Papel das espécies reativas de oxigênio e do óxido nítrico no remodelamento eletromecânico do coração durante a fase aguda da cardiomiopatia chagásica

• Autor(a) principal: Artur Santos Miranda
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/FAMM-BD43RY
• topic: Óxido nítrico; Excitabilidade; Arritmias; Coração; Espécies reativas de oxigênio; Doença de Chagas; Contratilidade; Bioquímica; Óxido Nítrico; Espécies Reativas de Oxigênio; Doença de Chagas; Cardiopatias

A infecção por Trypanosoma cruzi leva ao desenvolvimento de uma resposta inflamatória intensa. Dentre as consequências dessa inflamação, altos níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) e óxido nítrico (NO) são produzidos, os quais atuam como efetores importantes mediando o controle dos parasitas e consequentemente da infecção, mas também podem causar dano tecidual inespecífico quando em concentrações exacerbadas. Em relação ao tecido cardíaco, ROS e NO já foram associados à capacidade de regular a função de muitos componentes envolvidos na manutenção das propriedades mecânicas e elétricas dos cardiomiócitos, bem como no fenômeno do acoplamento excitação-contração nestas células. Portanto, é razoável supor que essa produção de moléculas reativas tem um papel importante durante o estabelecimento da cardiomiopatia chagásica. Dessa forma, este estudo teve como objetivo investigar o envolvimento da produção e equilíbrio entre ROS e NO no remodelamento eletromecânico do coração durante a fase aguda da Doença de Chagas. Camundongos Wild-Type (WT) e deficientes para NADPH oxidase 2 (PHOXKO) foram infectados ou não com T. cruzi da cepa Y (i.p.). Todos os experimentos foram realizados após 15 ± 1 dias de infecção (dpi). Para os ensaios celulares, os cardiomiócitos foram isolados por meio da perfusão de uma solução nutritiva contendo uma mistura de enzimas através de um sistema de Langendorff, seguido por dispersão mecânica, em um gradiente de concentração crescente de cálcio. Foi observado que camundongos PHOXKO 15dpi apresentaram prolongamento do tempo para repolarização do potencial de ação (PA) em comparação com os outros grupos, os quais foram semelhantes entre si. No entanto PHOXKO 15dpi não tiveram alterações nas correntes de cálcio e de potássio de saída em comparação com os controles, em oposição aos cardiomiócitos provenientes de animais WT 15dpi, que tiveram uma redução em ambos os componentes. O aumento da duração do PA (APD) em PHOXKO 15dpi foi acompanhado pelo aumento da alternância do PA neste grupo, a qual tem sido relacionada à geração de arritmias graves. Tais alternâncias da APD foram melhoradas por pré-incubação com o inibidor das sintases de NO, L-NAME, embora o aumento da APD manteve-se inalterado. Além disso, ambos os camundongos WT e PHOXKO infectados apresentaram redução da fração de encurtamento celular, e o L-NAME foi capaz de restaurar este parâmetro apenas no grupo WT 15dpi. Além disso, os cardiomiócitos de PHOXKO 15dpi apresentaram níveis mais elevados de contrações arrítmicas independentes da estimulação de campo, quando comparado com outros grupos, as quais foram abolidas pela exposição ao L-NAME. Essas alterações na excitabilidade e contratilidade celular foram associadas à redução do transiente de cálcio em PHOXKO 15dpi quando comparado aos outros grupos, apesar de nenhuma diferença ter sido observada em sua fase de decaimento. A redução observada no pico do transiente nos animais PHOXKO 15dpi não foi restaurada pelo L-NAME. O conjunto de observações a nível celular refletiu-se em mudanças substanciais na função cardíaca estudada pela técnica de coração isolado, apesar de não haver diferenças significativas na tensão sistólica do coração entre os grupos. Também camundongos PHOXKO 15dpi apresentaram altas taxas de arritmias graves obervadas no eletrocardiograma e redução da pressão arterial média estudada a partir da técnica de plestimografia de cauda. Com esses dados podemos então, concluir que a produção de ROS e NO modula diretamente as alterações eletromecânicas do coração durante a fase aguda da cardiopatia chagásica.