Optimization of soybean embryogenic suspension cv. Jack with 606ASA2 promoter using particle bombardment

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Magalhães, Marcelo Murad
Data de Publicação: 1998
Tipo de documento: Tese
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Institucional da UFLA
Texto Completo: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/30361
Resumo: Esta dissertação/tese está disponível online com base na Resolução CEPE nº 090, de 24 de março de 2015, disponível em http://www.biblioteca.ufla.br/wordpress/wp-content/uploads/res090-2015.pdf, que dispõe sobre a disponibilização da coleção retrospectiva de teses e dissertações online no Repositório Institucional da UFLA, sem autorização prévia dos autores. Parágrafo Único. Caberá ao autor ou orientador a solicitação de restrição quanto à divulgação de teses e dissertações com pedidos de patente ou qualquer embargo similar. Art. 5º A obra depositada no RIUFLA que tenha direitos autorais externos à Universidade Federal de Lavras poderá ser removida mediante solicitação por escrito, exclusivamente do autor, encaminhada à Comissão Técnica da Biblioteca Universitária./ Arquivo gerado por meio da digitalização de material impresso. Alguns caracteres podem ter sido reconhecidos erroneamente.
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spelling Optimization of soybean embryogenic suspension cv. Jack with 606ASA2 promoter using particle bombardmentOtimização de suspensão embriogênica de soja cv. Jack com promotor ASA2 utilizando bombardeamento de partículasSojaVetores genéticosEmbriologiaGenética vegetalCiência de AlimentosEsta dissertação/tese está disponível online com base na Resolução CEPE nº 090, de 24 de março de 2015, disponível em http://www.biblioteca.ufla.br/wordpress/wp-content/uploads/res090-2015.pdf, que dispõe sobre a disponibilização da coleção retrospectiva de teses e dissertações online no Repositório Institucional da UFLA, sem autorização prévia dos autores. Parágrafo Único. Caberá ao autor ou orientador a solicitação de restrição quanto à divulgação de teses e dissertações com pedidos de patente ou qualquer embargo similar. Art. 5º A obra depositada no RIUFLA que tenha direitos autorais externos à Universidade Federal de Lavras poderá ser removida mediante solicitação por escrito, exclusivamente do autor, encaminhada à Comissão Técnica da Biblioteca Universitária./ Arquivo gerado por meio da digitalização de material impresso. Alguns caracteres podem ter sido reconhecidos erroneamente.The anthranilate synthase genefroma tobacco suspension culturehasa 606bp fragment in its promoter region that was tusedwith the GUS gene to use in transient expression assays in order to compare the performance of the Hehum PDS/1000 Device and Partícle Inflow Gun (PIG) in soybean embryogenic suspension cultures ofthe cv. Jack. The histochemical and fluorimetric enzymatic assay for GUS activity was carried out in embryos 2 days after bombardment. In most treatments the results from the histochemical and enzymatic assays were similar. The best conditions for the HeliumPDS-1000 were1100psi, 13 cmflying distance,1 mg of gold and 1 ugofDNAper shot. For the PIG 80psi,1 mgofgold and 13 cm target distance were the optimal conditions. The brief sonication of DNA suspension just before shooting increased the transient expression levei. The sodium acetate DNA precipitation methodology was as effective as the CaC^/spermidine method and was quicker. When both guns were compared with their optimal conditions, the HehumPDS-1000 showed higher performance around 25% than the PIG using gold particles. Although the PIG wasless effective than the Helium PDS/1000, it showedre producibihty and is a less expensive option.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)O gene da anthranilase synthase isolado de cultura de suspensão embriogênioca de fumo,tem um fragmento de 606bp na sua região do promotor, que foi ligado ao gene GUS para ser utlizado em ensaio de expressão transiente, e comparar a performance do aparelho de Hého PDS/1000 e Pistola de Influxo de Partícula(PIG) em suspensão embriogênica de soja, cultivar Jack. Os ensaios histoquímicos e fluorimétricos da atividade GUS foram conduzidos 2 dias após bombardeamento. Na maioria dos tratamentos os resultados dos ensaios histoquímico e enzimático apresentaram a mesmatendência. As melhores condições para o aparelho de HéhoPDS-1000 foram 1100 psi, 13 cm de distânciadoalvo, 1mgdeouroe 1 ug deDNAportiro. Para oPIG,80psi,1 mg de de ouro e 13 cm de distância do alvo foram os melhores parâmetros. Uma breve sonicação da suspensão de DNA, justamente antes do bombardeamento aumentou o nível de expressão transiente. A metodologia de precipitação de DNA utilizando-se acetato de sódio foi mais efetiva e rápida que a CaCl2/ espenmidina. Quando as duas pistolas foram comparadas utilizando-se as suas condições otimizadas, o revólver de Hého PDS-1000 mostrou uma performance 25% superior ao PIG, utilizando partículas de ouro. Apesar do PIG ser menos efetivo do que o de HéhoPDS/1000,mostrou boa reproducibilidade e poderia ser uma opção mais barata.Universidade Federal de LavrasPrograma de Doutorado em Ciência dos AlimentosUFLAbrasilDepartamento de Ciência dos AlimentosChitarra, Admilson BoscoAlvarenga, Amauri AlvesAlves, José DonizetiSouza, Itamar Ferreira deWidholm, Jack M.Magalhães, Marcelo Murad2018-09-04T20:56:19Z2018-09-04T20:56:19Z2018-08-161998-02-06info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfMAGALHÃES, M. M. Optimization of soybean embryogenic suspension cv. Jack with 606ASA2 promoter using particle bombardment. 1998. 56 p. Tese (Doutorado em Ciência dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 1998.http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/30361enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLA2018-09-04T20:58:43Zoai:localhost:1/30361Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufla.br/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2018-09-04T20:58:43Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)false
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