Germinação, organogênese e multiplicação in vitro de Campomanesia adamantium (Myrtaceae)
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Data de Publicação: | 2015 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Resumo: | O desenvolvimento de técnicas eficientes de propagação assexuada da guavira (Campomanesia adamantium) é de fundamental importância para a conservação da espécie, considerando as limitações encontradas na propagação seminífera, impostas pela recalcitrância e perda de poder germinativo das sementes. Neste sentido, técnicas de cultivo in vitro, poderão contribuir para a produção de mudas. Com o intuito de desenvolver protocolos para o cultivo in vitro da espécie, este trabalho foi realizado em três etapas. Inicialmente avaliou-se a germinação in vitro, de sementes provenientes de diferentes locais de coleta dos frutos, condições de armazenamento das sementes e temperatura, bem como, a inoculação em meio de cultivo MS, acrescido de diferentes concentrações de ácido giberélico (GA3). Na segunda etapa avaliou-se a capacidade organogênica in vitro, a partir de explantes foliares, radiculares e internodais e o efeito dos reguladores de crescimento, TDZ e ANA. Na terceira etapa avaliou-se a capacidade de multiplicação in vitro, utilizando como fonte de explantes plântulas obtidas de sementes germinadas in vitro e submetida a diferentes tratamentos com TDZ, ANA, BAP e 2iP. De acordo com os dados obtidos nos diferentes experimentos, concluiu-se que em sementes de guavira inoculadas em meio de cultivo logo após a colheita dos frutos, o uso de GA3 promove um aumento de 10% do percentual de germinação, sendo o uso de 1,0 mg L-1 suficiente para promover 100% de germinação. O comprimento da parte aérea aumenta linearmente com o aumento da concentração de GA3, porém não exerce efeito sobre o desenvolvimento da raiz principal e folhas. Sementes adquiridas de frutos oriundos de feira livre apresentam um percentual de germinação inferior ao das sementes inoculadas logo após a colheita dos frutos e não diferem quanto ao percentual de germinação sob os diferentes tratamentos com GA3. A germinação é inviável em sementes de guavira armazenadas em diferentes temperaturas (4ºC e -20ºC) e em diferentes locais (refrigerador e freezer) por 60 dias, não sendo possível a conservação das sementes nestas condições. Por sua vez, o armazenamento em temperatura ambiente (±25ºC), causa a germinação precoce. Quanto à capacidade organogênica, concluiu-se que explantes internodais são mais responsivos para a formação de calos (84%), quando comparados aos explantes foliares (69%) e radiculares (42,7%). Explantes internodais não apresentam oxidação, sendo esta variável observada em maior intensidade em explantes foliares (41%), seguido de 14,7% em explantes radiculares. Para a multiplicação in vitro, os resultados obtidos demonstraram que o uso de 5,0 μM de TDZ aumenta o comprimento das brotações, o número de gemas e a taxa de multiplicação, enquanto a combinação de TDZ e ANA exerce um efeito negativo sobre o crescimento das brotações, o número de folhas e a taxa de multiplicação. O cultivo dos explantes em meio contendo BAP aumenta o número de brotações, proporcionalmente ao aumento da concentração do regulador de crescimento, porém, no sentido inverso reduz o comprimento das brotações. Explantes cultivados em meio contendo 2iP, para as variáveis analisadas, não apresentaram diferenças significativas entre as concentrações testadas. |
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Neste sentido, técnicas de cultivo in vitro, poderão contribuir para a produção de mudas. Com o intuito de desenvolver protocolos para o cultivo in vitro da espécie, este trabalho foi realizado em três etapas. Inicialmente avaliou-se a germinação in vitro, de sementes provenientes de diferentes locais de coleta dos frutos, condições de armazenamento das sementes e temperatura, bem como, a inoculação em meio de cultivo MS, acrescido de diferentes concentrações de ácido giberélico (GA3). Na segunda etapa avaliou-se a capacidade organogênica in vitro, a partir de explantes foliares, radiculares e internodais e o efeito dos reguladores de crescimento, TDZ e ANA. Na terceira etapa avaliou-se a capacidade de multiplicação in vitro, utilizando como fonte de explantes plântulas obtidas de sementes germinadas in vitro e submetida a diferentes tratamentos com TDZ, ANA, BAP e 2iP. De acordo com os dados obtidos nos diferentes experimentos, concluiu-se que em sementes de guavira inoculadas em meio de cultivo logo após a colheita dos frutos, o uso de GA3 promove um aumento de 10% do percentual de germinação, sendo o uso de 1,0 mg L-1 suficiente para promover 100% de germinação. O comprimento da parte aérea aumenta linearmente com o aumento da concentração de GA3, porém não exerce efeito sobre o desenvolvimento da raiz principal e folhas. Sementes adquiridas de frutos oriundos de feira livre apresentam um percentual de germinação inferior ao das sementes inoculadas logo após a colheita dos frutos e não diferem quanto ao percentual de germinação sob os diferentes tratamentos com GA3. A germinação é inviável em sementes de guavira armazenadas em diferentes temperaturas (4ºC e -20ºC) e em diferentes locais (refrigerador e freezer) por 60 dias, não sendo possível a conservação das sementes nestas condições. Por sua vez, o armazenamento em temperatura ambiente (±25ºC), causa a germinação precoce. Quanto à capacidade organogênica, concluiu-se que explantes internodais são mais responsivos para a formação de calos (84%), quando comparados aos explantes foliares (69%) e radiculares (42,7%). Explantes internodais não apresentam oxidação, sendo esta variável observada em maior intensidade em explantes foliares (41%), seguido de 14,7% em explantes radiculares. Para a multiplicação in vitro, os resultados obtidos demonstraram que o uso de 5,0 μM de TDZ aumenta o comprimento das brotações, o número de gemas e a taxa de multiplicação, enquanto a combinação de TDZ e ANA exerce um efeito negativo sobre o crescimento das brotações, o número de folhas e a taxa de multiplicação. O cultivo dos explantes em meio contendo BAP aumenta o número de brotações, proporcionalmente ao aumento da concentração do regulador de crescimento, porém, no sentido inverso reduz o comprimento das brotações. Explantes cultivados em meio contendo 2iP, para as variáveis analisadas, não apresentaram diferenças significativas entre as concentrações testadas.The development of efficient asexual propagation techniques of ‘guavira’ (Campomanesia adamantium) has fundamental importance for the species conservation, considering the limitations found in the seminiferous propagation, imposed by the recalcitrance and loss of seeds germination power. In this sense, in vitro culture techniques may contribute to the production of seedlings. In order to develop protocols for in vitro culture of this species, this work was carried out in three stages. Initially, the in vitro germination was analyzed basing on seeds from different fruits collection sites, storage conditions of seeds and temperature, as well as inoculation in MS medium, supplemented with different concentrations of gibberellic acid (GA3). In the second stage, it was evaluated the in vitro organogenic capacity, from leaf, root and internodal explants and the effect of growth regulators, TDZ and NAA. In the third stage, in vitro multiplication of capacity was evaluated using as a source of explants seedlings obtained from seeds germinated in vitro and subjected to different treatments with TDZ, NAA, BAP and 2iP. According to the data obtained in different experiments, it was concluded that in guavira seed inoculated in culture medium immediately after harvest, the use of GA3 promotes an increase of 10% of the germination percentage, with the use of 1,0 mg L-1 enough to promote 100% germination. The aerial part length increases linearly with increasing concentration of GA3, but has no effect on the development of the primary root and leaves. Seeds acquired from free fair fruits have a germination percentage lower than the inoculated seeds after harvesting the fruit and do not differ as to the percentage of germination under different treatments with GA3. Germination is not feasible in ‘guavira’ seeds stored at different temperatures (4°C and -20°C) and in different places (refrigerator and freezer) for 60 days, being not possible the conservation of seeds in these conditions. In turn, the storage at room temperature (±25°C) causes premature germination. As the organogenic capacity, it was concluded that are more responsive internodal explants for callus formation (84%), when compared to leaf explants (69%) and root explants (42.7%). Intermodal explants do not show corrosion, this variable being observed at greater intensity of leaf explants (41%), followed by 14.7% of root explants. For in vitro mutiplication, the results demonstrated that the use of 5.0 μM TDZ increases the length of shoots, the number of buds and the multiplication rate, while the combination of TDZ and NAA has a negative effect on growth of shoots, number of leaves and the multiplication rate. The explant culture in medium containing BAP increases the number of shoots in proportion to the increased concentration of growth regulator, however, the other way reduces the length of the shoots. Explants cultured in medium containing 2iP, to the variables analyzed, did not show significant differences between the tested concentrations.Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-04-24T21:12:10Z No. of bitstreams: 1 LeandroDarcdaSilva.pdf: 1226911 bytes, checksum: 4eb926791fc53bdcd487b00c98b30a9a (MD5)Made available in DSpace on 2019-04-24T21:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeandroDarcdaSilva.pdf: 1226911 bytes, checksum: 4eb926791fc53bdcd487b00c98b30a9a (MD5) Previous issue date: 2015-08-31Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT)porUniversidade Federal da Grande DouradosPrograma de pós-graduação em Biologia Geral/BioprospecçãoUFGDBrasilFaculdade de Ciências Biológicas e AmbientaisCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALCampomanesia adamantiumGerminaçãoControle de desenvolvimentoCultura in vitroGerminationGrowth controlIn vitro cultureGerminação, organogênese e multiplicação in vitro de Campomanesia adamantium (Myrtaceae)In vitro Germination, organogenesis and multiplication of Campomanesia adamantium (Myrtaceae)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFGDinstname:Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD)instacron:UFGDTEXTLeandroDarcdaSilva.pdf.txtLeandroDarcdaSilva.pdf.txtExtracted texttext/plain130615https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/705/3/LeandroDarcdaSilva.pdf.txt0d799cee508c2b9f8875e04c22b23e62MD53ORIGINALLeandroDarcdaSilva.pdfLeandroDarcdaSilva.pdfapplication/pdf1226911https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/705/1/LeandroDarcdaSilva.pdf4eb926791fc53bdcd487b00c98b30a9aMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/705/2/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD52prefix/7052023-09-14 01:20:35.152oai:https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui: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ório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufgd.edu.br/jspui:8080/oai/requestopendoar:21162023-09-14T05:20:35Repositório Institucional da UFGD - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD)false |
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