the increased activity of fofolipase (PLA) was detected in fraction 14. This fraction was subjected to a new phase chromatography on C18 analytical column, resulting in the isolation of a new PLA. By electrophoresis, SDS-PAGE the enzyme showed high degree of purity, with molecular mass around 13 kDa. The PLA2 activity showed optimal at pH of 8.2 and at temperatures between 35-40 º C and remains stable up to temperatures of 60 º C. According to our experiments isolated PLA was inhibited Ca2 +, and activity was not changed by Cu2 +. Manaca extract, ellagic acid and quercetin strongly inhibited the PLA, showing that this enzyme has potential for the selection of compounds with potential antiinflammatory. |
id |
UFG-2_bd6093b2ccf647313f8eb57bfed94c80 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1293 |
network_acronym_str |
UFG-2 |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFG |
repository_id_str |
|
spelling |
ULHOA, Cirano Josehttp://lattes.cnpq.br/8368469162867277http://lattes.cnpq.br/3100860130954334SANTANA, Pedro Henrique Camargo2014-07-29T15:16:37Z2010-08-192009-06-29SANTANA, Pedro Henrique Camargo. Purification and characterization of a phospholipase A2 from the venom of Crotalus durissus yellow collilinetaus. 2009. 59 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biolóicas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009.http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1293In Brazil, the snake Crotalus durissus collilineatus is much studied, particularly its component crotoxina. The crotoxina is the most toxic component of venom from the species cascavéis amicanas Crotalus durissus. It is composed of two different subunits, the crotapotina (acid component) and a phospholipase A2 (basic component). The enzyme phospholipase A2 is the most studied of these poisons, being largely responsible for its toxicity. Its main effects are neurotoxicity, myotoxicity, cytotoxicity, platelet aggregation, anti-coagulant and bactericide. This study aims to purify and characterize a new phospholipase A2 isolated from Crotalus durissus collilineatus, and uses it as a model for studies of compounds with potential antinflamatório. Samples (5mg) of crude venom of Crotalus durissus collilineatus were applied on a C18 column coupled to a system semipreparativa HPLC. 20 peaks were obtained for proteins / peptides, and the increased activity of fofolipase (PLA) was detected in fraction 14. This fraction was subjected to a new phase chromatography on C18 analytical column, resulting in the isolation of a new PLA. By electrophoresis, SDS-PAGE the enzyme showed high degree of purity, with molecular mass around 13 kDa. The PLA2 activity showed optimal at pH of 8.2 and at temperatures between 35-40 º C and remains stable up to temperatures of 60 º C. According to our experiments isolated PLA was inhibited Ca2 +, and activity was not changed by Cu2 +. Manaca extract, ellagic acid and quercetin strongly inhibited the PLA, showing that this enzyme has potential for the selection of compounds with potential antiinflammatory.No Brasil, a serpente Crotalus durissus collilineatus é muito estudada, devido a sua importância médica, já que é uma das responsáveis pelo envenenamento crotálico. A crotoxina é o componente mais tóxico do veneno das cascavéis sulamericanas da espécie Crotalus durissus. É composta por duas diferentes subunidades, a crotapotina (componente ácido) e uma fosfolipase A2 (componente básico). As fosfolipases A2 é a enzima mais estudada destes venenos, sendo a maior responsável por sua toxicidade. Dentre seus principais efeitos estão os efeitos neurotóxico, miotóxico, citotóxico, agregação plaquetária, anti-coagulante e bactericída. Este estudo tem como objetivo caracterizar uma nova fosfolipase A2 isolada de Crotalus durissus collilineatus, e utilizá-la como modelo para estudos de compostos com potencial antinflamatório. Amostras do veneno bruto de Crotalus durissus collilineatus foram aplicados em uma coluna C18 semipreparativa acoplada a um sistema HPLC. Foram obtidas 20 picos de proteínas/peptídios, sendo que a maior atividade de fofolipase (PLA) foi detectada na fração 14. Esta fração foi submetida a uma nova etapa cromatográfica, em coluna C18 analítica, resultando no isolamento de uma nova PLA. Através de eletroforese, SDS-PAGE a enzima apresentou alto grau de pureza, com massa molecular em torno de 13 kDa. A PLA2 apresentou atividade ótima em pH de 8,2 e temperatura entre 35-40 ºC, e se mantendo estável em temperaturas de até 60 ºC. De acordo com nossos experimentos a PLA isolada foi inibida Ca2+, e a atividade não foi alterada por Cu2+. Extrato de manacá, ácido elágico e quercetina inibiram fortemente a PLA, mostrando que esta enzima tem potencial para a seleção de compostos com potencial antiinflamatório.Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdf: 952650 bytes, checksum: 7afd49b434f553dda644f41af93f0152 (MD5) Previous issue date: 2009-06-29application/pdfhttp://repositorio.bc.ufg.br/TEDE/retrieve/4047/pedro%20henrique%28parte_2%29_Recorrigida.pdf.jpgporUniversidade Federal de GoiásMestrado em BiologiaUFGBRCiências BiolóicasToxinaenzimaserpente1.Serpentes - toxinas 2.Serpentes - enzimas 3.Serpentes peçonhentasToxinenzymesnakeCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::ENZIMOLOGIAPurificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetausPurification and characterization of a phospholipase A2 from the venom of Crotalus durissus yellow collilinetausinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFGinstname:Universidade Federal de Goiás (UFG)instacron:UFGORIGINALpedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdfapplication/pdf952650http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/803bd751-8047-456c-ae49-69732750dc37/download7afd49b434f553dda644f41af93f0152MD51TEXTpedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdf.txtpedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdf.txtExtracted Texttext/plain76142http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/cc8f453f-6f42-447a-a988-7f1184ce751c/download9df8b55ce8f9fbc8dece98a0f25f9460MD52THUMBNAILpedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdf.jpgpedro henrique(parte_2)_Recorrigida.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3243http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/6caa659b-9771-4c86-9949-7e20fbfa2d04/downloadb32f0ed53d33be627156f9657b9bed77MD53tde/12932014-07-30 03:10:37.093open.accessoai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1293http://repositorio.bc.ufg.br/tedeRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.bc.ufg.br/oai/requesttasesdissertacoes.bc@ufg.bropendoar:2014-07-30T06:10:37Repositório Institucional da UFG - Universidade Federal de Goiás (UFG)false |
dc.title.por.fl_str_mv |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
dc.title.alternative.eng.fl_str_mv |
Purification and characterization of a phospholipase A2 from the venom of Crotalus durissus yellow collilinetaus |
title |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
spellingShingle |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus SANTANA, Pedro Henrique Camargo Toxina enzima serpente 1.Serpentes - toxinas 2.Serpentes - enzimas 3.Serpentes peçonhentas Toxin enzyme snake CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::ENZIMOLOGIA |
title_short |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
title_full |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
title_fullStr |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
title_full_unstemmed |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
title_sort |
Purificação e caracterização de uma fosfolipase A2 do veneno amarelo de serpentes Crotalus durissus collilinetaus |
author |
SANTANA, Pedro Henrique Camargo |
author_facet |
SANTANA, Pedro Henrique Camargo |
author_role |
author |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
ULHOA, Cirano Jose |
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/8368469162867277 |
dc.contributor.authorLattes.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/3100860130954334 |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
SANTANA, Pedro Henrique Camargo |
contributor_str_mv |
ULHOA, Cirano Jose |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Toxina enzima serpente 1.Serpentes - toxinas 2.Serpentes - enzimas 3.Serpentes peçonhentas |
topic |
Toxina enzima serpente 1.Serpentes - toxinas 2.Serpentes - enzimas 3.Serpentes peçonhentas Toxin enzyme snake CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::ENZIMOLOGIA |
dc.subject.eng.fl_str_mv |
Toxin enzyme snake |
dc.subject.cnpq.fl_str_mv |
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::ENZIMOLOGIA |
description |
In Brazil, the snake Crotalus durissus collilineatus is much studied, particularly its component crotoxina. The crotoxina is the most toxic component of venom from the species cascavéis amicanas Crotalus durissus. It is composed of two different subunits, the crotapotina (acid component) and a phospholipase A2 (basic component). The enzyme phospholipase A2 is the most studied of these poisons, being largely responsible for its toxicity. Its main effects are neurotoxicity, myotoxicity, cytotoxicity, platelet aggregation, anti-coagulant and bactericide. This study aims to purify and characterize a new phospholipase A2 isolated from Crotalus durissus collilineatus, and uses it as a model for studies of compounds with potential antinflamatório. Samples (5mg) of crude venom of Crotalus durissus collilineatus were applied on a C18 column coupled to a system semipreparativa HPLC. 20 peaks were obtained for proteins / peptides, and the increased activity of fofolipase (PLA) was detected in fraction 14. This fraction was subjected to a new phase chromatography on C18 analytical column, resulting in the isolation of a new PLA. By electrophoresis, SDS-PAGE the enzyme showed high degree of purity, with molecular mass around 13 kDa. The PLA2 activity showed optimal at pH of 8.2 and at temperatures between 35-40 º C and remains stable up to temperatures of 60 º C. According to our experiments isolated PLA was inhibited Ca2 +, and activity was not changed by Cu2 +. Manaca extract, ellagic acid and quercetin strongly inhibited the PLA, showing that this enzyme has potential for the selection of compounds with potential antiinflammatory. |
publishDate |
2009 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2009-06-29 |
dc.date.available.fl_str_mv |
2010-08-19 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2014-07-29T15:16:37Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/masterThesis |
format |
masterThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
SANTANA, Pedro Henrique Camargo. Purification and characterization of a phospholipase A2 from the venom of Crotalus durissus yellow collilinetaus. 2009. 59 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biolóicas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1293 |
identifier_str_mv |
SANTANA, Pedro Henrique Camargo. Purification and characterization of a phospholipase A2 from the venom of Crotalus durissus yellow collilinetaus. 2009. 59 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biolóicas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009. |
url |
http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1293 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Goiás |
dc.publisher.program.fl_str_mv |
Mestrado em Biologia |
dc.publisher.initials.fl_str_mv |
UFG |
dc.publisher.country.fl_str_mv |
BR |
dc.publisher.department.fl_str_mv |
Ciências Biolóicas |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Goiás |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFG instname:Universidade Federal de Goiás (UFG) instacron:UFG |
instname_str |
Universidade Federal de Goiás (UFG) |
instacron_str |
UFG |
institution |
UFG |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFG |
collection |
Repositório Institucional da UFG |
bitstream.url.fl_str_mv |
http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/803bd751-8047-456c-ae49-69732750dc37/download http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/cc8f453f-6f42-447a-a988-7f1184ce751c/download http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/6caa659b-9771-4c86-9949-7e20fbfa2d04/download |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
7afd49b434f553dda644f41af93f0152 9df8b55ce8f9fbc8dece98a0f25f9460 b32f0ed53d33be627156f9657b9bed77 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFG - Universidade Federal de Goiás (UFG) |
repository.mail.fl_str_mv |
tasesdissertacoes.bc@ufg.br |
_version_ |
1798044386167095296 |