Desvendando características biológicas e moleculares dos vírus gigantes: predição e análise de motivos promotores em Marseillevírus, Faustovírus e Kaumoebavírus e caracterização do efeito citopático do Tupanvírus em Acanthamoeba castellanii.

• Autor(a) principal: Graziele Pereira Oliveira
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/41325
• topic: Marseillevírus; Faustovírus; Kaumoebavírus; Promotor; Tupanvírus; Microbiologia; Marseillevírus; Faustovírus; Kaumoebavírus; Tupanvírus

A descoberta dos vírus gigantes levou à quebra de paradigmas no campo da virologia devido ao tamanho das partículas desses vírus e pela sua complexidade genômica e estrutural. Na última década, a busca por novos vírus gigantes foi intensificada levando a descoberta dos marseillevírus, faustovírus, kaumoebavírus e tupanvírus. Visto a necessidade de elucidar características biológicas e moleculares desses vírus que ainda permanecem sem resposta, esse trabalho teve como objetivo fazer a predição e análise de motivos promotores em vírus da família Marseilleviridae, em faustovírus e kaumoebavírus e a caracterização do efeito citopático do tupanvírus em Acanthamoeba castellanii. A predição e análise de motivos promotores levou a primeira caracterização de um octâmero (AAATATTT) que pode atuar como promotor em vírus da família Marseilleviridae. A distribuição e localização do motivo em relação ao códon de iniciação seguiu um padrão semelhante ao demonstrado para outros promotores descritos entre os membros que compõem o NCLDV. Além disso, a relevância biológica do octâmero predito foi demonstrada e a presença de repetições desse motivo nas regiões intergênicas do genoma de marseillevírus foi associada à elevada capacidade dos marseillevírus de adquirir genes por transferência gênica lateral contribuindo para explicar o seu mosaicismo e plasticidade genômica. Já a busca de motivos promotores em faustovírus e kaumoebavírus revelou que esses vírus compartilham em abundância as mesmas sequências promotoras (TATTT e TATATA) previamente descritas em vírus da família Asfarviridae. Foi demonstrado que os motivos preditos estão presentes em mais de 65% das regiões a montante dos genes compartilhados entre faustovírus, kaumoebavírus e asfarvírus reforçando a relação filogenética entre estes vírus. Além da regulação dos processos transcricionais, um importante desafio para os vírus na natureza é a busca por células hospedeiras. Nesse contexto nós realizamos uma caracterização detalhada do efeito citopático desenvolvido por tupanvírus em cultura de Acanthamoeba castellanii o que levou a descrição de um novo tipo de interação vírus-hospedeiro. Foi demonstrado que a infecção por tupanvírus é capaz de induzir a expressão de um gene que codifica uma proteína ligadora de manose viral e celular sugerindo a importância dessa proteína no ciclo de multiplicação do tupanvírus. Curiosamente, a adição de manose livre durante a multiplicação de tupanvírus levou não só a supressão do aumento do nível de transcritos dos genes da proteína ligadora de manose viral e celular como a inibição da formação do cacho de uma maneira concentração dependente, sugerindo que a formação de cachos correlaciona com a expressão dos genes que codifica a proteína ligadora de manose tanto viral quanto celular. Finalmente, nós demonstramos que os cachos formados durante a multiplicação de tupanvírus são capazes de interagir com células não infectadas contribuindo para a disseminação viral.