Estudos sobre a interação parasito-hospedeiro: papel das amastinas de Trypanosoma cruzi

• Autor(a) principal: Ramon Mendes de Almeida
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8QKGWR
• topic: Bioquimica e imunologia; Bioquímica; Tripanossoma cruzi; Relação hospedeiro-parasito; Amastinas

As amastinas são glicoproteínas de 170 a 200 aminoácidos, altamente hidrofóbicas, expressas não somente em amastigotas de T. cruzi, mas também em amastigotas de diversas espécies do gênero Leshmania. O genoma de T. cruzi contém 12 cópias de amastinas, as quais podem ser subdivididas em dois grupos: as amastinas estão organizadas em um agrupamento contendo genes de tuzinas, em contrapartida, as amastinas não são intercaladas pos tuzinas. Como as amastinas, mRNA dos membros do grupo é mais abundante no estágio amastigota do que nos outros estágios do parasito. Análise dos genes de amastina presentes no genoma mostrou que esses codificam proteínas com variabilidade de aminoácidos maior no domínio hidrofílico que supostamente está em contato com o citoplasma da célula hospedeira. Para investigar a função dessas proteínas, foram gerados parasitos que expressa amastina em fusão com GFP e ensaios de duplo híbrido foram realizados para identificar com quais proteínas humanas as amastinas podem interagir. Epimastigotas super expressando uma amastina em fusão com GFP alcançou maiores densidades na cultura em comparação com as epimastigotas que expressam GFP somente. A partir dos ensaios de duplo híbrido, 10 clones positivos foram encontrados, sendo que dois deles continham cDNA codificante para IL-15 (Teixeira et al., dados não publicados). Foi observado que IL-15 em fusão com histidina interage com amastina em experimentos de pull down in vitro. Experimentos de infecção de células HEK293T expressando a forma intracelular de IL-15 com tripomastigotas da cepa CL Brener resultou em taxas mais elevadas de infecção e de número de amastigotas intracelulares em comparação com as células não transfectadas.