Uso de uma quimera multiepitópica (rMEPLox) na produção de anticorpos monoclonais contra venenos de aranhas do gênero Loxosceles spp.

• Autor(a) principal: Tamara Gabriela Fernandes Costa
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/50421
• topic: Veneno da aranha Loxosceles; Metaloprotease; Anticorpo monoclonal; Proteína recombinante multiepitópica; Bioquímica e imunologia; Venenos de Aranha; Loxosceles; Metaloprotease; Anticorpos monoclonais; Proteínas recombinantes

O Loxoscelismo é um sério problema de saúde pública na América do Sul. No Brasil três espécies são responsáveis pelos maiores números de casos notificados: Loxoceles intermedia, Loxosceles laeta e Loxoscele gaucho. O tratamento para esses acidentes se baseia na administração de antivenenos produzidos em animais de grande porte através da imunização com o veneno bruto de Loxosceles. Entretanto, existem alguns problemas relacionados à produção de antivenenos como o alto número de animais utilizados e a toxicidade que o veneno causa aos animais produtores. Neste contexto, uma alternativa para melhorar a produção dos antivenenos é o desenvolvimento de anticorpos monoclonais que sejam capazes de neutralizar os efeitos tóxicos dos componentes dos venenos dessas aranhas. Nesse trabalho, uma proteína quimérica multiepitópica (rMEPLox), previamente produzida por nosso grupo, composta por epítopos derivados das principais famílias de toxinas do veneno de Loxosceles (fosfolipase, metaloprotease e hialuronidase), foi utilizada como antígeno para produzir anticorpos monoclonais (mAbs). O anticorpo monoclonal anti-rMEPLox selecionado (Lox-mAb3) reconhece metaloproteases do veneno de L. intermedia, as quais possuem cerca de 20 kDa, e apresentam reatividade cruzada com metaloproteases dos venenos de outras espécies de Loxosceles, L. laeta brasileira e peruana e L. gaucho através de imunoensaios. A sequêcia reconhecida por Lox-mAb3 (184ENNTRTIGPFDYDSIMLYGAY205) corresponde à região Cterminal da metaloprotease do tipo Astacina 1 e a sequência de aminoácidos IGPFDYDSI, conservada entre as sequências homologas de metaloproteases, é importante no reconhecimento do anticorpo. Lox-mAb3 neutraliza, in vitro, a atividade fibrinogenolítica das metaloproteases do veneno de L. intermedia, o que poderia reduzir os distúrbios hemorrágicos causados pelo envenenamento por Loxosceles. Outros mAbs foram produzidos utilizando rMEPLox como antígeno, porém suas capacidades de reconhecimento se limitam apenas a proteína multiepitópica, não reconhecendo o veneno de Loxosceles. Nossos resultados demonstram, pela primeira vez, o uso de uma proteína multiepitópica não tóxica na produção de anticorpos monoclonais neutralizantes contra metaloproteases de veneno loxoscélico de importância médica, podendo contribuir no melhoramento da produção de antivenenos terapêuticos contra o loxoscelismo.