Diversidade genética de isolados de Spiroplasma kunkelii e reações em genótipos de milho

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Castanheira, Ana Luiza Monteiro
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFLA
Texto Completo: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/3280
Resumo: Genética e Melhoramento de Plantas
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Esses isolados foram cultivados in vivo, em plantas de milho suscetíveis ao enfezamento pálido, e também foram cultivados in vitro, utilizando-se o meio de cultura LD8A3. Os isolados cultivados in vitro apresentaram crescimento lento, entre 17 e 20 semanas, mas foi possível detectar a presença de espiroplasma nos meios de cultura com um período de 11 semanas utilizando-se a metodologia de Western Blotting. Os isolados mantidos in vivo foram utilizados para a inoculação em quatro linhagens e quatro híbridos de milho. Foi possível observar que plantas infectadas com espiroplasma apresentaram redução significativa no desenvolvimento e na translocação de nutrientes como Mg, Ca, S e Fe da parte aérea das plantas para os grãos. A variabilidade genética dos isolados foi estudada em nível molecular, utilizando-se marcadores AFLP e RFLP. Para a análise de AFLP foram utilizadas 10 combinações de primers e obtidas 448 bandas. No entanto, o polimorfismo observado foi baixo, com apenas 26,6% de bandas polimórficas. Os resultados mostraram que a diversidade genética entre os isolados foi baixa. A diversidade genética dentro das populações foi cerca de oito vezes maior que a diversidade entre populações de isolados. Para a realização da análise por RFLP foi utilizado o gene da espiralina como sonda. Foram utilizadas cinco enzimas de restrição, DraI, HinfI, MseI, XmnI, e BamHI, e não foram observadas diferenças no padrão delas para o gene da espiralina. Este resultado confirma que o gene da espiralina é uma região altamente conservada no genoma do espiroplasma, e não deve ser utilizado como sonda em análises de diversidade genética entre isolados de espiroplasma.The microorganism Spiroplasma kunkelii causes the Corn Stunt Disease. The study of the pathogen and the characterization of its genetic variability is important to stablish a breeding program for resistance. The objectives of this study were to analyze the genetic diversity between geographical strains of S. kunkelii and their reaction in different maize genotypes. The strains were acquired from four brazilian regions: Dourados (MS), Itumbiara (GO), Sete Lagoas (MG) e Uberlândia (MG). The strains were cultivated in vivo, in susceptible maize plants, and also in vitro, using LD8A3 medium. The strains cultivated in vitro showed a slow growth, taking between 17 and 20 weeks, although it was possible to detect spiroplasmas in 11 weeks old media, using the Western Blott technique. The strains cultivated in vivo were used to inoculate four maize lines and for hybrids. Plants infected by spiroplasma showed significant reduction in development and in the translocation of nutrients, such as Mg, Ca, S, and Fe, from the vegetative parts to the grains. The genetic variability was studied at molecular level, using AFLP and RFLP molecular markers. For the AFLP analysis, 10 primers combinations were used and 448 bands were obtained. However, the polymorphism was low, about 26,6%. The results indicated low genetic diversity between strains. The genetic diversity among among the strains was 8-fold higher than between them. For the RFLP analysis a part of the spiralin gene was used as the molecular marker. Five restriction enzymes, DraI, HinfI, MseI, XmnI e BamHI were used.No polymorphism was found with the above restriction enzymes. This result confirms that the spiralin gene is a highly conserved site at spiroplasma genome, and is not a good marker for genetic diversity analysis among spiroplasma strains.UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRASDBI - Programa de Pós-graduaçãoUFLABRASILPaiva, EdilsonSantos, João Bosco dosOliveira, Elizabeth deSouza, Elaine Aparecida deSouza, Isabel Regina Prazeres deCastanheira, Ana Luiza Monteiro2014-08-27T01:32:29Z2014-08-27T01:32:29Z2014-08-262005-09-30info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfCASTANHEIRA, A. L. M. Diversidade genética de isolados de Spiroplasma kunkelii e reações em genótipos de milho. 2005. 150 p. 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