Papel de antígenos contendo repetições de aminoácidos na infecção pelo Trypanosoma cruzi e sua utilização para sorodiagnóstico da doença de Chagas

• Autor(a) principal: Nailma Silva Aprigio dos Santos
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/30914
• topic: Trypanosoma cruzi; Antígenos; Doença de Chagas; resposta imune; Bioquímica; Doença de Chagas; Trypanosoma cruzi; Resposta imune; Antígenos

Proteínas contendo sequências repetitivas de aminoácidos estão presentes de maneira abundante em diferentes protozoários parasitos. Dados da literatura indicam que essas repetições funcionam como mecanismo de evasão do parasito do sistema imune do hospedeiro. Para testar essa hipótese, estamos investigando duas proteínas do T.cruzi: TcL7a e a trans-sialidase. A TcL7a é uma proteína ribossômica, identificada em um Immunoscrenning com soro de pacientes com doença de Chagas e que apresenta homologia com outras proteínas L7a eucariotas. Porém, diferentemente das proteínas L7a de outros eucariotos, a proteína L7a do T. cruzi contém um domínio com repetições dos aminoácidos Ala-Lys-Pro na sua porção Nterminal. A imunização com apenas o motivo repetitivo da TcL7a e posterior desafio com formas tripomastigotas do T.cruzi causou uma exacerbação da parasitemia em comparação com animais não imunizados, sugerindo que as repetições modulam negativamente a resposta imune de forma a favorecer a infecção. A trans-sialidase (TS) também é uma proteína de T. cruzi que contém repetições de aminoácidos e tem como função transferir resíduos de ácido siálico de glicoconjugados do hospedeiro para mucinas na superfície do parasito, um processo relacionado a invasão da célula hospedeira e ao escape do sistema imune. Resultados recentes do nosso grupo indicam que as repetições de 12 aminoácidos presentes na porção C-terminal de alguns membros da família da TS contribuem para a virulência do parasito. Para investigar essa hipótese, versões recombinantes dessa proteína foram geradas: a TS na forma completa, com a deleção da parte repetitiva e somente a porção repetitiva da TS. Todas as proteínas foram expressas em bactéria e a proteína contendo somente as repetições SAPA foi purificada para utilização em experimentos de imunização que serão ainda realizados. Visto que as repetições de diferentes proteínas do T. cruzi são alvos da resposta imune, propomos a utilização de antígenos contendo esses motivos para o desenvolvimento de testes diagnósticos para a doença de Chagas. Com o objetivo de obter um teste mais sensível, essas regiões foram ligadas em nanopartículas de ouro, as quais foram capazes de interagir com os dois antígenos e esse complexo será testado com o soro de pacientes com doença de Chagas.