Análises bioquímicas, biométricas, histológicas e imunológicas em ratos com nefropatia induzida pela doxorrubicina

• Autor(a) principal: Wagner de Fatima Pereira
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9ERJ9Z
• topic: Alterações bioquímicas; Síndrome nefrótica; CD80; CD18; Doxorrubicina; Modelo animal; Alterações biométricas; Estresse oxidativo; Fibrose renal; Rim/imunologia; Movimento celular; Sindrome nefrótica/induzido quimicamente; Experimentação animal; Rim/anatomia & histologia; Ratos Wistar; Doxorrubicina; Rim/química; Rim/efeito de drogas; Contagem de leucócitos; Estresse oxidativo; Pediatria

A Síndrome Nefrótica (SN) caracteriza-se por proteinúria, hipoalbuminemia, dislipidemia e edema. Diversas investigações associaram a SN às alterações na resposta imunológica. Esta investigação teve como objetivos avaliar o perfil do leucograma e investigar o estado de ativação/migração celular, através da expressão das moléculas CD80 e CD18, além de avaliar as alterações biométricas, bioquímicas e histológicas, bem como o status redox do tecido renal de ratos com SN induzida pela doxorrubicina. Utilizaram-se sessenta e quatro ratos Wistar, machos, com idade entre 6 e 8 semanas e peso médio de 300 gramas, obtidos do Centro de Bioterismo Cebio - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG Brasil). Os ratos foram divididos em dois grupos: DOX (n=32), que recebeu dose endovenosa única da doxorrubicina (7,5mg/kg) e CON (n=32), que recebeu injeção endovenosa de solução salina. Animais de cada grupo foram avaliados e sacrificados 7, 14, 21 e 28 dias após a injeção. Amostras urinárias de 24 horas foram coletadas nesses dias e amostras sanguíneas foram obtidas por punção cardíaca, sob anestesia. Após a anestesia e coleta do sangue os animais foram perfundidos com solução salina; tiveram os órgãos internos removidos, pesados em balanças eletrônicas semianalíticas e os rins fixados e processados de acordo com as diferentes técnicas histológicas e imuno-histoquímica empregadas. A leucometria total foi realizada em contador automático de células e a diferencial, pela análise do esfregaço sanguíneo, corado com Giemsa e May-Grunwald. A avaliação da ativação/migração dos leucócitos circulantes foi realizada por citometria de fluxo, com o uso de anticorpo monoclonal conjugados com fluorocromos. O status redox foi avaliado pela produção de TBARS e pela atividade antioxidante das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase, em amostras de tecido renal. Animais do grupo DOX desenvolveram proteinúria, dislipidemia, alterações biométricas com significante edema renal, infiltrado inflamatório túbulo intersticial crônico e fibrose renal. Mostraram, ainda, alterações na contagem total e diferencial dos leucócitos e aumento significativo na expressão de CD80 em monócitos e de CD18 em linfócitos T citotóxicos, células NK e monócitos do sangue periférico. Ocorreu aumento na peroxidação lipídica no tecido renal e correlação positiva com a expressão de CD80 em monócitos e com os níveis plasmáticos de creatinina. As alterações bioquímicas, nesse modelo animal surgem precocemente e servem como biomarcadores inespecíficos para a SN; as lesões histológicas tornam-se mais intensas a partir do 21º dia após a injeção do fármaco. As células citotóxicas e fagocíticas parecem ser preferencialmente recrutadas do sangue periférico para o foco da lesão. Estudos adicionais devem analisar os efeitos do bloqueio das integrinas e moléculas coestimulatórias, bem como a participação dos neutrófilos e das citocinas no mecanismo de ativação/migração celular. Devem analisar, ainda, a importância do edema renal na evolução da lesão renal, no modelo de SN induzida pela doxorrubicina.